全 文 ：收稿日期: 2004-07-29;　修订日期: 2004-11-02
作者简介:高保栓 ( 1962-) ,男 (汉族 ) ,河北晋州人 ,现任河北省药物研究
所高级工程师 ,学士学位 ,主要从事中药研究工作 .
正交实验优选长松萝醇提工艺研究
高保栓 , 秦　青 , 和　健
(河北省药物研究所 ,河北 石家庄　 050061)
摘要: 目的:以松萝酸得量为指标 ,研究优选长松萝的醇提工艺。 方法: 采用正交实验法 ,考察回流时间、溶媒量、乙醇浓
度和次数四因素对松萝酸得量的影响 ;双波长薄层扫描法测定松萝酸含量。 结果: 乙醇浓度对松萝酸得量有非常显著性
影响 (P < 0. 01) ,提取次数对其有显著性影响 (P < 0. 05)。 结论: 最佳工艺条件为: 95%乙醇回流提取 2次 ,第 1次加 4倍
溶媒提取 3 h;第 2次加 3倍溶媒提取 2 h。
关键词: 长松萝 ;　正交实验 ;　松萝酸 ;　双波长薄层扫描法
中图分类号: R284. 2　　文献标识码: A　　文章编号: 1008-0805( 2005) 01-0029-01
Optimum Extraction of Usnea longissima by Orthogonal Test
GAO Bao-shuan, QIN Qing , HE Jian
( Hebei Pharmaceutical Institute , Shi jiazhuang 050061, China )
Abstract: Objective: T o study the optimum ex t raction conditions o fUsnea longissima, the yield o f usnic acid as marke r.
Methods: O rthogona l test w as used to evalua te the influence o f the 4 fac to r s, including the ex tracting time by r elux , the
amount o f ethano l, the concent ration of ethanol and the time number. The content o f usnic acid was determined by
TLCS. Results: The concent ration o f ethano l significantly influenced the yield o f usnic acid very m uch, and the time
numbe r significantly influenced tha t. Conclusion: The optimum ex trac tion is as fo llows: adding 95% ethanol into Usnea
longissima medical ma terials, ex trac ting twice by r elux for the fir st, adding 4 times amount o f 95% ethanol, ex tra cting 3
h; the second, adding 3 times amount o f the one, ex t racting 2 h.
Key words: Usnea longissima Ach;　 Or thogona l test;　 Usnic acid;　 TLCS
　　长松萝为松萝科植物长松萝 Usnea longissima Ach.的干燥
地衣体 ,又名树挂、天蓬草。 全国各地均有分布 ,主产于广西、四
川、云南等地。与松萝属节松萝 U . diff racta Vain.共为药用松萝
正品 [1～ 3]。 性味苦甘 ,平。功能清肝 ,化痰 ,止血 ,解毒。含松萝酸
( usnic acid)、巴尔巴地衣酸 ( arba tic acid)、地弗地衣酸 ( diff ractaic
acid)和拉马酸 ( rama lic acid)等多种有机酸。药理实验证明:松萝
酸为一广谱抗菌成分 ,尤其对结核杆菌和革兰氏阳性细菌作用突
出 [4] ;还有明显的抗癌 [5]、抗滴虫 [6]、抗原虫和解痉作用 [4 ]。目前 ,
有关松萝的质量和提取工艺研究报道较少。鉴于松萝酸水溶性差
( 25℃时 ,水中溶解度 < 0. 01 g /100 ml) [7 ] ,笔者采用正交实验法
对其醇提工艺进行了研究 ,为复方松萝制剂的新药开发提供试验
数据。
1　仪器与试药
1. 1　仪器 CS- 930型双波长薄层扫描仪 (日本岛津 ) , UV- 1
型三用紫外分析仪 (上海顾村电光仪器厂 ) ,定量毛细管 ( 0. 5～ 5
μl,美国产 )。
1. 2　试药 松萝 (购自安国药材市场 ,经本所中药室鉴定为长松
萝 Usnea longissima Ach. ) ,松萝酸对照品 (含量测定用 ,日本东
京化成工业株式会社 ) ,薄层板为自制硅胶 GF254板 ,试剂均为分
析纯 ,所用水为去离子水。
2　方法与结果
2. 1　薄层色谱条件 展开剂为氯仿-苯 -冰醋酸 ( 7∶ 2∶ 1);在紫
外分析仪 254 nm下观察斑点位置。双波长反射法锯齿扫描 ,λs=
290 nm,λR= 360 nm , Sx= 3。 松萝酸在 0. 50～ 2. 50μg范围内线
性关系良好 ,回归方程 Y = 71 780. 3X - 342. 20,相关系数 r=
0. 999 9;平均回收率为 97. 5% , RSD为 2. 61%。
2. 2　对照品溶液的制备 精密称取松萝酸对照品 ,用氯仿配成每
1 ml含 1. 00 mg的溶液 ,作为对照品溶液。
2. 3　正交实验 根据预实验结果 ,认为回流时间、溶媒量、乙醇浓
度和次数等因素对松萝酸得量影响较大 ,故确定四因素三水平进
行实验。 因素水平表见表 1。
表 1　因素水平
水平 A回流时间 /h
B
溶媒量 /倍
C
乙醇浓度 (% )
D
次数 /次
1 4 5 60 1
2 5 7 80 2
3 6 9 95 3
2. 4　实验结果 准确称取长松萝药材 12 g ,剪碎 ,按 L9 ( 34 )正交
表进行实验 ,分别测定各工艺样品松萝酸含量。 以松萝酸得量作
为评价指标 ,平行实验 3次 ,取平均值。 结果见表 2。
表 2　长松萝醇提工艺 L9 ( 34)正交实验结果
序号 A B C D 松萝酸得量
m /mg
1 1 1 1 1 56. 3
2 1 2 2 2 115. 1
3 1 3 3 3 142. 8
4 2 1 2 3 117. 6
5 2 2 3 1 121. 7
6 2 3 1 2 98. 0
7 3 1 3 2 164. 6
8 3 2 1 3 80. 3
9 3 3 2 1 101. 9
K 1 314. 2 338. 5 234. 6 279. 9 G= 998. 3
K 2 337. 3 317. 1 334. 6 377. 7 C T= G2 /9= 110 733. 65
K 3 346. 8 342. 7 429. 1 340. 7 QA= 110 921. 06
K 1 104. 7 112. 8 78. 2 93. 3 QB= 110 859. 32
K 2 112. 4 105. 7 111. 5 125. 9 QC= 117 040. 38
K 3 115. 6 114. 2 143. 0 113. 6 QD= 112 359. 26
R 10. 9 　 8. 5 64. 8 32. 6 S= Q- CT
　　 n= 3
由表 2直观分析结果看出 ,四因素中 C因素对实验结果影
响最大 ,为主要影响因素。 D因素的影响次之 , B因素的影响最
小 ;其影响顺序依次为 C> D> A> B;四因素好的水平为
A3B3C3D2。
2. 5　方差分析 由表 2可知 , A、 B二因素对松萝酸得量影响均
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LISHIZHEN MEDICIN E AND M AT ERIA M EDICA RESEARCH 2005 VOL. 16 NO. 1 时珍国医国药 2005年第 16卷第 1期
较小 ,其极差值相近 ,故将二因素合并作为误差列进行方差分析。
结果见表 3。
表 3　松萝酸得量方差分析
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F值 P值
C 6 306. 73 2 3 153. 36 40. 29 < 0. 01
D 1 625. 61 2 　 812. 81 10. 38 < 0. 05
误差 ( A+ B) 313. 08 4 　 78. 27
　　查表: F 1- 0. 05 ( 2, 4)= 6. 94, F1- 0. 01 ( 2, 4)= 18. 0
通过方差分析结果表明 , C因素对松萝酸得量有非常显著性
影响 , D因素具有显著性影响 ,应取两者好的水平为 C3D2。而 A,
B二因素对其影响无意义 ,结合生产实际 ,从降低成本、节约时间
等方面考虑 ,可取二者的适当水平为 A2B2。尚需进一步验证试验
确定。
2. 6　验证实验 准确称取长松萝药材 120 g ,按正交实验暂确定
的最佳工艺条件 A2B2C3D2进行实验 ,平行实验 3次。结果松萝酸
平均得量为 1. 647 g,与正交实验各工艺结果比较均相对较高。
3　结论
3. 1　 通过验证放大实验表明 ,正交实验优选确定的最佳工艺水
平是科学、可行的 ,有利于实际生产降低能源、节约时间。 故确定
长松萝醇提工艺的最佳技术条件为 A2B2 C3D2 ,即回流时间为 5 h
( 3+ 2 h ) ,溶媒量 7倍 ( 4+ 3倍 ) , 95%乙醇 ,提取 2次。
3. 2　 实验用长松萝药材为灰绿色丝状体 ,含松萝酸 1. 40% ,按
120 g投料 ,应含松萝酸 1. 68 g。验证实验结果松萝酸平均得量为
1. 647 g ,则本工艺松萝酸平均转移率为 98. 04% ,较高 ,可应用于
规模化生产。
参考文献:
[1 ]　张贵君 .中药鉴定学 [M ].北京:科学出版社 , 2002: 409-409.
[2 ]　贾敏如 ,卢先明 ,杨　军 .长松萝形态和组织学研究 [ J ].中国中药杂
志 , 1992, 17( 9): 522-523.
[ 3]　全国中草药汇编编写组 .全国中草药汇编 ,上册 [M ] .北京:人民卫
生出版社 , 1975: 496-496.
[4 ]　江苏新医学院 .中药大辞典 ,上册 [M ].上海: 上海人民出版社 ,
1977: 1256-1258.
[ 5]　靳菊情 ,丁东宁 ,欧阳雪宇 ,等 .松萝酸的提取和抗癌活性研究 [ J] .
西北药学杂志 , 1996, 11( 5): 211-212.
[ 6]　吴　杰 ,丁东宁 ,阎宝琦 ,等 .雀石蕊体外杀阴道毛滴虫作用 [ J ].中
国寄生虫学与寄生虫病杂志 , 1995, 13( 2): 126-129.
[ 7]　国家医药管理局中草药情报中心站 .植物药有效成分手册 [ M ].北
京:人民卫生出版社 , 1986: 1103-1104.
收稿日期: 2004-06-21;　修订日期: 2004-10-12
作者简介:齐　建 ( 1973-) ,女 (汉族 ) ,福建福州人 ,现任辽宁省大连市中
医医院主管中药师 ,主要从事中药制剂和调剂工作 .
肺舒合剂的制备与临床应用
齐　建 , 张　敏
(辽宁省大连市中医医院　 116013)
摘要:目的: 探讨肺舒合剂的制备工艺及制剂的质量控制。 方法: 方中僵蚕、地龙分别以 95%和 70%的乙醇提取 ,余药水
煎煮提取。用薄层色谱法对黄芩、炙麻黄定性鉴别。结果:该制剂制备工艺简便合理 ,质量可控 ,疗效可靠 ,总有效率 95%。
结论: 该制剂、制备工艺合理 ,临床疗效可靠 ,值得推广应用。
关键词: 肺舒合剂 ;　制备工艺 ;　质量控制
中图分类号: R283; R259　　文献标识码: B　　文章编号: 1008-0805( 2005) 01-0030-01
　　我院自行研制的肺舒合剂在临床应用 20多年 ,具有制备简
单、临床疗效显著、患者易于服用等特点。主要用于治疗痰浊壅肺
型支气管哮喘 ,慢性支气管炎等。该方具有健脾化痰、降逆平喘的
作用。 现将其制备工艺及临床疗效总结如下。
1　处方组成
1. 1　处方组成 党参、黄芩、茯苓、紫苏子、僵蚕、地龙、射干 、蝉蜕
125 g;白芍、山药 170 g ;半夏、麻黄 (炙 ) 83. 3 g。
1. 2　制备工艺 僵蚕、地龙置乙醇提取罐中分别以浓度为 95%
和 70%的乙醇提取 2次。 第 1次 60 min,第 2次 40 min,回收乙
醇 ,备用。 党参、黄芩、茯苓、射干、蝉蜕 、白芍、山药、半夏、麻黄
(炙 )洗净 ,紫苏子用纱布包好 ,混合煎煮两次 ,各 1 h ,过滤 ,合并
滤液 ,浓缩至规定量 ,与回收乙醇后的备用液合并 ,放凉后加入适
量矫味剂及防腐剂 ,加水至 1 000 ml,混匀 ,分装 , 100℃灭菌 40
min, 即得。
2　质量控制
2. 1　性状 本品为棕褐色的液体 ;气芳香 ,味苦。
2. 2　鉴别
2. 2. 1　 取本品 20 ml,用水饱和的正丁醇振摇提取 2次 , 20 ml /
次 ,合并正丁醇提取液 ,蒸干 ,残渣加甲醇 1 ml使溶解 ,作为供试
品溶液。另取黄芩苷对照品 ,加甲醇制成每 1 ml含 1 mg的溶液 ,
作为对照品溶液。 照薄层色谱法 [1 ]实验 ,吸取上述两种溶液各 5
μl,分别点于同一以含 4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合
剂的硅胶 G薄层板上 ,以醋酸乙酯 -丁酮 -甲酸 -水 ( 5∶ 3∶ 1∶ 1)
为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷以 1%三氯化铁乙醇溶液。供试品
色谱中 ,在与对照品色谱相应的位置上 ,显相同颜色的斑点。
2. 2. 2　 取本品 20 ml,置分液漏斗中 ,加浓氨试液 1 ml,加乙醚
振摇提取 2次 , 10 ml /次 ,合并乙醚液 ,加酸性乙醇 2 ml(乙醇 20
ml加盐酸 1 m l混匀 ) ,蒸干 ,残渣加甲醇 1 m l使溶解 ,作为供试
品溶液。 另取盐酸麻黄碱对照品 ,加甲醇制成每 1 ml含 3 mg的
溶液 ,作为对照品溶液。照薄层色谱法 [1 ]实验 ,吸取上述两种溶液
各 5μl,分别点于同一硅胶 G薄层板上 ,以氯仿 -甲醇 -浓氨试液
( 40∶ 8∶ 1)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷以茚三酮试液 ,于
105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中 ,在与对照品色谱相应
的位置上 ,显相同颜色的斑点。
2. 3　检查 相对密度应不低于 1. 08; pH值应为 4. 0～ 6. 0;其它
应符合合剂项下有关的各项规定。
3　临床应用
3. 1　病例选择 96例患者中 ,其中男 42例 ,女 54例 ;年龄: 7～
24岁 18例 , 25～ 55岁 32例 , 55岁以上 46例 ;病程最短 3 d,最长
1个月 ,以 7～ 14 d为多。主要症状为咳嗽 ,喘息 ,肺　音。诊断标
准: 参照《临床疾病诊断与国家体检标准》及《中医诊疗标准· 哮
证》 , 96例中 ,支气管哮喘 46例 ,慢性支气管炎 50例。
3. 2　疗效标准
3. 2. 1　临床控制 咳嗽 ,喘息 ,　音总是轻度或消失。
3. 2. 2　好转 咳嗽 ,喘息由 (+ + + )转为 (+ + )或 (+ ) ,　音消
失或少许　音。
3. 2. 3　无效 咳嗽 ,喘息无好转或加重 ,　音无改变。
3. 3　治疗结果 共观察 96例。 结果表明 ,临床控制 81例
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时珍国医国药 2005年第 16卷第 1期 L ISHIZHEN MEDICIN E AND M AT ERIA M EDICA RESEARCH 2005 VOL. 16 NO. 1