全 文 ：第 23卷　第 1期 　　　　　　　　　　　　　　云南农业大学学报　　　　　　　 Vol.23　No.1
2008年　1月 　　　　　　　　　　JournalofYunnanAgriculturalUniversity　　　　　 Jan.2008
　收稿日期:2007-03-12　　修回日期:2007-05-10　
＊基金项目:云南农业大学青年基金项目 (A2002002)　　　　＊＊通讯作者
　作者简介:陈贤 (1972-), 男 , 云南思茅市人 , 硕士 , 讲师 , 主要从事园林园艺植物遗传育种 、 苗木生产和试
验统计的教学与研究。 E-mail:cx7201@sina.com
野生柱穗醉鱼草组培快繁技术体系的研究 (Ⅰ )
外植体的诱导培养＊
陈　贤 , 杨　德 , 关文灵＊＊
(云南农业大学园林园艺学院 , 云南 昆明 650201)
摘要:对野生柱穗醉鱼草离体诱导培养进行了探索 , 分析了 6-BA和 NAA浓度及升汞消毒时间对野生柱穗醉
鱼草组培快繁技术体系的影响。结果表明:外植体消毒用 0.1%升汞液浸泡 7min效果较好 , 最佳外植体培养
基是 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.02mg/L。
关键词:柱穗醉鱼草;组织培养;快速繁殖
中图分类号:S687.9.035.2　　文献标识码:A　　文章编号:1004-390X(2008)01-0019-03
StudyontheFastPropagationSystemofBuddejacylindrostachya
inTisueCulture(Ⅰ )theExplantsCulture
CHENXian, YANGDe, GUANWen-ling
(FacultyofLandscapeandHortioulture, YunnanAgriculturalUniversity, Kunming650201, China)
Abstract:ThepreliminarystudywascariedoutontheexplantscultureofBuddejaCylindrostachya,
throughanalyzingtheefectsof3 factors(theconcentrationof6-BAandNAAandthedisinfection
timewithmercuricchloridetothesystem).Theresultsshowedthatthedisinfectionmethodthatthe
explantsweremarinatedwith0.1% mercuricchloridefor7minhadtheoptimalefect.Theoptimal
mediaappliedtocultureexplantswereMS+6-BA0.5mg/L+NAA0.02mg/L.
Keywords:Buddejacylindrostachya;tissueculture;fastpropagation
　　柱穗醉鱼草 (Buddlejacylindrostachya)是马
钱科醉鱼草属的野生观赏植物 [ 1] , 集中分布于滇
中 、滇南海拔 1 300 ～ 2 700 m的干旱山坡上 , 常
绿灌木 , 高可达 5 m, 紫红色或粉红色小花组成
总状聚伞花序 , 密集成圆柱形 , 长 15 ～ 40 cm,
花期 11月至翌年元月 , 花期长 , 花序大而色泽幽
雅 , 清香扑鼻;其叶和嫩枝密被白色星状毛和金
黄色腺点 , 颇有观赏价值 。目前国内外开发出的
醉鱼草品种都在夏秋开花 , 柱穗醉鱼草却是该属
植物中少有的在冬季开花的类型 , 极具开发前景。
国内对醉鱼草属植物的研究较晚 , 近年来只有少
数如皱叶醉鱼草的引种栽培等报道 , 而对柱穗醉
鱼草繁殖 、 引种驯化和开发方面的研究国内外少
见报道 , 本研究对这一野生观赏植物的组培快繁
技术体系的构建进行了研究。
1　材料与方法
1.1　材料
材料采自滇中哀牢山区的柱穗醉鱼草母株 ,
外植体选取秋季饱满嫩芽 。
1.2　方法
按多因子试验 [ 2]进行 , 培养基为 MS培养基 ,
蔗糖 30 g/L, 琼脂 6.5 g/L, pH5.8, 培养温度
(23±2)℃, 日光灯辅助照明每天 12 h, 强度约
DOI :10.16211/j.issn.1004-390x(n).2008.01.020
20 000lx, 处理因子为 MS培养基中的细胞分裂素 6
-BA的浓度 (A因子 , 3水平)、 生长素 NAA的
浓度 (B因子 , 3水平)和外植体的升汞消毒时间
(C因子 , 3水平), 因子水平如下 (见表 1):
表 1　试验因子水平的汇总表
Tab.1　Thegeneraltableofthelevelsof
factorsoftheexperiment
水平
level
A因子
factorA
6-BA
/ (mg·L-1)
B因子
factorB
NAA
/ (mg·L-1)
C因子 factorC
升汞消毒时间 /min
disinfectiontime
withmercuricchloride
水平 1 level1 0.1 0 4
水平 2 level2 0.5 0.02 7
水平 3 level3 1 0.1 10
A1:MS培养基中添加 6-BA的浓度为 0.1mg/L;
A2:MS培养基中添加 6-BA的浓度为 0.5mg/L;
A3:MS培养基中添加 6-BA的浓度为 1mg/L;
B1:MS培养基中添加 6-BA的浓度为 0mg/L;
B2:MS培养基中添加 6 -BA的浓度为 0.02
mg/L;
B3:MS培养基中添加 6-BA的浓度为 0.1mg/L;
C1:外植体消毒时 , 用 0.1%升汞液浸泡 4min;
C2:外植体消毒时 , 用 0.1%升汞液浸泡 7min;
C3:外植体消毒时 , 用 0.1%升汞液浸泡 10min;
试验结合 A因子 、 B因子和 C因子各 3水平
进行 , 为了减少处理数 , 增加试验基数 (重复
数), 把试验重点集中到重要的处理上 , 试验设
计采用正交设计 L9 (34)[ 1] , 共 9个处理 , 每处
理 15瓶 (处理组合见表 2)。
培养基采用 MS培养基 , 添加不同浓度的细
胞分裂素 6-BA(A因子)和不同浓度的生长素
NAA(B因子)的组合。
试材取好后 24h内带回实验室 , 先剥掉嫩芽
最外叶 , 然后用毛笔刷掉嫩芽外叶上的绒毛 , 再
用洗衣粉液浸泡 15min, 用清水冲洗干净 。
外植体洗净后转移至超净工作台上 , 用 75%
酒精中浸泡 30s, 用无菌水冲洗 3次 , 再用 0.1%
的升汞液浸泡不同时间 (C因子), 无菌水冲洗 5
次 , 用剥去嫩芽的外叶接种。
2　结果分析
外植体接种 1周后 , 腋芽开始膨大 , 萌动 ,
随后长出叶片 , 同时在外植体基部膨大形成愈伤
组织 。培养 20d后 , 对 C因子 (汞消毒时间)效
果统计 , 如表 3所述 , 采用 C2水平 (外植体消
毒时 , 用 0.1%升汞液浸泡 7min)效果较好 , 既
可基本杀死微生物 , 又不毒害植物 。
表 2　第一阶段试验正交设计的处理组合
Tab.2　Thetreatmentcombinationsoftheorthogonal
designoftheNo.1 stepoftheexperiment
处理
treatment
因子及水平 factor＆level
A因子
factorA
6-BA/
(mg·L-1)
B因子
factorB
NAA/
(mg·L-1)
C因子 factorC
汞消毒时间 /min
disinfectiontime
withmercuricchloride
处理 1-1
treatment1-1 A1=0.1 B1=0 C3=10
处理 1-2
treatment1-2 A2=0.5 B1=0 C1=4
处理 1-3
treatment1-3 A3=1 B1=0 C2=7
处理 1-4
treatment1-4 A1=0.1 B2=0.02 C1=4
处理 1-5
treatment1-5 A2=0.5 B2=0.02 C2=7
处理 1-6
treatment1-6 A3=1 B2=0.02 C3=10
处理 1-7
treatment1-7 A1=0.1 B3=0.1 C2=7
处理 1-8
treatment1-8 A2=0.5 B3=0.1 C3=10
处理 1-9
treatment1-9 A3=1 B3=0.1 C1=4
注:试验采用正交设计 L9 (34)法。
Note:theexperimentisfromtheorthogonaldesignL9 (34).
表 3　不同消毒时间对外植体的消毒效果
Tab.3　Theeffectsofthediferenttimeofdisinfection
C因子 (升汞消毒时间) /min
FactorC(Thedisinfectiontime
withmercuricchloride)
污染率 /%
rateof
polution
成活率 /%
survival
rate
C1=4 100 0
C2=7 13 38
C3=10 6.6 0
不同浓度的 6 -BA和 NAA组合 , 柱穗醉鱼
草的启动受 NAA影响很大。没有 NAA存在的情
况下 , 材料容易形成愈伤组织 , 形成少量丛生芽;
当 NAA浓度为 0.02mg/L时 , 腋芽萌动最快 , 芽
粗壮 , 颜色浓绿 , 分化的节数最多 , 经培养 5周
20 云南农业大学学报 　　　　　　　　　　　　　　第 23卷
后 , 可达到 4 ～ 5个节 , 当 NAA浓度为 0.1时 ,
开始形成腋芽 , 随着培养时间的加长 , 基部愈伤
组织逐渐增多。
较好的处理有:处理 1-5 (A2B2C2), 处理 1
-3 (A3B1C2), 处理 1-7 (A1B3C2), 情形如下
(见表 4):
表 4　对芽分化较好的处理
Tab.4　Thegoodtreatmentsforthediferentiationofbuds
处理
treatment
处理 1-5
treatment1-5　
处理 1-3
treatment1-3
处理 1-7
　treatment1-7
平均分化率 /%
averagerate
ofdiferentiation
50 33 22
处理 1-5诱导产物为丛生芽;处理 1 -3诱
导产物为愈伤组织 , 少量丛生芽;处理 1-7诱导
产物为愈伤组织;
以处理 1-5 (6-BA浓度为 0.5mg/L, NAA
浓度为 0.02 mg/L)效果最好 , 腋芽萌动最快 ,
芽粗壮 , 颜色浓绿 , 分化的节数最多 , 经培养 5
周后 , 可达到 4 ～ 5个节 , 所以在启动培养基上 6
-BA1.0mg/L, 生长素 0.02mg/L较适合 , 诱导
培养基以 MS+6BA0.5 mg/L+NAA0.02 mg/
L为宜 。
3　结论和讨论
研究表明:外植体消毒用 0.1%升汞液浸泡 7
min效果较好 , 既可基本杀死微生物 , 又不毒害
植物。较适宜的诱导培养基是 MS+6 -BA0.5
mg/L+NAA0.02mg/L, 为下一步野生柱穗醉鱼
草的快繁技术体系的研究打下了基础。
用组培方法可以使柱穗醉鱼草达到快速繁殖
的目的 , 以解决大量园林绿地栽培的需要 , 同时
由于目前柱穗醉鱼草组织培养少见报道 , 本试验
研究的进一步深化 , 可为丰富园林树种做出贡献 。
柱穗醉鱼草的组织培养中 , 外植体消毒是一
个比较重要的环节 , 柱穗醉鱼草处于芽膨大始期 ,
被表面密被白色星状毛的外叶包裹 , 使其消毒不
易彻底 , 加上柱穗醉鱼草对消毒剂特别敏感 , 稍
过量便会中毒死亡。
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