全 文 ：苹果皮渣中苹果多酚的提取工艺
优化及其抗脂质氧化活性研究
李 宏
（赤峰学院 医学院， 内蒙古 赤峰 024000）
苹果多酚是苹果中所有多元酚类物质的通称， 其中含
有绿原酸、儿茶素、表儿茶素、根皮苷、根皮素、槲皮素、原花
青素等活性物质,大量的研究显示苹果多酚具有多种药理功
能如抗癌、抗氧化、抗动脉硬化等功能[1，2].本试验以富士苹果
榨汁后得到的皮渣为原料,对苹果多酚的提取工艺和抗氧化
性质进行研究.
1 材料与设备
1.1实验材料
富士苹果：市售，新鲜；葵花籽油，鱼油：购自天津一方
生物科技公司；儿茶素标准品、表儿茶素标准品、绿原酸、根
皮苷、Folin-Phenol试剂：购自 Sigma公司，其他试剂均为分
析纯.
1.2仪器设备
Uvmini-1240紫外可见分光光度计（ 日本岛精） ，高效液
相labAlliance SeriesIII美国兰博.
2 试验方法
2.1标准曲线的绘制[3，4]
准确称取真空干燥至恒重的没食子酸标准品 44.3mg，
用 水 溶 解 并 定 容 至 100mL.以 此 溶 液 配 成 浓 度 为
8.86μg/mL、17.72μg/mL、35.44μg/mL、53.16μg/mL、70.88μg
/mL、88.60μg/mL的溶液.分别取上述不同浓度溶液 1mL加
到10mL比色管中， 然后依次加入1mL去离子水，0.5mL已
稀释2倍的福林—酚试液，1.5mL26.7%Na2CO3溶液，最后用
水定容至 10mL，在 50℃水浴下保持 10min，冷却，在 760nm
下测定其吸光度.由所取标准液的浓度和吸光度数据经数据
分析，回归方程为：y=0.0104x+0.0238，R2=0.9993.
2.2样品中苹果多酚含量测定
取 1mL样品液加到 10mL比色管中， 依次加入去离子
水1mL， 福林—酚试液 0.5mL，26.7%Na2CO3溶液 1.5mL，然
后用水定容至 10mL， 在 50℃水浴下保持 10min， 冷却，在
760nm下测定其吸光度.测得的吸光度代入标准曲线，求得
试样中总酚的含量.
2.3正交实验
在单因素实验的基础上， 利用四因素三水平正交试验
对影响苹果多酚提取效果的因素进行优化.
2.4提取物抗脂质氧化[5，6]
将苹果渣提取物、BHA和 VE以一定比例加入到精确
称量的葵花籽油和鱼油中，充分搅拌混匀后置于 60±1℃的
恒温培养箱中，隔时搅拌，并交换它们在恒温培养箱中的位
置，定期测定过氧化值(POV)和共轭双键氢过氧化物(CDH)
的含量，以不加抗氧化剂的油样为空白对照.
2.4.1过氧化值（ POV）的测定[5]
2.4.2共轭双键氢过氧化物(CDH)的测定[6]
定期称取一定量试样，用正己烷稀释，测定 234nm处的
吸光度.
2.5提取物的HPLC测定及单体含量
2.5.1 HPLC条件
色谱柱：Kromasil C18 5μ，250×4.6mm
流动相：A，2%冰醋酸溶于双蒸水；B，80%乙腈溶于A
柱温：室温 流量：1.0mL/min进样量：20μL 检测波
长：280nm
2.5.2标准曲线的绘制（ 外标法） ：
准确称取一定质量的标准品， 稀释定容成几个不同浓
度梯度的标准溶液，按上述色谱条件进样检测，根据所出峰
面积绘制标准曲线.
3 结果与讨论
3.1正交实验结果及分析
在单因素实验的基础上，选取乙醇浓度、料液比、提取
温度、提取时间四因素，应用四因素三水平正交试验对影响
苹果多酚提取效果的因素进行优化研究.因素水平安排如表
摘 要： 通过正交实验，对苹果渣中苹果多酚的提取工艺条件进行了优化研究，确定最佳工艺条件为：70％乙醇，料液比
1:15，提取温度 80℃，提取时间 2.5h，提取 2次，在此最优条件下，苹果多酚得率为 4.69g/kg.通过抑制鱼油和葵花子油脂质氧
化中过氧化值（ PV） 、共轭双烯值（ CDH）试验表明，苹果多酚具有很强的抗氧化能力.
关键词： 苹果多酚；提取；脂质氧化；过氧化值（ PV） ；共轭双烯值（ CDH）
中图分类号：O625.31文献标识码：A 文章编号：1673-260X（ 0 8）05B-0040-03
Vol.24 No.5
Oct.2008
第24卷 第5期
2008年10月
赤 峰 学 院 学 报（ 自 然 科 学 版 ）
JournalofChifengUniversity（ NaturalScienceEdition）
40· ·
DOI:10.13398/j.cnki.issn1673-260x.2008.10.007
图2苹果渣提取物对鱼油中POV值的抑制作用
时间 （min） A%
0-3 100
3-6 96
6-15 90
15-30 85
30-50 77
50-60 75
60-66 70
66-80 50
80-85 100
85-100 100
表1 流动相的梯度条件
2,实验安排及结果见表3，方差分析见表4.
由表 3中的实验结果可见， 热回流提取果渣中苹果多
酚的最佳工艺条件为：提取溶剂 70%乙醇，料液比 1:15，提
取温度 80℃，提取时间 2.5h.由正交实验得到的最佳条件进
行验证实验，苹果多酚得率为 4.69g/kg.由表 4中的方差分
析结果可知， 各种因素对多酚提取效果影响的主次顺序依
次为：提取温度 >料液比 >提取时间 >乙醇浓度.通过方差
分析检验可知， 提取温度对多酚得率的影响达到显著水平
（ p<0.05）
3.2提取物抗脂质氧化作用的研究
3.2.1过氧化值（ POV）的测定
油脂抗氧化剂分为天然及人工合成两大类,虽然人工合
成在价格等方面占有一定的优势， 但随着安全性问题的提
出，对天然抗氧化剂的开发、研究越来越受到人们的重视，
从天然产物中寻找抗氧化剂已成为一种趋势.本文以苹果渣
提取物为研究对象，考察其对油脂的抗氧化作用，结果如图
1、2.
VE和BHA的添加量为0.01%，而提取物的添加量分别
为 0.01%和 0.1%，这是因为 VE和 BHA是纯品，而提取物
是一个混合物.实验结果表明，添加提取物以及人工合成抗
氧化剂的样品与空白样相比，POV值明显降低（ P<0.05） 由图
可知，在葵花籽油和鱼油中，提取物的抗氧化作用高于同浓
度的 VE， 当提取物添加量为 0.1%时， 其抗氧化效果优于
0.01%BHA.
3.2.2共轭双键氢过氧化物(CDH)的测定
水平 提取时间(h)温度(℃) 乙醇浓度(％) 料液比(w/v)
1 1.5 60 60 1:8
2 2.0 70 70 1:10
3 2.5 80 80 1:15
表2 乙醇回流提取的正交实验L9(34)因素水平表
方差来源 偏差平方和 自由度 F比 F临界值 显著性
A提取时间
B提取温度
C乙醇浓度
D料液比
0.022
0.061
0.003
0.052
2
2
2
2
7.333
20.333
1.000
17.333
19.000
19.000
19.000
19.000
*
表4 回流提取苹果多酚方差分析表
水平
A.提取
时间(h)
B.温度
（℃）
C.乙醇浓
度(％)
D.料液
比(w/v)
苹果多酚
得率(g/kg)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
k1
k2
k3
极差
1.5(1)
1.5(1)
1.5(1)
2.0(2)
2.0(2)
2.0(2)
2.5(3)
2.5(3)
2.5(3)
4.213
4.267
4.333
0.120
60(1)
70(2)
80(3)
60(1)
70(2)
80(3)
60(1)
70(2)
80(3)
4.187
4.243
4.383
.196
60(1)
70(2)
80(3)
70(2)
80(3)
60(1)
80(3)
60(1)
70(2)
4.283
4.287
4.243
0.044
1:8(1)
1:10(2)
1:15(3)
1:15(3)
1:8(1)
1:10(2)
1:10(2)
1:15(3)
1:8(1)
4.170
4.290
4.353
0.183
4.04
4.22
4.38
4.28
4.11
4.41
4.24
4.40
4.36
表3 回流提取苹果多酚的正交实验方案及结果
注： 表中数据均为平均值(n=3)， 余表同.
图1 苹果渣提取物对葵花籽油中POV值的抑制作用
41· ·
根据 2.5.2的方法， 测定葵花籽油和鱼油中 CDH的含
量，结果如图3、图4所示.
由图 3、图 4可以看出，用提取物和人工合成的抗氧化
剂处理过的葵花籽油和鱼油中，CDH的形成速率明显降低
（ p<0.05） 在储藏至第 8d时，0.1%苹果渣提取物在葵花籽油
和鱼油中对CDH的抑制效果高于0.01%BHA.
3.3提取物的HPLC测定
根据 2.5的液相测定条件，对提取物进行测定，谱图如
图5所示，成分组成如表5所示.
4 结论
4.1通过实验优化， 确定热回流提取苹果渣中苹果多酚的
最优工艺条件为：70%乙醇，料液比 1:15，提取温度 80℃，提
取时间2.5h，按此工艺提取2次，苹果多酚得率为4.69g/kg.
4.2通过抑制鱼油和葵花子油脂质氧化中过氧化值（ PV） 、
共轭双烯值（ CDH）试验表明，苹果多酚具有很强的抗氧化
能力.
4.3利用高效液相色谱确定了提取物中含有1.21%儿茶素，
3.03%表儿茶素，4.48%根皮苷，20.80%绿原酸.
——————————
参考文献：
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376.
图3 苹果渣提取物对抑制葵花籽油中生成CDH的效果
图4 苹果渣提取物对抑制鱼油中生成CDH的效果
图5 提取物的HPLC图谱
g/100g总酚含量 儿茶素含量 表儿茶素含量绿原酸根皮苷
71.27 1.21 3.03 20.80 4.48
表5 提取物的成分组成
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