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苹果叶枯丝核菌生物学特性



全 文 :收稿日期:2014 - 03 - 26
作者简介:赵俊芳(1969—),河南南乐人,高级工程师,主要从事林
木病虫害防治研究。
苹果叶枯丝核菌生物学特性
赵俊芳1,乔趁峰1,杨玉巧1,王苍文2,李洁茹1,彭国安3
(1.濮阳市林业科学院,河南 濮阳 457000;2.濮阳市园林绿化处,河南 濮阳 457000;3.信阳市新县林业局,河南 信阳 464000)
摘要:苹果叶枯丝核病病原菌 Rhizctonia solani kühn 适宜生长的温度为 23 ~ 30 ℃,最适为 25 ℃;
25 ℃条件下培养 96 h后形成菌核,低于 5 ℃和高于 38 ℃停止生长。 - 20 ℃存放 1 a 仍能 100%
存活,- 40 ℃,72 h存活 50%。该病原菌有较强的耐受低温的能力,在河南省不受最低温度的影
响,可以正常越冬。该病原菌适宜生长的 pH值为 6. 07 ~ 7. 5,最适 pH 6. 55,pH值高于 12. 29 菌丝
不能生长。
关键词:苹果;叶枯病;立枯丝核菌;生物学特性
中图分类号:S763. 15 文献标志码:A 文章编号:1671 - 0886(2014)04 - 0023 - 02
Bionomics of pathogen Rhizoctonia solani kühn causing leaf blight in Malus pumila /ZHAO Jun-
fang,et al.(Puyang Forestry Academy of Henan Province,Puyang 457000,China)
Abstract:The suitable temperature range for the growth of Rhizoctonia solani kühn was 23-30 ℃ . The
optimum temperature was 25 ℃ at which sclerotia formed after 96 hours. But the growth of Rh. solani
kühn stopped at the temperatures below 5 ℃ and above 38 ℃ . Its low temperature tolerance was stron-
ger. All of sclerotials survived a year at - 20 ℃ and 50% survived 72 hours at - 40 ℃ . They could
overwintering normally in Henan Province of China. The suitable pH value range for growth was 6. 07-
7. 5 and the optimum pH value was 6. 55. The mycelium growth stopped when the pH value reached
12. 29 or more.
Key words:Malus pumila;leaf blight;Rhizctonia solani kühn;bionomics
苹果叶枯丝核病的病原菌是立枯丝核菌 Rhi-
zoctonia solani kühn,是 2011 年分离鉴定的苹果上
的新病原菌[1]。该病是近几年河南苹果树上发生
的一种新病害,主要分布在濮阳市南乐县、清丰县,
安阳市内黄县,郑州市中牟县,商丘市虞城县等地,
发病日趋严重。2011 年调查,病害严重的果园病株
率 90%以上,病枝率 50%以上,不仅影响当年苹果
产量,且因影响花芽形成和正常开花而导致下一年
减产。为明确苹果叶枯丝核病病原菌的生物学特
性,作者于 2011—2013 年进行了温度和 pH 值对苹
果叶枯丝核菌生长影响的试验。
1 材料和方法
1. 1 供试病原菌 从河南省内黄县中召乡徐寨苹
果园叶枯病树上采样,用常规组织分离方法获得立
枯丝核菌。在 PDA 培养基(马铃薯葡萄糖琼脂和
0. 05 g 氯霉素)上经过纯化、扩繁后备用。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 不同温度下病菌的生长速度 将分离纯化
好的病原菌(直径 5 mm 的病原菌菌饼)直接接种在
90 mm PDA 培养基平板中心,密封和标记,分别置
于 5,7,10,13,15,17,19,20,23,25,28,30,33,35,
38,40 ℃等 16 个温度的恒温培养箱内培养。每温
度 5 个培养皿,试验重复做 3 次。接种后 24,48 h
用十字交叉法测量每处理的菌落直径,比较在不同
温度条件下的菌丝生长速度和菌核产生情况。
1. 2. 2 低温对病菌生命力的影响 将从田间采回
的带有菌核的枝条放入 - 10,- 20,- 25,- 30,-
35,- 40 ℃的冰冻冰箱保存。分别于 24,48,72 h后
取出,其中 - 20 ℃的保存 1 a后取出,把菌核取出接
种到 PDA 培养基平板中心,置于 25 ℃恒温培养箱
内保湿培养,观察菌核的生命力。
·32·中国森林病虫 2014 年 7 月 第 33 卷 第 4 期
1. 2. 3 不同 pH 值下病菌的生长速度 用盐酸和
氢氧化钠调节 PDA 培养基的 pH 值,用 ZD - 3A 自
动电位滴定仪准确测量各培养基的 pH 值。培养基
的 pH值分别为 3. 03,4. 23,4. 96,5. 44,6. 07,6. 55,
7. 5,8. 79,10. 27,11. 58,12. 29,12. 87 共 12 个梯度,
未加盐酸或氢氧化钠的培养基(原始培养基)pH 值
为 6. 07。然后将分离纯化好的直径为 5 mm 的病原
菌菌饼接种在 100 mm 的 PDA 培养基平板中心,密
封、标记,置于 25 ℃恒温培养箱内培养。每处理 5
次重复。接种后 24,48 h 用十字交叉法测量每处理
的菌落直径。48 h后每天定时观察,比较在不同 pH
条件下的菌丝生长速度和菌核产生情况。
2 结果与分析
2. 1 不同温度对病菌生长的影响 不同温度下菌
丝生长情况见图 1。在 PDA 培养基上的 16 个温度
培养中,低于 5 ℃和高于 38 ℃菌丝停止生长,在
7 ~ 35 ℃均能生长,以 23 ~ 30 ℃较为适宜,最适宜
为25 ℃。在 25 ℃ 条件下生长 24 h 菌落直径为
33. 17 mm,48 h 为 76. 23 mm,72 h 菌丝长满皿,
96 h后有菌核形成;在 5 ℃和 38 ℃条件下 24 h 和
48 h均未长出菌丝;在 7 ~ 23 ℃和 30 ~ 35 ℃菌丝虽
能生长但扩展缓慢,菌丝密集,颜色比正常的白。
图 1 不同温度下的菌落直径
2. 2 低温对病菌生命力的影响 在 - 10,- 20,-
25,- 30,- 35,- 40 ℃的冰冻冰箱存放的菌核分别
在 24,48,72 h后取出的都有存活,温度越低存活率
越低,- 20 ℃以上 100%存活,- 40 ℃在 72 h 存活
50%;- 20 ℃存放 1 a仍能 100%存活。
2. 3 不同 pH值对病菌生长的影响 不同 pH值时
病菌的生长情况见图 2。在设置的 12 个梯度中 pH
值在 3. 03 ~ 11. 58 病原菌均能生长,48 h 的菌落直
径分别为 24. 5,67. 33,78. 5,81. 17,100,100,100,
5 7. 67,24,11. 5 mm。pH值在6. 07 ~ 7. 5时生长最
快,24 h 的 菌 落 直 径 分 别 为 40. 83,40. 67,
38. 67 mm,48 h后均长满皿。
48 h观察 pH值为 3. 03 时菌丝生长稀疏,颜色
发白似霜;pH 值 8. 79 以上也存在这一现象。96 h
后 pH 值为 3. 03 的菌丝没有大的扩展,颜色变白;
pH值为 4. 23 和 4. 96 的菌丝长满皿,有少量菌核形
成,但与 pH 值为 6. 07 相比菌丝稍稀疏,菌核量也
少;pH值为 5. 44,6. 55 和 7. 5 的菌丝生长长度、稀
疏程度、菌核量同 pH 值为 6. 07 没有差异;pH 值为
8. 79 菌丝长满皿,但菌核量没有 pH 值为 6. 07 的
多;pH值为 10. 27 的菌丝未满皿,有极少量白色菌
核形成;pH值为 11. 58 菌丝扩展缓慢与 48 h 比没
有显著差异,菌丝密集,形成了菌核。
图 2 不同 pH值条件下的菌落直径
3 结论与讨论
苹果叶枯病病原叶枯丝核菌适宜生长的温度为
23 ~ 30 ℃,最适宜生长为 25 ℃。低于 5 ℃和高于
38 ℃停止生长,在最适温度下 72 h后形成菌核。
菌核在 - 20 ℃ 冰冻存放,72 h 100% 存活,
- 40 ℃冰冻存放,72 h 存活 50%;- 20 ℃存放 1 a
仍能 100%存活。该病原菌有较强的耐受低温的能
力,在河南省最低温对其正常越冬没有影响。
该病原菌适宜生长的 pH值为 6. 07 ~ 7. 5,最适
宜生长 pH值为 6. 55,pH值高于 12. 29 菌丝则不能
生长。
参考文献:
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病原鉴定[J].中国果树,2011(4):38 - 41.
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(责任编辑 杨静莉)
·42· Forest Pest and Disease Jul. 2014 No. 4