全 文 ：等作用［7］，根据药典［8］，其主要检测成分为特女贞
苷，且专属性强，故选择特女贞苷作为复方七叶灵颗
粒含量测定物质。
3． 2 由于七叶灵颗粒由 10 味药材组成，成分复杂，
为能准确检测特女贞苷，参考了药典［8］及多篇文
献［9 ～ 11］，甲醇-水作为展开剂虽然简单，但出峰不尖
锐，为避开杂质峰，通过调整流动相，出峰延迟后出
现分离效率降低，特女贞苷峰理论塔板数低。通过
不断探索和调整，使用乙腈-水为展开剂，特女贞苷
峰尖锐，通过调整配比，乙腈-水在 16∶ 84 时可避开
前后杂质干扰，且出峰尖锐，分离度好，特女贞苷峰
理论塔板数高;通过调节水相 pH，特女贞苷峰不受
影响。由于前后均有杂质峰，因此梯度洗脱受到限
制，未采用梯度洗脱方法。通过空白对照试验和借
助 LC-MS鉴别得出该峰为特女贞苷峰。
3． 3 七叶灵颗粒制作工艺采用的是水提工艺，因此
为避免损失，参考了《中国药典》［8］及文献方法［10］，
主要有稀乙醇回流法与超声提取法，本试验采用将
颗粒剂用稀乙醇回流方法提取，以向药典方法靠拢。
有报道对各种浓度的乙醇进行了比较试验，最终确
定使用 50%乙醇提取效果较好［11］，因此本试验采
用 50%乙醇进行回流试验。本试验还比较了不同
时间回流对结果的影响，回流 1 h、回流 2 h、回流 4 h
结果无差异，这可能与颗粒剂原本就是水提物质与
糊精，回流 1 h足以将特女贞苷溶于溶媒内，因此选
择使用 50%乙醇回流 1 h 提取方法，该方法操作简
单，结果稳定。
参 考 文 献
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10 王卫清，黄海，洪松彬． 高效液相色谱法测定女贞子中特女贞苷
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11 胡魁伟．女贞子炮制工艺及质量标准的研究［D］． 北京:中国中
医科学院中药研究所硕士学位论文，2006
(2012-04-27 收稿 2012-06-01 修回)
通讯作者:高振强 Tel:(0311)87019941 E-mail:gzq2728@ yahoo． com． cn
HPLC测定当药中当药苷的含量
段吉平1 牛小莲1 袁浩1 高振强2 (1．河北省食品药品检验院 石家庄 050011;2． 河北医科大学第三医院 )
摘 要 目的:建立当药中当药苷的高效液相色谱含量测定方法。方法:采用外标法，DIONEX Acclaim 120 C18(250 mm ×
4． 6 mm，5 μm)色谱柱，以甲醇-水 (20∶ 80)为流动相，检测波长为 247 nm，体积流速为1． 0 ml·min －1。结果:当药苷的线性范
围为0． 030 ～ 4． 503 μg(r = 0． 999 8) ，平均回收率为99． 8%，RSD为1． 2%(n = 9)。结论:本方法简便、准确、灵敏，可作为当药
中当药苷的定量分析方法。
关键词 当药;当药苷;高效液相色谱法
中图分类号:R927． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2012)09-1274-03
Determination of Chiratin in Swertiae Herba by HPLC
Duan Jiping1，Niu Xiaolian1，Yuan Hao1，Gao Zhenqiang2(Hebei Institute for Food and Drug Control，Shijiazhuang 050011，China 2．
The Third Hospital of Hebei Medical University)
ABSTRACT Objective:To establish an HPLC method for the determination of chiratin in Swertiae Herba． Method:An external
method with a DIONEX Acclaim 120 C18(250 mm ×4． 6 mm，5 μm)column and methanol-water solution(20∶ 80)as the mobile phase
was adopted． The detection wavelength was 247nm and the flow rate was 1． 0 ml·min －1 ． Result:The linear range was within 0． 030-
4． 503 μg(r = 0． 999 8) ，the average recovery of chiratin was 99． 8% and RSD was 1． 2%(n = 9)． Conclusion:The method is sim-
ple，accurate and sensitive． It is suitable for the quantitative analysis of chiratin in Swertiae Herba．
KEY WORDS Swertiae Herba;Chiratin;HPLC
当药，又名紫花当药，为龙胆科植物瘤毛獐牙菜 (Swertia pseudochinensis Hara)的干燥全草，为河北、
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内蒙古一带的民间草药。历代本草中未见收载，在
《内蒙古中草药》［1］中有收载，生长于海拔 500 ～ 1
600 m 的山坡、林下或灌丛中，其有效成分为当药
苷［2］。当药具有清湿热、健胃的功能，用于湿热黄
疸、胁痛、痢疾腹痛、食欲不振，中医临床用于肝胆病
的治疗，中药生产企业主要用于当药片和当飞利肝
宁胶囊的生产，本文采用高效液相色谱法，对当药苷
的含量测定方法进行了研究，为更好地控制当药的
质量提供方法依据。
1 仪器与试药
电子天平(Mettler AE 163，Mettler AE 240 ，瑞
士) ;紫外-可见分光度计(SHIMADZU UV-2450，日
本) ;高效液相色谱仪(DIONEX UltiMate 3000 ，美
国)。当药苷对照品(含量测定用，批号:111742-
200501，购自中国药品生物制品检定所) ;甲醇(色
谱纯) ;水(去离子水) ;当药药材收集于安国药市，
河北医科大学中医学院教授郑玉光鉴定为龙胆科植
物瘤毛獐牙菜(Swertia pseudochinensis Hara)的干燥
全草，编号与产地为 1 号(产地:河北)、2 号(产地:
河北)、3 号(产地:河北 )、4 号(产地:内蒙)、5 号
(产地:内蒙)、6 号(产地:内蒙)。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件
色谱柱:DIONEX Acclaim 120 C18(250 mm ×
4． 6 mm，5 μm) ;流动相:甲醇-水(20∶ 80) ;流速:1． 0
ml·min －1;检测波长为 247 nm柱温:25℃;进样量:
10 μl。
2． 2 对照品溶液的制备
取当药苷对照品0． 015 01 g，置 50 ml 量瓶中，
加甲醇适量使溶解，用甲醇稀释至刻度，摇匀，得对
照品浓溶液。精密量取对照品浓溶液5． 00 ml，置 50
ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
2． 3 供试品溶液的制备
取当药药材粉碎过三号筛，混匀，称取粉末 2 g，
精密称定，置 100 ml 具塞锥形瓶中，精密加入甲醇
50 ml，密塞，称定重量，超声处理(250 W，40 kHz)
20 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，
摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2． 4 线性关系考察
精密量取当药苷对照品浓溶液(浓度为:
0． 300 2 mg·ml －1)5 ml，置 100 ml 量瓶中，用甲醇
稀释至刻度，摇匀，得当药苷对照品稀溶液。取对照
品稀溶液 2，10 μl 和当药苷对照品浓溶液 10，15
μl，分别注入液相色谱仪，按拟定的色谱条件测定，
以峰面积积分值为纵坐标，当药苷对照品进样量为
横坐标绘制标准曲线，计算得回归方程:Y = 1． 84 ×
106X + 8． 71 × 103，r = 0． 999 8。结果表明当药苷在
0． 030 ～ 4． 503 μg范围内与吸收度积分值呈良好的
线性关系。
2． 5 精密度试验
精密吸取供试品溶液 10 μl，连续进样 5 次，测
定当药苷峰面积，计算 RSD 为0． 88%(n = 5) ，表明
仪器精密度良好。
2． 6 稳定性试验
取当药苷对照品溶液 10 μl，注入液相色谱仪
11 次，前 6 次间隔1． 5 h，后 5 次间隔 3 h，取供试品
溶液 10 μl，注入液相色谱仪 9 次，前 5 次间隔
1． 5 h，后 4 次间隔 5 h，记录当药苷峰面积积分值，
计算 RSD，结果对照品溶液为0． 80%，供试品溶液为
0． 71%，表明对照品及样品溶液在 24 h 内稳定性良
好。
2． 7 重复性试验
取同一批样品(批号:1 号)粉末1． 6，2． 0，2． 4 g
各 3 份，精密称定，按“2． 3”项下的方法操作，制成
供试品溶液，按上述检测方法测定，样品的平均含量
为0． 797 9 mg·g －1，RSD为1． 1%(n = 9)。
2． 8 加样回收率试验
取供试品(批号:1 号)粉碎后过三号筛，混匀，
称取粉末 9 份，每份约 1 g，每 3 份为一组，分别用浓
度为0． 010 01，0． 015 96，0． 022 54 mg·ml －1当药苷
对照品甲醇溶液代替甲醇，按“2． 3”项下的方法操
作，制成供试品溶液，按上述检测方法测定，根据测
得量和加入量计算回收率。结果当药苷的平均回收
率为99． 8%(RSD = 1． 2%)。
2． 9 样品测定
取 5 批当药按前述“2． 3”项下的方法操作，制
成供试品溶液，按上述检测方法测定，计算样品的含
量，结果见表 1。对照品及供试品色谱图见图 1。
表 1 6 批样品的当药苷含量测定结果(n =3)
编号 当药苷含量(%) 编号 当药苷含量(%)
1 0． 08 4 0． 10
2 0． 16 5 0． 08
3 0． 07 6 0． 11
3 讨论
本试验还采用三个厂家的色谱柱，色谱柱型号
分别 为 岛 津 SHIMADZU VP-ODS (150 mm ×
6． 0 mm，5 μm)、菲罗门 phenomenex C18(250 mm ×
4． 6 mm，5 μm)、资生堂 CAPCELL PAK C18(MGⅡ，
250 mm ×4． 6 mm，5 μm) ，考察对分离及测定的影
响，结果 3 种 C18色谱柱柱效、分离度均符合要求，并
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中国药师 2012 年第 15 卷第 9 期 China Pharmacist 2012，Vol． 15 No． 9
A．对照品 B．供试品 1．当药苷
图 1 当药苷 HPLC色谱图
且含量无明显的区别，故认为本法对 C18色谱柱品牌
无特定要求。
当药苷具有保护肝脏的作用［2］，为当药的有效
成分，用 HPLC法测定当药中当药苷尚未见报道，本
研究建立的 HPLC检测方法精密度、重复性好，杂质
干扰少，当药苷的峰纯度、峰型、分离度均比较理
想，样品稳定性和回收率均较高，是一种较为理想的
测定方法。
参 考 文 献
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2 胡若琪，饶娴宜，刘汉军，等． 獐牙菜甙对实验大鼠肝病理形态学
的影响［J］．云南中医学院学报，1991，14(1) :35-37
(2012-04-07 收稿 2012-06-04 修回)
通讯作者:马卫成 Tel:(0574)83038815 E-mail:weichengma@ 126． com
反相高效液相色谱法检测人血浆特比萘芬浓度
何文跃 徐爱仁 陈武 马卫成 (宁波市鄞州第二医院 浙江宁波 315100)
摘 要 目的:建立人血浆特比萘芬检测的高效液相色谱方法。方法:以 ZORBAX Eclipse XDB-C18为色谱柱;流动相为乙腈-
0． 2%三氟乙酸-水体系，流速为 0． 8 ml·min －1;检测波长 258 nm(0 ～ 5． 2 min)和 283 nm(5． 2 ～ 7． 0 min)。以伏立康唑为内
标，血浆在酸性条件下经乙酸乙酯萃取后检测。结果:特比萘芬浓度在0． 05 ～ 4． 00 mg·L －1范围内线性关系良好(r =
0． 999 7) ;高中低三个浓度(0． 10、1． 00、3． 00 mg·L －1)的日内精密度 RSD 分别为3． 12%、2． 85%和2． 63%，日间精密度 RSD
分别为4． 18%、3． 29%和2． 81%;相对回收率分别为(101． 47 ± 4． 53)%、(99． 50 ± 3． 63)%和(100． 71 ± 3． 33)%，RSD 分别为
2． 60%、2． 41%和1． 62%。健康志愿者单剂量口服 250 mg 盐酸特比萘芬后，Cmax为(1． 27 ± 0． 15)mg·L
－1，Tmax为(1． 56 ±
0． 32)h，t1 /2α为(0． 96 ± 0． 24)h，t1 /2β为(16． 73 ± 1． 87)h，AUC(0-48)为(13． 44 ± 1． 95)mg·h·L
－1，AUC(0-∞)为(15． 32 ± 2． 16)mg
·h·L －1。结论:该方法简便、快速、准确可靠，适用于人血浆特比萘芬浓度的测定及其药代动力学研究。
关键词 特比萘芬;药代动力学;高效液相色谱法
中图分类号:R969． 1 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2012)09-1276-03
Determination of Terbinafine in Human Plasma by RP-HPLC
HE Wenyue，XU Airen，Chen Wu，MA Weicheng (Ningbo Yinzhou No． 2 Hospital，Zhejiang Ningbo 315100，China )
ABSTRACT Objective:To develop a HPLC method for the determination of terbinafine in human plasma． Method:The analytical
column was packed with ZORBAX Eclipse XDB-C18 ． The mobile phase was acetonitrile-0． 2% trifluoroacetic acid-water and the flow
rate was 0． 8 mL·min －1 ． The UV detection wave-length was 258 nm (0-5． 2 min)and 283 nm (5． 2-7． 0 min)respectively． The ter-
binafine was extracted by ethyl acetate from plasma． Result:Excellent liner relationship was obtained from the range of 0． 05 mg·L －1
to 4． 00 mg·L －1(r = 0． 999 7)． The intra-day RSD were 3． 51%、2． 44% and 2． 75% and inter-day RSD were 3． 87%、2． 38% and
2． 63% respectively at three concentrations，the relative recoveries were(99． 33 ± 2． 58)%，(99． 50 ± 2． 40)% and (100． 95 ±
1． 63)%，The RSD were 2． 60%、2． 41% and 1． 62% respectively． After a single dose of 250 mg，the pharmacokinetics parameters of
terbinafine were as follows:Cmax(1． 27 ± 0． 15)mg·L
－1，Tmax(1． 56 ± 0． 32)h，t1 /2α(0． 96 ± 0． 24)h，t1 /2β(16． 73 ± 1． 87)h，
AUC(0 － 48)(13． 44 ± 1． 95)mg·h·L
－1，AUC(0 － ∞)(15． 32 ± 2． 16)mg·h·L
－1 respectively． Conclusion:The method was sim-
ple，rapid，accurately and could be used to determine the terbinafine concentration in human plasma and study of its pharmacokinetics．
KEY WORDS terbinafine;pharmacokinetics;HPLC
盐酸特比萘芬(terbinafine hydrochloride)是一 种既可口服又可外用的丙烯胺类抗真菌药，其主要
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