全 文 ：第 33 卷 第 5 － 6 期
2012 年 11 月
内 蒙 古 农 业 大 学 学 报
Journal of Inner Mongolia Agricultural University
Vol． 33 No． 5 － 6
Nov． 2012
金银木果中黄酮类化合物的提取及性能的研究
*
李蜀眉， 付忠实， 李 玲， 盛显良*
(内蒙古农业大学理学院，呼和浩特 010018)
摘要: 用不同浓度的乙醇提取金银木果中的黄酮类化合物，通过邻二氮菲法研究其抗氧化性能及影响因素，并与
维生素 C、维生素 E的抗氧化性能比较。结果表明，用 75%乙醇提取黄酮类化合物提取率较高，金银木果中的黄酮
类化合物有较好的抗氧化能力。
关键词: 金银木果; 黄酮类化合物; 自由基清除率
中图分类号: TS202． 3 文献标识码: A 文章编号:1009 － 3575(2012)05，06 － 0237 － 04
RESEARCH ON EXTRACTION AND ACTIVITY OF FLAVONOID
COMPOUNDS FROM LONICERA MAACKII FRUITS
LI Shu － mei， FU Zhong － shi， LI Ling， SHENG Xian － liang*
(College of Sciences，Inner Mongolia Agriculture University，Huhhot 010018，China)
Abstract: Flavonoids from Lonicera maackii were extracted with alcohol of different concentration． Antioxidation activity and influen-
cing factor of flavonoids was studied by phenanthroline method，and was compared with antioxidation activity of vitamin C and vitamin
E． The result showed that extraction rate of flavonoids extracted with 75% alcohol is higher，and flavonoids from Lonicera maackii has
the batter antioxidation activity．
Key words: Lonicera maackii; flavonoids; scavenging free radicals
在植物中找到安全、稳定的天然抗氧化物质的
研究一直在进行着。天然植物中存在许多抗氧化物
质，如黄酮类化合物、肉桂酸衍生物、香豆素、生育酚
(维生素 E)等。黄酮类化合物是天然产物中研究得
比较早和较多的一类化合物。黄酮类化合物是植物
次生代产物，广泛分布于植物中。黄酮类化合物种
类繁多，结构复杂，具有多种生物活性和药理作用。
如抗氧化、抗过敏、抗炎、抗菌、抗突变、抗肿瘤、保
肝、保护心脑血管系统和抗病毒等，且毒性较低。但
目前为止还不能从天然植物中提取大量的黄酮类化
合物。
金银木，又名金银忍冬(Lonicera maackii) ，为忍
冬科忍冬属植物。从金银忍冬果实中提取黄酮类化
合物的研究未见报道，因此，本试验以金银忍冬果实
为试材，对黄酮类化合物提取方法及其性能进行了
一些研究，为进一步开发利用金银忍冬资源提供实
验依据和参考。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
金银忍冬果:采自内蒙古农业大学校内，于 30℃
烘干，粉碎备用。
主要试剂:石油醚、乙醇、芦丁、亚硝酸钠、硝酸
* 收稿日期: 2012 － 04 － 23
基金项目: 国家自然科学基金资助项目(50962010)、内蒙古自治区自然科学基金资助项目(2009BS0804)
作者简介: 李蜀眉(1960 －) ，女，副教授，主要从事有机化学研究．
* 通讯作者: E － mail:sheng xl － 1969@ 163． com
铝、氢氧化钠，邻二氮菲、抗坏血酸、维生素 E、盐酸、
磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、双氧水、硫酸亚铁，均为分
析纯(AR)。
主要仪器设备:T6 新世纪紫外可见分光光度计
(北京普析通用仪器有限责任公司)、HH － 4 数显恒
温水浴锅(国华电器有限公司)、超声波清洗器(上海
比朗仪器有限公司，40KHz)、旋转蒸发仪。
1． 2 试验方法
1． 2． 1 提取黄酮类化合物 将处理过的金银木果
22g，用石油醚浸提 2h，过滤，用水冲洗金银木果至无
色。然后分别用 75%、85%、95%乙醇溶液于 30℃
下浸提黄酮类化合物。分两次提取，每次 12h。合并
两次滤液与金银木果，在 30℃下超声波提取 30min
后，过滤，滤液在旋转蒸发仪中浓缩至约 23mL，得粗
黄酮类化合物。
1． 2． 2 测定黄酮类化合物的含量 标准曲线的制
作 准确吸取芦丁标准乙醇溶液(0． 358mg /mL)0
mL，1 mL，2 mL，4 mL ，6 mL ，8 mL，10 mL，12
mL 放入 8 只 50 mL容量瓶中，用 30%乙醇溶液补至
25 mL ，然后加 1． 4 mLNaNO2溶剂(1:20) ，摇匀，放
置 5min，加入 1． 4 mL Al(NO3)3 溶液(1:10) ，摇匀，
放置 6min，再加入 10 mL NaOH(1mol /L) ，用 30%
乙醇定容，10min 后，在波长 400 － 540nm nm 范围
内，绘制吸收曲线，测得最大吸收峰为 510nm。
在波长 510nm 处测吸光度，得到吸光度(Y)与
浓度(X)的线性回归方程:
Y = 0． 0075X － 0． 0005
相关系数 r = 0． 998
黄酮类化合物的含量 准确吸取黄酮类化合物
浓缩液 2． 0mL，用 30%乙醇定容至于 10mL 容量瓶
中，取该溶液 2mL于 50mL容量瓶中，与芦丁标准溶
液同法显色、定容，在 510nm处测定吸光度。计算黄
酮类化合物的百分含量。
总黄酮含量(%)=(提取液中总黄酮质量 /干物
料质量)× 100%
1． 2． 3 黄酮类化合物的光谱特性 取浓缩液 4mL
用 30%乙醇定容至 10mL，在波长 410nm ～ 550nm范
围内测定吸光度，测其最大吸收波长。
1． 3 黄酮类化合物的抗氧化性能
用邻二氮菲 － Fe2 +氧化法测定金银木果中黄酮
类化合物的抗氧化性能。原理:Fe2 +与邻二氮菲生
成红色配合物，此红色配合物在 536nm 处有最大吸
光度值。若红色配合物被氧化，则吸光度值将变小
甚至消失，以吸光度值(A536)的变化反映羟自由基
的氧化作用。在该体系中加入双氧水(H2O2) ，产生
的羟自由基将氧化邻二氮菲 － Fe2 +为邻二氮菲 －
Fe3 +。使红色减退，吸光度值(A)将减小。若在反
应体系中同时加入 H2O2 和抗氧化物质，将抑制红色
的减退，从而可以测定抗氧化物质对羟自由基的清
除能力。自由基的清除率用计算如下:
清除率(%)=［A(样)－ A(损) ］/［A(未)－ A
(损) ］× 100%
1． 3． 1 pH值对黄酮类化合物抗氧化性能的影响
取一定浓度的黄酮类化合物提取液 7 份，分别用0． 1
mol /L盐酸和 0． 1mol /L 氢氧化钠溶液调节 pH 值为
3 ～ 9。然后取 2 mL 5mmol /L 邻二氮菲无水乙醇溶
液于 25mL 的锥形瓶中，然后依次加入 4mLpH = 7．
40 的 0． 2 mol /L磷酸缓冲溶液和 2mL 样液的溶剂，
充分混匀后，加入 2mL 5mmol /L 硫酸亚铁溶液(Fe-
SO4) ，混匀后加入 2 mL 0． 1%双氧水，于 37℃水浴
60 min后，在 536nm处测其吸光值，即损伤管的吸光
值 A(损)。未损伤管以 2mL 蒸馏水代替损伤管中
2mLO． 1%的双氧水，样品管以 2mL样品溶液代替损
伤管中的 2mL样液的溶剂，其它同损伤管，测得未损
伤管的吸光值 A(未)及样品管的吸光值 A(样) ，计
算清除率。
1． 3． 2 温度对黄酮类化合物抗氧化性能的影响
分别取 3mL一定浓度的黄酮类化合物提取液(2． 25
mg /mL) ，在不同温度中水浴加热 2h，取出冷却至室
温后，分别按上述方法进行实验，测定 536nm 处的
吸光度，比较不同温度时黄酮类化合物对羟基自由
基的清除能力。
1． 3． 3 黄酮类化合物抗氧化能力的比较 用配制
相同浓度的维生素 C、维生素 E 和黄酮类化合物溶
液，分别按照上述方法进行实验，测定 536nm处吸光
度，计算清除率，比较 3 种物质对羟基自由基的清除
能力。
2 结果与分析
3． 1 黄酮类化合物的含量及光谱特性
由图 1 看出，用浓度为 75%、85%、95%乙醇浸
提金银木果中的黄酮类化合物，然后超声波处理，
75%乙醇的提取率最高。在可见光范围内，金银木
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果中黄酮类化合物的最的吸收波长 λmax = 520 nm，
见图 2。
2． 2 pH值对黄酮类化合物抗氧化性能的影响
由图 3 看出，pH = 3 ～ 9 范围内，pH = 4 时，自由
基清除率为 91%，抗氧化性能最好。pH = 3，清除率
为 73%，pH = 5 ～ 9 时，清除率在 75%到 65%之间，
黄酮类化合物的抗氧化性能随着 pH值得升高，有所
下降。除 pH = 4 外，在试验的酸碱范围内黄酮类化
合物的抗氧化性能变化不大，且黄酮类化合物较稳
定。
2． 3 加热对黄酮类化合物的影响
由图 4 可见，黄酮类化合物清除自由基的能力
随温度的升高而增强，温度达到 50℃时，清除率为
83%，抗氧化能力最强，温度继续升高，清除率下降，
说明温度为 50℃时，抗氧化能力最好。
图 1 不同溶剂提取黄酮类化合物的含量
Fig． 1 The of content flavonoid from Lonicera
maackii fruits extracted with different solvent
图 2 黄酮类化合物的吸收光谱
Fig． 2 Absorption spectrum of flavonoid
from Lonicera maackii fruits
图 3 pH 值对清除率的影响
Fig． 3 Effect of pH value on the
ability in scavenging free radicals．
图 4 温度对清除率的影响
Fig． 4 Effect of temperature on the
ability in scavenging free radicals
2． 4 黄酮类化合物抗氧化能力的比较
由图 5 看出，在相同的试验条件和浓度下，金银
木果中的黄酮类化合物与维生素 C 和维生素 E 比
较，其清除自由基的能力大于维生素 C，小于维生素
E。说明金银木果中的黄酮类化合物有较好的抗氧
化能力，
图 5 不同抗氧化物质清除自由基的能力
Fig． 5 scavenging free radicals
activity of different antioxidation matter
932第 5 － 6 期 李蜀眉等: 金银木果中黄酮类化合物的提取及性能的研究
3 结论
用 75%、85%、95%乙醇做浸提剂，提取金银木
果中的黄酮类化合物，其中提取率最高的溶剂是
75%乙醇。该黄酮类化合物在 pH = 4 时，抗氧化性
能最好，自由基清除率为 91%。pH = 5 ～ 9 时，抗氧
化性能有所下降，清除率为 75% ～ 65%。测定不同
温度下黄酮类化合物的抗氧化能力，结果表明，温度
为 50℃时，抗氧化能力最好。低于或高于 50℃，抗
氧化能力有所下降。与维生素 C、维生素 E 比较，黄
酮类化合物的抗氧化性能明显优于维生素 C，比维
生素 E差。
参 考 文 献:
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进展［J］．西北植物学报，2003，23(12):2241 － 2247．
［2］ 周 冉，李淑芬，张大成．鹿茸提取物体外抗氧化活性分
析［J］．食品科学，2009，30(09):33 － 36．
［3］ 王立娟． 桔皮总黄酮的提取条件［J］． 东北林业大学学
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［4］ 李蜀眉，付忠实，兰海龙． 黄酮类化合物抗氧化物性能
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