全 文 ：新疆产阿育魏实挥发油及不同极性部位抗氧化活性研究
刘玲玲，王强＊，高晶，张正方，唐军
（新疆大学理化测试中心，乌鲁木齐　８３００４６）
摘要：采用２，２＇连氨－双－（３－乙基苯并噻唑啉－６－磺酸）二胺盐（ＡＢＴＳ）和二苯代苦味酰基自由基（ＤＰＰＨ），
还原能力法对阿育魏实抗氧化活性进行研究，并测定了各样品中总酚和总黄酮含量。结果表明：阿育魏
实挥发油和甲醇提取物具有明显的抗氧化能力，清除ＤＰＰＨ·ＩＣ５０为０．２２ｍｇ／ｍＬ和０．１６ｍｇ／ｍＬ，
ＡＢＴＳ·ＩＣ５０为３．８２ｍｇ／ｍＬ和３．２０ｍｇ／ｍＬ。在３ｍｇ／ｍＬ时，挥发油和不同溶剂提取物中甲醇提取
物表现出较好的还原能力。挥发油和提取物抗氧化活性与酚类和黄酮类化合物具有很大相关性。
关键词：阿育魏实；溶剂萃取；抗氧化；总酚总黄酮
中图分类号：ＴＳ２０２．３　　　文献标识码：Ａ　 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－９９７３．２０１３．０４．０１５
文章编号：１０００－９９７３（２０１３）０４－００６１－０４
Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｎ　Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｄｉｆｅｒｅｎｔ　Ｐｏｌａｒ　Ｆｒａｃｔｉｏｎｓ　ａｎｄ
Ｖｏｌａｔｉｌｅ　Ｏｉｌ　ｏｆ　Ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ　ａｍｍｉ　Ｌ．Ｓｐｒａｇｕｅ　ｉｎ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ
ＬＩＵ　Ｌｉｎｇ－ｌｉｎｇ，ＷＡＮＧ　Ｑｉａｎｇ＊，ＧＡＯ　Ｊｉｎｇ，ＺＨＡＮＧ　Ｚｈｅｎｇ－ｆａｎｇ，ＴＡＮＧ　Ｊｕｎ
（Ｃｅｎｔｅｒ　ｆｏｒ　Ｐｈｙｓｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ　８３００４６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌ（ＥＯ）ａｎｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｓｏｌｖｅｎｔｓ　ｔｈａｔ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ
ｆｒｏｍＴｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ　ａｍｍｉ　Ｌ．Ｓｐｒａｇｕｅ（Ｔ．ａｍｍｉ）．Ｔｈｅ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　Ｔ．ａｍｍｉ　ＥＯ　ａｒｅ
ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ＡＢＴＳ　ａｎｄ　ＤＰＰＨ　ｂｙ　Ｃａｐａｃｉｔｙ　Ｒｅｄｕｃｉｎｇ　Ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｐｈｅｎｏｌ　ａｎｄ
ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌ　ａｎｄ　ｓｏｌｖｅｎｔｓ　ａｒｅ　ａｌｓｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｔｈｅ　ＥＯ　ａｎｄ　ｍｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ（ＭＥ）ｈａｖｅ
ｇｏｏｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｎ　ＡＢＴＳ　ａｎｄ　ＤＰＰＨ　ｒａｄｉｃａｌｓ，ｔｈｅ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ＤＰＰＨ　ｗｉｔｈ　ａｎ
ＩＣ５０ａｒｅ　０．２２，０．１６ｍｇ／ｍＬ，ｗｈｉｌｅ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ＡＢＴＳ　ｗｉｔｈ　ａｎ　ＩＣ５０ａｒｅ　３．８２，３．２０ｍｇ／ｍＬ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
Ｔｈｅ　ｍｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｈａｓ　ａ　ｇｏｏｄ　ｒｅｄｕｃｉｎｇ　ｃａｐａｃｉｔｙ　ａｔ　３ｍｇ／ｍＬ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｓ．Ｔｈｅｒｅ　ｉｓ
ａｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｐｈｅｎｏｌｉｃ　ａｎｄ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｏｆ
ｔｈｅ　ＥＯ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ　ａｍｍｉ　Ｌ．Ｓｐｒａｇｕｅ；ｓｏｌｖｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｔｏｔａｌ　ｐｈｅｎｏｌ
ａｎｄ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
　　阿育魏实（Ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ　ａｍｍｉ　Ｌ．Ｓｐｒａｇｕｅ）为伞
形科糙果芹属植物阿育魏的成熟果实，是传统的维吾尔
药材［１］。用于胃腹寒满，恶心呕吐，食欲不振，肠炎痢疾；
外用治疗疮疖肿毒及其他皮肤病［２］。其挥发油主要成分
为麝香草酚，是一种很强的抗痉挛剂和杀真菌剂［３，４］，还
具有抑菌、龋齿防腐及驱钩虫等生理药理作用［５，６］。此
外，阿育魏实因其风味独特还用于烹饪，在印度及我国新
疆和田、喀什等地民间常用作素食调料。
收稿日期：２０１２－１１－３０　　　　　　　　＊通讯作者
基金项目：新疆维吾尔自治区高校科研计划项目（ＸＪＵＥＤＵ２０１１Ｉ０４）
作者简介：刘玲玲（１９８８－），女，回族，硕士研究生，主要从事分析化学及天然药物化学研究工作。
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２０１３年第４期
总第３８卷
　　　　　　　　　　　　　　　中 国 调 味 品
ＣＨＩＮＡ　ＣＯＮＤＩＭＥＮＴ 试验研究　　
目前，国内外阿育魏实相关研究主要集中在挥发油抑
菌和化学成分等方面［７］，对其抗氧化活性研究相对较
少。大量研究表明：当人体内活动产生自由基过量时，
会引起衰老、肿瘤、炎症等［８，９］。本研究以阿育魏实挥
发油和不同溶剂提取物为研究对象，采用 ＤＰＰＨ、
ＡＢＴＳ和还原能力法评价其抗氧化活性，并测定其总
酚和总黄酮含量。为将这一新疆特色植物资源开发成
为药食两用调味品提供依据。
１　材料与方法
１．１　实验材料、仪器
阿育魏实：购于新疆维吾尔医药市场，经新疆药物
研究所杨伟俊博士鉴定为伞形科植物阿育魏（Ｔｒａｃｈ－
ｙｓｐｅｒｍｕｍ　ａｍｍｉ　Ｌ．Ｓｐｒａｇｕｅ）的干燥成熟果实，标本
存放于新疆维吾尔自治区药物研究所标本室。实验所
用２，６－二叔丁基对甲酚（ＢＨＴ）、抗坏血酸（Ｖｃ）、碳酸
钠、过硫酸钾、铁氰化钾、没食子酸、芦丁等均为分析
纯。福林酚试剂，自制［１０］；ＤＰＰＨ 和 ＡＢＴＳ购买于
Ｓｉｇｍａ公司。
ＲＥ－５２９８Ａ旋转蒸发仪　上海亚荣生化仪器厂；
紫外可见光分光光度计　ＰＥＲＫＩＮ－ＥＬＭＥＲ；索氏提
取装置（参照中国药典制造）；ＬＤ４－２离心机　北京医
用离心机厂。
１．２　实验方法
１．２．１　挥发油制备
将阿育魏实用蒸馏水洗净，放置在阴凉处晾干，粉
碎，过２０目筛。称取１００ｇ阿育魏实装入水蒸气蒸馏
仪，加入适量蒸馏水浸泡过夜，按中国药典２０１０版药
典一部附录ＸＤ挥发油测定法提取挥发油［１１］，蒸馏时
间６ｈ。所得挥发油的油水混合液经乙醚萃取，所得
油为淡黄色，具有特殊气味。以无水硫酸钠干燥后于
－４℃下保存待用。
１．２．２　溶剂萃取物制备
阿育魏实干燥种子，粉碎，过２０目筛。分别称取
４份阿育魏实粉末２５ｇ，包于滤纸中置于索式提取器，
按料液比１∶１０（Ｗ／Ｖ）加入不同极性的有机溶剂于圆
底烧瓶中分别进行提取，加热回流提取４ｈ，反复３～
５次，合并回收有机溶剂，用旋转蒸发仪浓缩提取物。
制得甲醇提取物（ＭＥ）、乙酸乙酯提取物（ＥＡ）、二氯甲
烷提取物（ＤＣＭ）和正己烷提取物（ＨＥ）。
１．２．３　总酚测定［１２］
标准曲线的绘制：没食子酸配制成质量浓度梯度
为１０～６０μｇ／ｍＬ的没食子酸样液，移取上述样液
１ｍＬ，加入５ｍＬ水，再加入Ｆｏｌｉｎ－Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ＇ｓ　ｐｈｅｎｏｌ
试剂１ｍＬ和７．５％ Ｎａ２ＣＯ３ 溶液３ｍＬ，室温避光静
置１２０ｍｉｎ，在７６５ｎｍ下测定Ａ７６５。用样品代替没食
子酸，步骤同上，测定吸光值，根据标准曲线计算总酚
当量，总酚含量以每毫克干物质的没食子酸当量（μｇ）
表示，所有测定平行３次取平均值。
１．２．４　总黄酮测定
将芦丁配置成浓度为０．２ｍｇ／ｍＬ的标准对照品
溶液备用。移取０．２～４．０ｍＬ芦丁对照品溶液于具
塞试管中，加入５％亚硝酸钠溶液 ０．４ ｍＬ，放置
６ｍｉｎ，加入１０％ 硝酸铝溶液０．４ｍＬ，放置６ｍｉｎ，４％
氢氧化钠４ｍＬ，放置６ｍｉｎ。用甲醇定容至１０ｍＬ，静
置１５ｍｉｎ后，在波长５１０ｎｍ处测定 Ａ５１０。绘制标准
曲线。以样品代替芦丁，步骤同上，测定Ａ５１０，根据标
准曲线计算总黄酮含量以每毫克干物质的芦丁当量
（μｇ）表示，所有测定平行３次取平均值。
１．２．５　ＤＰＰＨ自由基清除能力测定
参照文献［１３］方法，稍作修改。配制ＤＰＰＨ自由
基甲醇溶液，将样品用甲醇配制成一系列浓度，取
２．０ｍＬ样品加入２．０ｍＬ　０．０２ｍｍｏｌ／Ｌ　ＤＰＰＨ 甲醇
溶液，２５ ℃水浴加热３０ｍｉｎ后在５１７ｎｍ 处测定
Ａ５１７。每组实验平行测定３次，计算公式为：
清除率（％）＝［（Ａ空白－Ａ样品）／Ａ空白］×１００％。
式中：Ａ空白为ＤＰＰＨ与甲醇各２．０ｍＬ混合后溶
液的吸光度，Ａ样品为ＤＰＰＨ 与样品溶液各２．０ｍＬ混
合后的吸光度。以ＢＨＴ和 Ｖｃ 做为阳性参照。每组
平行测３次取平均值。
１．２．６　ＡＢＴＳ自由基清除能力的测定
参照文献［１４］方法。每份样品平行操作３次。计
算清除率和ＩＣ５０值。计算公式与ＤＰＰＨ 自由基清除
率相同。以ＢＨＴ和 Ｖｃ 做为阳性参照。每组实验平
行测３次取平均值。
１．２．７　还原能力测定
采用铁氰化钾还原法［１５］，参照文献方法配制溶
液，样品浓度稍作调整，于波长７００ｎｍ 处测定吸光
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试验研究　　２０１３年第４期
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ＣＨＩＮＡ　ＣＯＮＤＩＭＥＮＴ
值。以蒸馏水做参比溶液，同时用ＢＨＴ和Ｖｃ作对比
试验，每组实验重复３次，取平均值。溶液吸光度越大
则样品的还原能力越强。
２　结果与讨论
２．１　挥发油成分分析
采用水蒸气蒸馏的方法提取阿育魏实挥发油，
ＧＣ／ＭＳ联用技术对挥发油成分进行分离鉴定，并采
用面积归一化法确定各成分的相对质量分数，主要成
分为ｐ－伞花烃（２８．５５％）、γ－萜品烯 （３２．９４％）、麝香
草酚（２１．４４％）等，与文献报道一致。
２．２　抗氧化活性的测定
２．２．１　ＤＰＰＨ自由基的清除作用
挥发油和不同溶剂提取物清除ＤＰＰＨ 自由基的
ＩＣ５０见表１。
表１　阿育魏实挥发油和不同提取物
ＤＰＰＨ，ＡＢＴＳ自由基的ＩＣ５０
Ｔａｂｌｅ　１Ｔｈｅ　ＩＣ５０ｏｆ　ＤＰＰＨ　ａｎｄ　ＡＢＴＳ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｓｏｌｖｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　Ｔ．ａｍｍｉ
萃取物 ＤＰＰＨ（ＩＣ５０，ｍｇ／ｍＬ－１） ＡＢＴＳ（ＩＣ５０，ｍｇ／ｍＬ－１）
ＥＯ　 ０．２２　 ３．８２
ＭＥ　 ０．１６　 ３．２１
ＥＡ　 ０．５９　 ５．２２
ＤＣＭ　 ０．８８　 ７．４４
ＨＥ　 ０．７２　 １０．０３
ＢＨＴ　 ０．０１８　 ０．２５
Ｖｃ　 ０．００３８　 ０．２０
　　由表１可知，ＥＯ和不同溶剂提取物与ＢＨＴ，Ｖｃ
对ＤＰＰＨ的清除能力由强到弱依次为Ｖｃ＞ＢＨＴ＞
ＭＥ＞ＥＯ＞ＥＡ ＞ ＨＥ＞ ＤＣＭ。极性溶剂提取物
的清除ＤＰＰＨ自由基的活性最强，显示其自由基清除
活性物质主要集中在 ＭＥ和ＥＯ中。
２．２．２　ＡＢＴＳ自由基的清除作用
表１为挥发油不同溶剂萃取物对 ＡＢＴＳ·＋自由
基的清除作用，不同样品对 ＡＢＴＳ·＋自由基的清除
能力由强到弱顺序为 Ｖｃ＞ ＢＨＴ ＞ ＭＥ ＞ ＥＯ ＞
ＥＡ＞ ＤＣＭ ＞ ＨＥ。
２．２．３　还原能力测定
不同极性溶剂提取物浓度与还原能力的关系见图
１。
图１　不同极性溶剂提取物浓度与还原能力的关系
Ｆｉｇ．１Ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｏｆ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃａｐａｃｉｔｙ　ｒｅｄｕｃｉｎｇ
ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｏｌａｒ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｓ
　　由图１可知，不同溶剂萃取物的还原能力均与其
质量浓度呈正相关，即质量浓度越大，还原能力越强。
不同溶剂萃取物还原能力由强到弱依次为 ＭＥ＞ ＥＡ
＞ＥＯ＞ ＤＣＭ ＞ ＨＥ。但阿育魏实各提取物还原能
力弱于阳性对照ＢＨＴ和Ｖｃ。
２．２．４　总酚和总黄酮含量测定
阿育魏实提取物总酚和总黄酮含量见表２。
表２　阿育魏实提取物总酚和总黄酮含量
Ｔａｂｌｅ　２Ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ａｎｄ　ｐｈｅｎｏｌｉｃ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｓ
ｏｆ　Ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｍ　ａｍｍｉ　Ｌ．Ｓｐｒａｇｕｅ
μｇ／ｍｇ
萃取物 萃取物中总酚的含量 萃取物中总黄酮的含量
ＥＯ　 １２．３９　 １１．０３
ＭＥ　 １３．２０　 ３．４８
ＥＡ　 １１．８５　 ９．２６
ＤＣＭ　 １２．５７　 ６．４５
ＨＥ　 １３．０１　 ５．４５
　　文献指出酚类和黄酮类化合物具有抗氧化性
能［１６］。由表２可知，甲醇（ＭＥ）和挥发油（ＥＯ）总酚总
黄酮的含量相对较高，分别为１３．２０，３．４８，１２．３９，
１１．０３μｇ／ｍｇ。明显优于其他三种的溶剂提取物。由
上述三个抗氧化实验，可知 ＭＥ和ＥＯ的抗氧化性比
较好，这可能是由于不同溶剂极性强弱不同，所萃取活
性成分不同，其所含抗氧化物质的总量和种类也不同，
而且各物质的协同作用也不一致，从而导致了不同溶
剂的抗氧化能力不同。由此可推断在ＥＯ和不同溶剂
提取物中，酚类和黄酮类是其主要的抗氧化活性物质。
３　结论
综上所述，阿育魏实抗氧化能力显著，酚类及黄酮
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类化合物为其主要抗氧化活性物质。此外，阿育魏实
风味独特，若将其开发成为兼具药食两用功能性调味
品，当具有广阔的应用前景。
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