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蛇含委陵菜组织培养快速繁殖研究



全 文 :2012年 5月刊 商品与质量 理论研究
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蛇含委陵菜组织培养快速繁殖研究
□汤艳艳 吴 菲
(湖南农业大学园艺园林学院 湖南长沙 410128)
摘 要:以蛇含委陵菜带节茎段、茎尖、根颈为外植体进行组织培养快速繁殖研究。结果表明:茎尖作为外植体诱导表现最好,诱导率可达 100﹪,
茎段则以第三节表现最好,第二、四节次之,而根颈在增殖培养中表现最好;在诱导培养过程中,以MS+6-BA 2.0 mg/ L培养基最优;在增殖过程
中,增殖一代最佳的培养基为MS+BA 2.0mg/L+IAA 0.2mg/L,增殖率达 5.0倍;在生根培养过程中,最优的培养基为 1/2 MS+NAA0.4 mg/L,平均每
株主根数可达 7.6个。
关键词:蛇含委陵菜;组织培养;激素;培养基
1前言
蛇含委陵菜(Potentilla kleiniana)为蔷薇
科委陵菜属多年生草本。蛇含委陵菜适应性
强,养护管理简单,观赏价值高,作为药用植物
运用到园林中作地被,不仅有良好的观赏价值,
还具保健作用,可以增加人们的健康知识[1]。
由此可见,蛇含委陵菜有广泛的开发利用前景,
为加快蛇含委陵菜的繁殖与推广应用,完善蛇
含委陵菜种苗标准化繁殖技术体系,笔者以蛇
含委陵菜带节茎段、茎尖、根颈为外植体进行
组织培养快速繁殖研究。
2材料与方法
2.1材料
供试材料为湖南农业大学特色观赏植物
创新基地生长健壮的蛇含委陵菜。
2.2试验方法
将取回的材料洗净,分别采用 A1(水培)、
A2(1:100消毒液培)、A3(1:200消毒液培)和
A4(盆栽),一个星期后,取蛇含委陵菜带节茎
段、茎尖、根颈为外植体,用自来水冲洗干净,
在超净工作台上,先用 70﹪酒精浸泡 20s,再
用 0.1﹪升汞加 1~ 2滴酒精和 1~ 2滴土温
浸泡 3min(不断晃动,使其充分接触),然后用
无菌蒸馏水冲洗 5~ 6次,再用无菌滤纸将水
分吸干,在无菌条件下将外植体切成 0.8 ~
1.0cm备用[2]。
在培养温度(22±2)℃,光照强度 2000Lx,
光周期 12h/d,培养基pH值 5.8~ 6.0条件下,
进行诱导培养,增殖培养和生根培养[3]。
2.2.1诱导培养
以茎尖、茎段为外植体分别接种到 5种不
同激素组合培养基上,比较不同激素组合对不
同外植体诱导成芽的影响。5 种培养基组合
为:B1:MS ;B2:MS+6-BA 2.0 mg/ L;B3:
MS+6-BA 1.0 mg/ L+NAA 0.5 mg/ L;B4:
MS+6-BA 2.0 mg/ L+NAA 0.5 mg/ L;B5:
MS+6-BA 3.0 mg/ L+NAA 0.5 mg/ L。20
天后,统计外植体诱导芽的数量并计算诱导率;
以蛇含委陵菜茎尖、根颈为外植体接种到最优
诱导培养基:MS +6-BA2.0mg/L上,一周后统
计外植体诱导芽的数量并计算诱导率,比较不
同预处理对诱导的影响;以蛇含委陵菜匍匐茎
不同节位为外植体接种到最优诱导培养基:MS
+6-BA2.0mg/L上,一周后统计外植体诱导芽的
数量并计算诱导率,比较不同节间对外植体诱
导的影响。
2.2.2增殖培养
切取外植体诱导生成的芽接种到增殖培
养基上进行第一代增殖培养,比较四种不同激
素组合对茎尖芽增殖的影响。四种激素组合
为:C1:MS+6-BA 2.0 mg/ L+IAA 0.1 mg/
L;C2:MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L;
C3:MS+6-BA 1.0 mg/ L+IAA 0.1 mg/ L;
C4:MS+6-BA 1.0 mg/ L+IAA 0.2 mg/ L。
20天后统计第一代芽数量。
2.2.3生根培养
切取增殖培养的材料分别接种到生根培
养基上,比较五种不同的培养基对生根的影响。
五种培养基激素组合为:D1:1/2 MS;D2:1/2
MS +NAA0.2 mg/L;D3:1/2 MS +NAA0.4 mg/
L;D4:1/2 MS +NAA0.6 mg/L;D5:1/2 MS +
NAA0.8 mg/L。20天后统计生根数量。
3结果与分析
3.1激素浓度、预处理、外植体材料对外植
体诱导芽的影响
不同的外源激素浓度不同,茎尖芽诱导的
效果也不同。以茎尖为外植体,B2(MS+6-BA
2.0 mg/ L)诱导平均芽数为 1.8个, B3(MS)
平均芽数为 1.6个,效果比B1、B4、B5好,并且
以 B2(MS+6-BA 2.0 mg/ L)对茎尖芽的诱导
效果最好,平均诱导芽数达为 1.8个;对选取的
蛇含委陵菜进行不同处理之后,茎尖在诱导培
养基上表现一致, 100﹪无感染。根颈则表现
为用 1:200消毒液培处理之后感染率明显降
低;不同节间茎段的感染率存在很大差异,第
一节间和第五节间极易感染,若必须选取应加
大消毒力度。第二到四节间表现良好,感染率
低,生长也更为迅速。
不同外植体对芽的诱导率有很大影响。综
合来看:茎尖的诱导效果最好,均可达到 100
﹪;各节中,则以第三节表现最好,诱导率 80
﹪,第四节次之,为 75﹪,第二节为 60﹪,第
五节与第一节分别仅为 40 ﹪和 25 ﹪。根颈
在用 1:200消毒液培处理之后,诱导率可从 0
﹪提高到 80﹪。
3.2激素浓度对茎尖芽增殖的影响
不同激素浓度对茎尖芽增殖有明显影响。
C2与 C1、C3 、C4之间存在显著性差异,C3 、
C4两个处理间差异不明显,其中以C 2:MS+6-
BA2.0 mg/ L +IAA 0.2 mg/ L培养基增殖
情况的效果更好,增殖率可达 5.0倍。
3.3激素浓度对生根的影响
不同激素浓度对茎尖芽生根有明显影响。
D3与 D2、D4、D5之间存在极显著差异,D3:
1/2 MS+NAA0.4 mg/L诱导生根效果最好,平
均每株主根数可达 7.6个,确定为最佳生根培
养基组合。另外,从 D1能够得知,1/2 MS培养
基也可以诱导生根,但效果不明显,需要的生
长时期相对较长。
4结论
4.1外植体的选择和预处理
茎尖作为外植体表现最好,不需要预处理,
诱导率为 100%;匍匐茎则以基部以上第三节
表现最好,第四、第二节次之;根颈是优良的外
植体材料,因为在增殖过程中会生长出丛芽,
增殖率可提高到 7.8倍以上,但是要对其进行
预处理,最好接种前采用 1:200消毒液培养一
个星期,可将其诱导率从 0%提高到 80%。
4.2最优培养基
在诱导培养过程中,MS+6-BA 2.0 mg/ L
培养基最优;在增殖过程中,增殖一代最佳的
培养基为MS +BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,增
殖率达 5.0倍;在生根培养过程中,最优的培养
基为 1/2 MS+NAA0.4 mg/L,平均每株根数可
达 7.6个。
(本文指导老师:吴铁明)
参考文献:
[1]刘敏.花卉组织培养与工厂化生产.北京:
地质出版社,2006,(6)
[2]刘青林,马祎,邓玉梅.花卉组织培养.中
国农业出版社,2003
[3]李浚明,朱登云.植物组织培养教程.中国
农业大学出版社,2005,(9):345
2.学生加强对职业生涯规划的规划
工商管理专业的在校生应该关注近几年工商管理类下二级学科的
人才需求与兴趣方向,选择一个细分的专业方向,改变宽而不精的知识
结构,加强责任心、培养职业道德同时熟练的掌握office等办公软件,并
根据自身就业方向,进行合理的职业生涯规划。
3.形成理论和实践并重的专业培养方案
现代企业不仅考察对工商管理专业学生知道什么,知道多少,更加
看重工商管理专业学生会做什么会做多少。因此,工商管理专业培养
方案制定过程中,在体现本校本学科专业特色的基础上,应该合理划分
专业知识结构和职场能力结构,强化管理类基础理论和实际管理能力
的培养。在基础理论知识部分,工商管理的管理教育要使得将来的管
理者形成社会经济发展需要的基本理论基础。
4.培养学生职业素质,加强与企业合作
现代企业对工商管理专业毕业生的能力趋于多元化,学校与企业
间应加强合作,定期组织职业素养的综合评价,邀请企业家、专业人士
进入大学担任客座教授,让学生能够把理论和实践结合起来,加强工商
管理类学生对现代企业的了解,从而培养企业所需的工商管理类人才;
同时不定期的开展理想教育、道德教育、法律教育和纪律教育,通过多
方面的共同努力,不断培养专业素养高、沟通能力强、责任心强且实践
能力强的优秀毕业生。
(指导老师:赵红梅副教授天津师范大学管理学院)
参考文献:
[1]徐侠石盛林:现代企业对工商管理专业职业能力的需求调研[J].
商业现代化,2009(17)
[2]朱亚兵王丽娜:工商管理专业特色建设研究[J].技术经济与管理
研究,2012(1)
作者简介:汤南杉(1989-)男,汉族,天津人,本科生在读,研究方向:
工商管理类毕业生适应能力;陈西(1992-)女,汉族,天津人,本科生在读,
研究方向:工商管理类毕业生适应能力;张殿勋(1990-)男,汉族,天津
人,本科生在读,研究方向:工商管理类毕业生适应能力。