全 文 ： 收稿日期：2007-10-12
基金项目：宁德师专资助项目(2006Y013)
作者简介：林雄平（1979-），男，福建寿宁人，讲师，硕士，主要从事藻类学研究。

金银花和苦丁茶多糖提取物抗菌活性研究
林雄平 1，陈晓清 2，苏育才 3，陈慧斌 1
(1.宁德高等师范专科学校 生物系，福建 宁德 352100；2.漳州师范学院 生物科学与技术系，福建 漳州 363000；3.福
建师范大学 化学与材料学院，福建 福州 350007)

摘 要：从金银花和苦丁茶中提取水溶性多糖，利用圆形纸片法对 7 种常见的食品腐败菌进行抗菌试验。结
果表明：金银花和苦丁茶多糖提取物都具有一定程度的抗细菌与抗真菌活性，抗细菌活性比抗真菌活性强；
苦丁茶多糖提取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为 5mg/ml。
关键词：金银花；苦丁茶；多糖；抗菌活性；食品腐败菌
中图分类号：R289 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2008)01-0051-03

Antimicrobial Activities of Polysaccharide Extracts from Flos lonicerae and
Ilex kudingcha
LIN Xiong-ping1, CHEN Xiao-qing2, SU Yu-cai3, CHEN Hui-bin1
(1.Department of Biology, Ningde Teachers’ College, Ningde 352100, Fujian China; 2.Department of Biology Science &
Technology, Zhangzhou Normal College, Zhangzhou 363000, Fujian China; 3.Chemistry & Materials Science College, Fujian
Normal University, Fuzhou 350007, Fujian China)

Abstract: The crude polysaccharides were extracted from flos lonicerae and Ilex kudingcha by hot
water. These crude extracts were tested against seven food spoilages using the agar disc diffusion
method. The result showed that polysaccharide extracts from flos lonicerae and Ilex kudingcha have
varying amount of activities against bacteria and fungi, and the antibacterial activities are stronger
than antifungal activities. The minimum inhibition concentrations (MIC) of polysaccharide extracts
of Ilex kudingcha against Staphylococcus aureus was 5mg/ml. The results provided scientific base
for exploiting this peculiar resources.
Key words: flos lonicerae; Ilex kudingcha; polysaccharide; antimicrobial activities; food spoilage

金银花(Lonicera japonica)为忍冬科植物，其干燥花蕊为常用中药，具有清热解毒、凉散风热之功
效，主治痈肿疔疮、丹毒、喉痹、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症[1]。苦丁茶(Ilex kudingcha)为冬
青科冬青属常绿乔木，又名瓜卢、大叶茶，性凉，味甘苦，无毒，具清热解毒、清心明目、止渴生津、
健胃消食及滋养肝肾等功效[2]。近年研究发现，金银花和苦丁茶含有多种重要的生理活性物质，具有
一定的药理作用和保健功能，其水提物对多种细菌有良好的抑制作用[3,4]。本文从金银花和苦丁茶中提
取多糖成分，并对其抗食品腐败菌的活性进行初步研究，以期为把传统中药植物开发成为新型、安全、
天然的食品防腐剂提供资料。
1 材料与方法
1.1 材料
金银花、苦丁茶购自福州药材店。
受试菌包括 4 种细菌和 3 种真菌，其中细菌有枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、金黄色葡萄球菌

2008,37(1):51-53.
Subtropical Plant Science
第 37 卷 ﹒52﹒
（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coli）、普通变形杆菌（Proteas vulgaris）。真菌有啤酒
酵母（Saccharomyces carlsbergensis）、桔青霉（Penicillium citrinum）、黑曲霉（Aspergillus niger）。菌
种均来自福建师范大学生物工程学院微生物实验室。细菌用牛肉膏蛋白胨培养基培养，真菌用马铃薯
培养基培养。
1.2 方法
1.2.1 多糖提取[5] 将金银花、苦丁茶粉碎，分别称取干粉按 1﹕20 加水。在 80℃水浴中浸泡 3h，离
心，去滤渣，取上清液。浓缩后加 3 倍体积的无水乙醇，离心取沉淀物，配成 1%溶液。用 Sevag 法（氯
仿﹕正丁醇＝4﹕1）脱蛋白后，冷冻干燥得多糖粗品。
1.2.2 多糖含量测定[6] 采用苯酚-硫酸法测定：配制葡萄糖标准溶液（40µg/ml），分别吸取葡萄糖溶液
0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8ml，各以水补至 2.0ml，加入 6%苯酚 1.0ml 及浓硫酸 5.0ml，静
置 10min，摇匀，室温放置 20min 后，490nm 测光密度值；以 2.0ml 水按同样显色操作为空白，以横坐
标为糖µg 数，纵坐标为光密度值作标准曲线。吸取样品液 1.0ml，按上述步骤操作，以标准曲线计算
糖含量。
1.2.3 抗菌实验 将金银花与苦丁茶多糖提取物分别配制成 0.350g/ml、0.150g/ml 溶液，用于抗菌实验。
（1）圆形纸片法[7]：分别刮取 7 种供试菌菌苔于 5ml 无菌水中，振荡摇匀，倒入溶化并冷却至 40～
45℃的培养基中，摇匀，迅速分装于培养皿中；待凝固后，取已消毒的圆形滤纸(￠6mm)分别蘸取多糖
提取液，略干后贴于培养基平板上；同时作一溶剂空白对照。置恒温培养箱中培养（细菌 36～37℃，
18～24h；真菌 28～30℃，48～72h），观察结果，测量抑菌圈的大小。以上步骤均按无菌条件操作，每
样品设 2 个平行样，取平均值。
（2）最小抑菌浓度（MIC）测定[8]：采用圆形纸片法按上法操作，将多糖溶液稀释成 60、30、15、
7.5、5mg/ml 的浓度梯度，以未见抑菌圈的最高浓度为 MIC。
2 结果与分析
2.1 多糖提取
50g 金银花干粉水提取得到 4.85g 粗多糖，提取率 9.7%；40g 苦丁茶干粉水提取得到 0.48g 粗多糖，
提取率 1.2%。金银花粗多糖为金黄色粉末状固体，苦丁茶粗多糖为淡绿色粉末状固体，均易溶于水，
不溶于高浓度乙醇、乙酸乙酯、丙酮等有机试剂，常温放置易吸潮。
以葡萄糖为标准样品，苯酚—硫酸法求得的标准曲线回归方程为：Y = 0.0039X＋0.0028, R2 =
0.9978，测得金银花多糖含量为 19.3%，苦丁茶多糖含量为 66.7%。
2.2 多糖提取物抗食品腐败菌活性
从表 1 可见，金银花多糖提取物对供试的 7 种食品腐败菌中的 6 种有中等程度的抑制作用；苦丁
茶多糖提取物对供试的 7 种食品腐败菌均有抗菌活性，具有一定的广谱性。两者对金黄色葡萄球菌和
啤酒酵母的抑制作用最强。金银花多糖提取物对金黄色葡萄球菌和啤酒酵母的抑菌圈直径分别达
18.2mm 和 16.0mm，苦丁茶多糖提取物对这两种菌的抑菌圈直径分别达 22.5mm、24.2mm。多糖提取
物抗菌结果表明，细菌对金银花和苦丁茶多糖提取物更为敏感。
表 1 金银花、苦丁茶多糖提取物抗食品腐败菌活性
抑菌圈直径(mm)
细 菌 真 菌 多糖 来源 大肠杆菌 变形杆菌 枯草芽孢杆菌 金黄色葡萄球菌 啤酒酵母 桔青霉 黑曲霉
金银花 8.2 9.4 14.6 18.2 16.0 8.4 0
苦丁茶 18.4 17.6 8.2 22.5 24.2 7.6 7.4
2.3 多糖提取物抗食品腐败菌的最小抑菌浓度(MIC)
从表 2 可以看出，多糖提取物对食品腐败菌的最小抑菌浓度存在一定的差异，但差异不大，都在 5～
第 1 期 林雄平,等：金银花和苦丁茶多糖提取物抗菌活性研究 ﹒53﹒
30mg/ml。其中，苦丁茶多糖提取物对金黄色葡萄球菌的 MIC 最小(5mg/ml)。
表 2 金银花、苦丁茶多糖提取物抗食品腐败菌的最小抑菌浓度(MIC)
最小抑菌浓度(mg/ml)
细 菌 真 菌 多糖 来源
大肠杆菌 变形杆菌 枯草芽孢杆菌 金黄色葡萄球菌 啤酒酵母 桔青霉 黑曲霉
金银花 30 30 30 7.5 15 30 /
苦丁茶 15 30 30 5 15 30 30
3 讨 论
实验结果表明，金银花和苦丁茶粗多糖对大肠杆菌、变形杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌
均有较好的抑制作用，这与俞利平等[9]的报道一致，但具体的抑菌效果存在一些差异，如他们实验的
金银花抗枯草芽孢杆菌效果比本实验好，而苦丁茶抑金黄色葡萄球菌效果较本实验差，这可能是由于
提取工艺流程不同导致提取物的差异造成的。赵良忠等[10]也对金银花的水提物进行抑菌实验，结果表
明其水提物具有一定的抑大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉活性，而本实验中却无
抑黑曲霉活性，可能是作者在提取过程中进行了乙醇沉淀，一些活性组分被去除。据蒋建敏等[11]报道，
苦丁茶体内对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的 MIC 可达 100mg/ml，本实验测的结果却分别为 15mg/ml
和 5mg/ml，由此可见，体外抗菌的效果比体内好。在抗菌活性组分方面，屈锦年等[12]认为金银花提取
的绿原酸具有抗大肠杆菌和金黄色葡萄球菌活性。本实验中的抗菌有效成分有待进一步分离与鉴定。
防腐保鲜是食品工业中一项重要的问题，全世界每年约有 10%～20%的农副产品、果蔬等因腐烂
变质而造成巨大的资源浪费和经济损失。食品加工业采用的化学防腐剂虽然防腐效果较好，但存在致
癌性、致畸性和易引起食物中毒等问题。因此，国内外食品防腐剂的研究重点，已转向从天然产物尤
其是植物中寻找和提取广谱、高效、低毒、多功能的防腐剂。本研究表明，金银花和苦丁茶多糖提取
物对多种造成食品腐败的微生物具有较强的抑制活性，因此，有必要对其多糖有效成分的分离纯化及
药理活性进行深入研究。
参考文献：
[1] 王伟. 金银花的化学成分及药理作用研究进展[J]. 中华临床医药, 2003,4(12): 50-51.
[2] 江苏新医药. 中药大辞典[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 1997: 10.
[3] 林丹,等. 中药金银花药用成分的提取及抑菌实验的研究[J]. 天然产物研究与开发, 2003,15(5): 436-437.
[4] 刘爱华,等. 苦丁茶的研究概述[J]. 中药材, 2002,25(2): 148-150.
[5] 邵华,等. 云南溪菜多糖的分离纯化及其性质研究[J]. 武汉植物学研究, 2000,18(2): 127-130.
[6] 张惟杰. 复合多糖生化研究技术[M]. 杭州: 浙江大学出版社, 1994.
[7] Zheng Y I , et al. Screening for antibacterial and antifungal activities in some marine algae from the Fujian coast of China[J].
Oceanol Limnol., 2001,19(4): 326-331.
[8] 陈明,等. 乌蕨与黄连、黄芩、穿心莲抗菌活性的比较[J]. 右江民族医学院学报, 2001,23(4): 523-524.
[9] 俞利平,等. 金银花、苦丁茶、野菊花、决明子的抗菌性能测定[J]. 杭州医学高等专科学校学报, 2003,24(2): 77-78.
[10] 赵良忠,等. 金银花水溶性抗菌物质的提取及其抑菌效果研究[J]. 中国生物制品学杂志, 2006,19(2): 201-203.
[11] 蒋建敏,等. 苦丁茶的抗菌作用研究[J]. 中药药理与临床, 2001,17(1): 18-19.
[12] 屈锦年,等. 金银花中绿原酸一步提取法及绿原酸抗菌活性[J]. 化学世界, 2005,3: 167-169.