全 文 ：药物分析杂志 hC ni J Ph ~ nA la 2 00 5
,
25 ( 12 ) 一 145 1 一
H PL C 法测定忍冬藤中当药普和马钱普的含量
陈军 ’ ,2 , 马双成 ’
( 1
. 浙江大学药学院 杭州 31 田 31 ;2 . 浙江省宁波市药品检验所 宁波 31 5〔冲 ) ; 3 . 中国药品生物制品检定所 北京 1X( X) 5()
摘要 目的 : 建立忍冬藤中当药昔 、马钱昔的高效液相色谱测定方法 。 方法 :采用 C : : 色谱柱 (5 协m , 4 . 6 ~ x 2 50 m m , 流动相
为乙腊 一水 (巧 : 85 ) ,检测波长为 24 0 n m , 流速 0 . 5 m L · im n 一 ’ 。 结果 : 当药普和马钱普的线性范围分别为 。 一 8 . 1 林g 和 0 -
10
.
4 此 , 相关系数均为 0 . 999 ;平均加样回收率分别为 9 . 7 % 和 98 . 8% , RS D 分别为 1 . 2 % 和 2 . 0 % ( n = 6 ) 。 结论 :本法简
便、准确 ,可作为忍冬藤药材的质量控制方法 。
关键词 : 忍冬藤 ;当药昔 ; 马钱昔 ;高效液相色谱法
H P L C D e t e r m i n a t i o n o f S w e r o s i d e a n d L o g a in n in C a ul i s L o in c e r a e
e H E N Ju n ’
, ’ ,
M A s h u a n g 一 e h e n g 3
( 1
.
C o l e罗 Of Phamr
a e e u t i e al S e i e n e e s
,
Z h ej i a n g Un i v e rs i t y
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Han 邵 h o u 3 l 0() 3 l , Ch in a ; 2
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3
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N a r jon 习 In s r s: u r e for Con 园 讨 hP an a e e u 石e al a n d B jol 卿 e al
N i n gh
o I n s t i t u t e fo r Dur g C o n tr o l
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Ab s t r ac t O bj
e c it v e : T o e s t a b li s h a n H P LC m e ht o d fo r t h e d e t e rm i
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肠 n i e e r a e . M e t h o d : O D S C 18 ( 5 卜m , 2 5 0 m m x 4 . 6 m m ) ; T h e m o b i l e p h a s e w a s e o n s i s t e d o f a e e t o n it ir l e 一 w a te r
( 15 : 5 5 ) ; 山e w a v e le n gt h 。 f d e t e e t o : w a s 2 4 0 n m ; A t a fl o w art e 。 f o
.
s m L
·
m i n
一 ’ .
R e s ul st : hT
e e a lib r a ti o n C u vr e s
s h o w e d g o o d l i n e a ir t y i n t h e r a n g e Of O 一 8
.
1 林g ( s w e or s id e ) , 0 一 10
.
4 林g ( lo g a n i n )
.
hT
e a v e ar g e r e e o v e ir e s w e er
9 9
.
7% a n d 9 8
.
8%
,
R SD w e r e 1
.
2% a n d 2
.
0% (
n = 6 )
.
C o n c lus i o n
:
hT i
s m e t h o d 15 s i m p le a n d a e e u r a t e
, a n d e a n
b e u s e d fo r e o n t r o l o f C a u l i s 助 in e e r a e .
K e y w o r ds
: C a u li s oL
n i e e r a e
, s w e r o s id e
,
lo g a n i n
,
H P LC
忍 冬藤为 忍 冬科植 物 忍冬 肠 n ice ar ajP on ica
Th u n b
. 的干燥茎枝 , 为常用中药 ,收载于中国药典一
部川 ,具有清热解毒 、 疏 风通络功能 。 临床用 于治
疗传染性肝炎等症 。 研究表明忍冬藤中的环烯醚枯
昔成分均有 明显 的生理活性 , 当药昔具有保肝作
用 t Z〕 ,马钱昔有抗炎作用及调节免疫功能 〔’ 〕。 为更
好地评价药材的内在质量 , 本文建立 了测定环烯醚
菇昔含量的高效液相色谱法 , 并对不同产地样品中
的当药昔和马钱昔进行含量测定 ,取得较好的结果 。
1 仪器与材料
H P I 10 0 高效液相 色谱仪 ( 美 国 ) ; G 1 3 15 A 型
DA D 二极管阵列检测器 (德国 ) 。
甲醇 、 乙睛为色谱纯 ,水为双重蒸馏水 。
对照品当药昔 ( s w e or s id e )和马钱昔 ( l o ga n i n )由
本实验室提取分离 , H P LC 归一法确定其纯度分别
为 9 9 . 5% 和 9 9 . 2% ,并经各种理化常数和波谱数据
进行了结构鉴定 。
不同产地的忍冬藤药材购 于北京 同仁堂药店
(河南密县产 ) 、 宁波市药材股份有限公司 ( 山东平
邑产 ) 、宁波郸州医药药材股份有限公司 (山东临沂
产 ) , 经中国药品生 物制品检定所中药标本馆张继
副主任药师鉴定均为忍冬 肠 n ice ar ajP on ic o hT u汕
.
的干燥茎枝 。
2 溶液制备
2
.
1 供试品溶液 取本品粉末 (过 3 号筛 ) 1 . 5 9 ,
精密称定 ,精密加人 50 % 甲醇 25 m L ,称重 , 超声处
理 30 m in ,放冷后 ,再称重 ,用 50 % 甲醇补足减失重
量 , 摇匀后过 0 . 45 林m 微孔滤膜 , 滤液作为供试品
溶液 。
2
.
2 对照品溶液 分别精密称取对照品当药昔和马
钱昔适量 ,加 50 % 甲醇制成每 1 m L 分别均含 0 . 《 拓6
m g 和 .0 52 19 mg 的混合溶液 ,作为对照品溶液 。
3 色谱条件
yH p
e sr i l O D S 柱 ( 5 协m , 4 . 6 m m x 2 5 0 m m ) ;流
动相 : 乙睛 一 水 (巧 : 85 ) ;流速 : 0 . 5 m L . m in 一 ` ;检测
波长 : 24 0 n m ;柱温 : 室温 ;理论塔板数按马钱昔峰计
一 14 52 一 药物分析杂志 C腼 J hP~ A n a] 2( 刃 5 , 25 ( 12)
算不低于 30 0 。 在此条件下 ,马钱昔和当药昔与其
他组分均能达到良好分离 (分离度均大于 2 . 0 ) 。 此
条件下的色谱结果如图 1 。
品溶液和对照品溶液各 10 林L 注人液相色谱仪 , 在
上述色谱条件下进行测定 ,结果见表 1 。
表 1 不同产地忍冬藤样品含 t 测定结果 (% , n = 4)
T a b 1 Q u皿廿at 伽 e 仙 alI y幼5 esr ul st of sam P】胎
样品产地 ( aer a) 当药昔 ( , ~ ide) 马钱普 l( o g an l n )
河南密县 ( M苗 an , H~ )
0
.
31 0
.
2
山东平邑 (巧 n幼 , S h朋 d o n g ) .0 25 0 , 叨
山东临沂 ( U 咖 , hs an d o gn ) 0 . 31 0 . 37
2 0 t / m i n
图 1 对照品 ( )A 及河南密县产样品 ( B) 的 H r LC 色谱图
iF g 1 HPLC
e知闰 m at o多卫m s Of e h e面 e d 祀 fe re n e e s曲日往口 c e s ( A ) 朋 d
胡m p l. 五习m H e n an M加。 ( B )
1
. 当药昔 (
~
d e) 2
. 马钱昔 ( lo g an l n )
4 方法学考察
4
.
1 线性关系的考察 精密吸取 “ 2 . 2 ” 项下对照
品溶液 0 , 2 , 4 , 6 , 8 , 10 , 20 林L 注人液相色谱仪 , 以峰
面积积分值 Y 为纵坐标 ,以对照品进样量 X ( 林g )为
横坐标作图及回归处理 ,得当药昔和马钱昔回归方
程分别为 :
Y = 3
.
76()
x 10 3 X + 8 1
.
7 5 r 二 0
.
9 9 9 9
Y = 1
.
8 5 7 x 10 3X + 17
.
7 5 r 二 0
.
9 9 9 9
上述结果表明 : 当药昔在 0 一 8 . 1 林g , 马钱昔在 O -
10
·
4 卜g 范围呈良好线性关系 。
4
.
2 仪器精密度试验 分别吸取 “ 2 . 2 ” 项下对照
品溶液 10 林L 连续进样 5 次 , 测定峰面积 。 当药昔
和马钱昔峰面积的 R SD 分别为 0 . 5% , 0 . 4 % 。
4
.
3 重复性试验 按供试品溶液制备方法处理同
一批号样品 6 份 ,测得当药昔和马钱普的平均含量
分别为 0 . 25 % , 0 . 4D % ; SR D 分别为 1 . 6% , 1 . 9 % 。
4
.
4 加样 回收率实验 取已测知含量 ( 当药昔
0
.
3 1%
,马钱昔 0 . 2 % )的河南密县产样品粉末 (过
3 号筛 ) 0 . 75 9 , 精密称定 , 精密加人混合对照品溶
液 ( 当药昔浓度为 0 . 094 m g · m L 一 ’ 、 马钱昔浓度为
0
.
07 0 m g
·
m L
一 ’
) 25 m L
, 依法测定 , 测得回收率平
均值分别为 9 . 7 % 和 98 . 8 % , SR D 分别为 1 . 2 %
和 2 . 0 % 。
5 样品测定
分别精密吸取按 “ 2 ” 项下制备的不同产地供试
6 小结与讨论
6
.
1 根据马钱昔和当药昔的 UV 吸收图谱 ,当药昔
的巧% 乙睛溶液最大紫外吸收波长为 245 n m ,马钱
昔 巧% 乙睛溶液最大紫外吸收波长为 238 ln ,综合
考虑测定波长选择在 240 n m 。
6
.
2 曾选用甲醇 一 水 ( 3 0 : 7 0 )[ 4 J作为流动相 , 当药
昔和马钱昔色谱峰峰形及两者的分离度不如乙睛 -
水 ,故本文选用乙睛 一水 (巧 : 85 )作为流动相 。
6
.
3 曾进行提取方法考察 , 分别用不同浓度的甲
醇 、 乙醇以超声法 、 冷浸法和 回流法提取 。 结果表
明 : 3 种方法制备供试品溶液所得液相色谱图和组
分基本一致 , 3 种方法所得供试品溶液中当药普 、 马
钱昔含量的顺序为 : 超声法 > 冷浸法 > 回流法 ;甲醇
提取效果优于乙醇 ,且随着醇浓度的减少提取率反
而提高 , 50 % 甲醇 > 70 % 甲醇 > 85 % 甲醇 > 甲醇 ,但
当醇浓度较低时杂质也增加 。 因此 ,本文采用 50 %
甲醇超声提取 30 而 n 。
6
.
4 不同产地的样品 , 2种成分的含量相差较大 ,说明
药材品质变化较大 ,用 HP LC 法测定此 2 种环烯醚菇昔
类成分对忍冬藤药材的质量评价具有重要意义 。
参考文献
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(本文于 2 0 5年 3 月 2 日收到 )