全 文 :张晓申 ,王慧瑜 ,李晓青 ,等.刺李组培快繁技术研究 [ J] .江苏农业科学 , 2010(6):86-87.
刺李组培快繁技术研究
张晓申 , 王慧瑜 , 李晓青 , 赵海红
(河南省郑州市农林科学研究所 ,河南郑州 450005)
摘要:以刺李的当年生嫩枝茎段为外植体进行组织快繁试验。结果表明:刺李的最佳诱导培养基为 MS+NAA
0.3 mg/L+6-BA0.7 mg/L, 增殖培养基为 MS+6 -BA1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L, 生根培养基为 1/2MS+IBA
1.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,生根率达到 96%。
关键词:刺李;组织培养;快速繁殖
中图分类号:S686.04+3 文献标志码:A 文章编号:1002-1302(2010)06-0086-01
收稿日期:2010-01-13
作者简介:张晓申(1976—),男 ,河南镇平人 ,助理研究员 , 主要从事
植物组织培养技术研究。 E-mail:abf1232@ 163.com。
刺李是蔷薇科李属 ,灌木 ,极少乔木 ,高 4 ~ 8 m;树皮深
灰褐色 ,微开展;多分枝 ,多刺;老枝粗壮 ,红褐色 ,无毛;小枝
红褐色 ,密被短柔毛;叶片长圆倒卵形或椭圆状卵形 ,稀长圆
形 ,长 2 ~ 4cm,宽 8 ~ 18mm,先端急尖或圆钝 ,基部近圆形或
宽楔形 ,边缘有细钝锯齿;核果球形 、广椭圆形或圆锥形 ,先端
急尖 ,直径 1 ~ 1.5cm,黑色 ,具浅蓝色果粉 ,果肉绿色;花期 6
月 ,果期 8月 。刺李耐寒性强 ,可与普通李和欧洲李杂交 ,改
良品质 ,又可作灌木型桃 、李的砧木或作防护林 ,可用作庭园
观赏植物和绿化树种 ,也是优良的蜜源植物 。本试验对刺李
进行组培快繁技术研究 ,为刺李提供一条新的繁殖途径 。
1 材料与方法
1.1 试验材料
2009年 5— 6月在郑州市农林科学研究所农博园园林区
内 ,选取健康生长的 4 ~ 5年生的刺李当年萌发的带芽枝条 ,
去掉大叶 ,在自来水下冲洗干净 ,剪成带单芽 2 ~ 3 cm的茎
段 ,作为外植体进行消毒 。
1.2 外植体消毒
先将外植体在稀释的洗洁精溶液中浸泡 20 min,用自来
水冲洗干净 , 然后在超净工作台上 , 先用 70%的酒精处理
30 s,无菌水冲洗 2 ~ 3次 ,再用 0.1%升汞消毒 7min,无菌水
冲洗 3 ~ 4次 ,将茎段接种于启动培养基上 。各培养基均加入
白沙糖 30 g/L、琼脂 6.5 g/L、调 pH值至 6.2。培养温度
(25±1)℃,光照 12h/d,光照强度 2 000lx。
1.3 启动培养
启动培养基以 MS为基本培养基 ,附加不同浓度的细胞
分裂素 6 -BA和生长素 NAA, 每瓶接种 1个芽 , 每处理
30瓶 ,重复 2次 ,生长 30d调查芽的诱导率 。
1.4 增殖培养
将启动培养诱导的芽 ,接种到以 MS为基本培养基 ,附加
不同浓度的 6-BA与 NAA配比的增殖培养基上 。每瓶接种
5个芽 ,每处理 10瓶 ,重复 2次 ,生长 30d,调查增殖系数和
平均株高 ,筛选最佳增殖组合 。
1.5 生根培养
无菌条件下切取丛生芽中 3 cm左右的壮苗转接至
1 /2MS生根培养基上 ,不同 IBA与 NAA浓度配比的组合下 ,
筛选最佳生根组合 。每处理 5瓶 ,每瓶 5株 ,重复 2次 ,生长
30 d,调查平均每株生根数 、平均根长和生根率 。
2 结果与分析
2.1 启动培养
将经过相同方法消毒过的刺李茎段接种到启动诱导培养
基上 ,生长 30d,调查芽诱导率 ,分析芽最佳诱导培养基 。从
表 1可以看出 ,在刺李启动培养中 ,保持生长素 NAA浓度不
变 ,不同浓度的细胞分裂素 6 -BA对芽的启动影响很大 ,随
着浓度的升高 ,成芽率不断升高 ,当 6-BA浓度为 0.7 mg/L
时 ,成芽率最高 ,随后成芽率下降 。另外 ,在启动培养中发现 ,
较高的 6-BA会引起芽生长慢 。刺李启动诱导培养的最佳
培养基为 MS+6-BA0.7 mg/L+NAA0.3 mg/L,诱导率平
均为 53.3%。
表 1 不同培养基对刺李启动培养的影响
组合号 6-BA(mg/L)
NAA
(mg/L)
成芽率
(%)
1 0.2 0.3 20.0
2 0.5 0.3 26.7
3 0.7 0.3 53.3
4 1.0 0.3 46.7
5 1.3 0.3 45.0
2.2 不同浓度 6-BA与 NAA对刺李增殖系数和生长量的
影响
在刺李的增殖过程中发现 ,随着细胞分裂素 6 -BA浓度
的增大 ,增殖系数不断增高 ,在 6-BA浓度为 1.0mg/L增殖系
数最高 ,当 6-BA浓度再增高时 ,增殖系数呈下降趋势 ,说明
刺李适宜在低浓度的细胞分裂素下增殖 。由表 2看出:MS+
6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L作为增殖培养基效果最佳 。
2.3 不同浓度 IBA与 NAA组合对刺李试管苗生根的影响
当丛生芽长到 2.5 cm左右时 ,可以接入生根培养基中 ,
在生根培养基中 10 d有根眼出现 , 30 d根可以长到 2 cm左
右 ,根数 2 ~ 4条 ,从表 3可见 , 1 /2MS+IBA1.5 mg/L+NAA
0.2mg/L培养基最适合刺李生根 ,生根率可达 96%。
(下转第 87页)
—86— 江苏农业科学 2010年第 6期
DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2010.06.124
建德锋 ,吴 南.麝香百合鳞茎离体培养技术研究 [ J] .江苏农业科学 , 2010(6):87-88.
麝香百合鳞茎离体培养技术研究
建德锋1 , 吴 南 2
(1.吉林农业科技学院 ,吉林吉林 132101;2.吉林省吉林市农业科学院 ,吉林吉林 132101)
摘要:采用鳞茎的离体培养方法快速繁殖麝香百合。在各个阶段以MS为基本培养基 , 添加不同的激素配比进行
对比。研究结果:生长素 NAA用量对形成愈伤组织有主导作用 , 添加量以 0.5 mg/L较为合适 , KT、IBA、NAA对促进
芽分化都能起作用 , KT以 0.1 mg/L为好 , IBA以 1.5mg/L为好 , NAA以 0.1 mg/L为好 ,在生根阶段 , 添加 0.3 mg/L
的 NAA较为理想。 结果表明 , 麝香百合鳞茎离体培养的方案:选用麝香百合的鳞片切块转入 J
3
:MS+6 -BA
0.1 mg/L+NAA0.5 mg/L培养基上 , 诱导出愈伤组织 , 然后将愈伤组织切块转入 Y
2
:MS+KT0.1 mg/L+IBA
1.5 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基上 ,分化出多数量的小鳞茎 ,将这些小鳞茎进一步转入 S3:MS+NAA0.3 mg/L培养
基上 ,分化出根 , 进而形成再生植株。
关键词:培养基;激素配比;麝香百合
中图分类号:S682.2+90.4+3 文献标志码:A 文章编号:1002-1302(2010)06-0087-02
(上接第 86页)
表 2 不同浓度 6-BA与 NAA组合对刺李增殖的影响
处理 6-BA(mg/L)
NAA
(mg/L)
增殖
系数
平均株高
(cm)
1 0.5 0.1 1.3 2.1
2 0.5 0.2 1.7 2.6
3 1.0 0.1 2.3 2.4
4 1.0 0.2 3.4 3.2
5 1.5 0.1 2.7 2.8
6 1.5 0.2 2.9 3.0
7 2.0 0.1 2.2 2.3
8 2.0 0.2 2.3 2.8
3 小结
本试验对刺李当年生茎段进行组培快繁技术研究 ,刺李
在 MS基本培养基附加 6-BA0.7 mg/L与 NAA0.3 mg/L配
比下 ,启动诱导率平均可达 53.3%,增殖系数平均为 3.4 ,生
表 3 不同浓度 IBA与 NAA组合对刺李试管苗生根的影响
组合号 IBA(mg/L)
NAA
(mg/L)
调查数
(株)
平均生根
数(条)
生根率
(%)
平均根长
(cm)
1 0.5 0.1 50 1.2 24.4 1.3
2 0.5 0.2 50 1.3 35.6 1.6
3 0.5 0.3 50 1.5 37.8 1.7
4 1.0 0.1 50 2.1 35.8 1.9
5 1.0 0.2 50 2.4 45.0 2.0
6 1.0 0.3 50 2.3 60.0 1.8
7 1.5 0.1 50 2.6 83.4 2.0
8 1.5 0.2 50 3.4 96.0 2.1
9 1.5 0.3 50 3.3 89.5 1.9
10 2.0 0.1 50 3.1 85.0 1.9
11 2.0 0.2 50 2.9 88.0 1.7
12 2.0 0.3 50 3.2 78.6 1.8
根培养基为 1 /2MS+IBA1.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,生根率
可以达到 96%。
麝香百合(LiliumlongiflorumThumb.),百合科、百合属 ,
多年生草本植物 ,株高 40 ~ 70 cm,无皮鳞茎扁球形 ,乳白色 ,
高 2.5 ~ 5.0 cm。叶互生 ,绿色 ,窄披针形 ,平滑 ,长 15 cm左
右 。花数朵顶生 ,具淡绿色长的花筒 ,蒴果 ,果熟期 9月 。由
于其花形如喇叭 ,花朵硕大 ,皎洁无瑕 ,香气宜人 ,端庄素雅 ,
主要作切花用 ,也用以布置花坛 、花境 、点缀庭园 [ 1] 。也可作
盆栽 ,观赏价值极高 。但麝香百合在生产上存在一定的局限
性 ,一是用种量很大 ,常规栽培需要种子 3 750 kg/hm2左右;
二是繁殖系数低 ,只能收获 15 000 kg/hm2左右;三是难以进
行有性繁殖 。采用鳞茎的离体培养方法 ,快速繁殖麝香百合 ,
具有较大的实用价值 [ 2] 。
收稿日期:2010-07-05
作者简介:建德锋(1976—),男 ,河南灵宝人 ,硕士 ,讲师 ,从事园艺植
物繁殖与栽培方面的教学与研究。 E-mail:jiandefeng@sohu.com。
1 材料与方法
1.1 材料
麝香百合鳞片取于吉林农业科技学院花卉 1号温室 。选
用 MS基本培养基 , NAA、IBA、6-BA、KT等 4种激素配比 ,加
入 3%蔗糖的固体培养基 ,用 100 mL和 500mL三角瓶培养 。
1.2 方法
1.2.1 基本培养基及添加成分 在不同阶段采用不同的培
养基配方 ,基本培养基为 MS,主要在激素上加以变化 。
1.2.1.1 愈伤组织诱导培养基采用 5个配比 。基本培养基
都采用 MS,然后添加 0.1 mg/L的 6 -BA和不同配比的
NAA,分别记作:J1:MS+6-BA0.1 mg/L+NAA0.1 mg/L;
J2:MS+6-BA0.1 mg/L+NAA0.3 mg/L;J3 :MS+6 -BA
0.1mg/L+NAA0.5 mg/L;J4 :MS+6-BA0.1 mg/L+NAA
0.7mg/L;J5 :MS+6-BA0.1 mg/L+NAA0.9mg/L。
1.2.1.2 分化培养基 采用 4个配比 。基本培养基都采用
—87—江苏农业科学 2010年第 6期