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桂北产对叶百部药材鉴别及总生物碱的含量测定



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桂北产对叶百部药材鉴别及总生物碱的含量测定
梁 丹 朱 华 周 峰 王孝勋 陈晓艺 崔荣辉
(广西中医药大学,广西 南宁 530001)

【摘 要】目的:测定桂北不同产地的对叶百部总生物碱含量并进行比较。方法:采用薄层色谱法对对叶百部中的生物碱进
行鉴别;采用紫外分光光度法对总生物碱进行含量测定。结果:建立了桂北产对叶百部总生物碱的薄层色谱鉴别方法和含量测定
方法。结论:TLC 显示结果表明,不同产地的各个样品斑点数目不同,对应斑点显色强度也有不同;采紫外分光光度法测定桂
北对叶百部中的总生物碱含量,测得 6 批药材样品总生物碱的含量为 12.46~29.43 mg/g,说明了桂北对叶百部种内所含生物碱
差异较为显著。
【关键词】对叶百部总生物碱;薄层色谱法;紫外分光光度法
【中图分类号】R282;S567 【文献标识码】A 【文章编号】1008-1151(2014)07-0120-02
Identify medicinal materials from North Guangxi and determine total alkaloid content
Abstract: Intention: Determine and compare the content of alkaloid of Stemona tuberosa Lour from different producing area in north
of Guangxi Province. Method: Identify alkaloid of Stemona tuberosa Lour by TLC; determine the alkaloid content of Stemona tuberosa
Lour by UV-vis. Result: Establish the TLC identification method of Stemona tuberosa Lour, and the determination method of its total
alkaloid contents. Conclusion: The result shown by TLC that different samples from different producing area have dirrerent numbers of
spots and corresponding spots have different intensity of color; total alkaloid contents range were measured between 12.46~29.43mg/g from
those 6 materials by UV, which shows the alkaloid contents of Stemona tuberosa Lour from north Guangxi have notable difference.
Key words: Total alkaloid of Stemona tuberosa Lour; TLC; UV-vis

对叶百部来源为百部科植物直立百部(Stemona sessilifolia
(Miq.) Miq.蔓生百部 Stemona japonica (Bl.) Miq.或对叶
百部 Stemona tuberosa Lour.的干燥块根。百部在我国主要
分布于秦岭以南各省区[2],主要道地产区有安徽、江苏、山
东、湖南、广西、贵州等[3]。百部性温,味甘微苦,归肺经,
具有润肺下气,止咳,杀虫等功效。内服用于新久咳嗽、肺痨
咳嗽、百日咳等;外用于头虱、体虱、蛲虫病阴痒等。
广西为对叶百部主产地之一[3],据文献及实地考察,广
西所产百部为大百部即百部科植物对叶百部Stemona tuberosa
Lour.[1]。对叶百部在广西分布广,产量大,主产地为桂林、
百色、河池等地,资源丰富[5] ,但不同产地对叶百部所含生
物碱含量差别比较大,以桂北产的对叶百部总生物碱含量较
高。本研究以桂北 6个不同地区产的对叶百部为研究对象,
对其进行薄层鉴别及总生物碱测定,为建立桂北产对叶百部
质量评价打下基础。
1 仪器与试剂
仪器:BS224S 电子分析天平(北京赛多利斯仪器公司);
UV-1800 双光束紫外可见分光光度计(日本岛津公司);对叶
百部药材分别采自桂林恭城,河池天峨、凤山、南丹、东兰、
都安,经广西大学中医药大学壮医药学院韦松基教授鉴定为
百部科植物对叶百部 Stemona tuberosa Lour.的干燥块根;
对叶百部碱(上海永恒生物科技有限公司定所,批
号:20140122);对叶百部对照药材(中国药品生物制品鉴定
所,批号:121221-201003);实验所用试剂均为分析纯。
2 实验方法
2.1 薄层鉴别
本实验通过对不同提取方法:对超声波提取、加热回流
提取;不同提取溶剂:乙醇、水、饱和正丁醇等;不同展开
剂:①氯仿∶甲醇(20∶1)、②正己烷∶氯仿∶甲醇(7.5∶
4∶2)、③正己烷∶氯仿∶甲醇(7.5∶4∶1)、④正己烷∶氯
仿∶甲醇(7.5∶6∶2)等条件进行考察;用改良碘化铋钾作
为显色剂,得出将去本品 5g 以甲醇为溶剂、超声波提取 2
次,每次 40 min,过滤,回收甲醇,采用酸溶碱沉氯仿萃取
法精制,以 10ml 甲醇溶解,制备供试液。
分别取 6批不同产地的对叶百部粉末各 5g,按以上方法
制备供试品溶液和对照药材溶液,用甲醇直接溶剂对照品溶
液,分别点于同一硅胶 G薄层板上,点样量为 10µl,用正己
总第 16 卷 179 期 大 众 科 技 Vol.16 No.7
2014 年 7月 Popular Science & Technology July 2014
【收稿日期】2014-05-06
【基金项目】桂北大宗药材对叶百部质量标准及百部洗液开发的研究(桂林市科学研究与技术开发计划项目科技攻关与新
产品试制 20090509)中药新药基础研究(广西自然科学基金创新研究团队项目 2011GXNSFF018006)。
【作者简介】梁丹(1980-),女,广西中医药大学实验师,从事中药与民族药的质量研究与开发。

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烷∶氯仿∶甲醇(7.5∶4∶2)作为展开剂展开,用改良碘化
铋钾显色。6 批药材样品供试品 TCL 色谱中,在与对照品、
对照药材色谱相应位置上显相同的棕红色斑点。(见图 1)


1.广西南丹;2 广西天峨;3 对叶百部碱对照品;4 广西凤山;
5.广西都安;6 广西东兰;7 广西恭城;8 对照药材
图 1 6 批药材样品总生物碱 TLC 图谱

结果表明:桂北不同产地的对叶百部样品与对照品
在相同的位置上均显现相同的棕红色斑点,但斑点数目
不一,对应斑点显色强度也有不同,怀疑桂北不同产地
的对叶百部种内所含生物碱存在差异。
2.2 桂北不同地区产的对叶百部总生物碱测定
生物碱是对叶百部脂溶性部位的主要成分,同时也是对
叶百部提取物的主要活性成分[7]。本研究采用紫外分光光度
法测定,以对叶百部碱为对照品,测定广西桂北不同地区对
叶百部的总生物碱含量。为制定桂北对叶百部质量标准做基
础。
2.2.1 溶液的制备
(1)对照液的制备
精密称取对叶百部碱 4.0 mg 置 50 ml 量瓶中,用氯仿稀
释至刻度,摇匀。精密量取 5ml,分别加入 10 ml 氯仿和 2ml
0.04%溴甲酚绿缓冲液,剧烈振摇 1 min,静置 30 min,取下
层氯仿液,定容至 10 ml 量瓶中,即得 0.04 mg/ml 的对照品
溶液。
(2)供试液的制备
精密称定样品粉末 1g,置于 50 ml 锥形瓶中,加入 30 ml
甲醇超声提取 30 min,过滤,取滤液蒸干,加甲醇溶解,定
容于50ml量瓶中。取该溶液0.5ml分别加入10ml氯仿和2 ml
0.04%的溴甲酚绿缓冲液,剧烈振摇 1min,静置 35min,取下
层液。
2.2.2 测定波长的选择
取供对照品溶液,在 200~800nm 波长范围内进行扫描,
最后确定最大吸收波长为 416nm。
2.2.3 线性关系考察
精密量取 0.04 mg/ml 对照品溶液 1、2、4、6、8、10ml,
分别以氯仿液定容到 10 ml 容量瓶中,以相应的试剂为空白,
在 416 nm 处测吸光度,以对照品溶液浓度为横坐标(X),其
吸光度为纵坐标(Y),绘制标准曲线回归方程为:Y=37.283X-
0.0390,r=0.9999。结果表明对叶百部碱在 0.004/m1~0.04
mg/ml 浓度范围内呈良好的线性关系。
2.2.4 精密度考察
精密量取供试品溶液(0.016 mg/ml),对同一供试品溶液
进行测定,重复 5 次,计算其总生物碱含量,结果 RSD 为
0.037%。表明精密度良好。
2.2.5 重复性考察
精密称取同一样品粉末 6 份,按供试品溶液方法制备,
测定吸光度,计算其总生物碱含量,结果 RSD 为 1.65%。结
果表明重复性良好。
2.2.6 稳定性试验考察
精密量取供试品溶液,每 30 min 测定一次样品吸光度,
连续测定 5 次,计算其总生物碱含量,结果 RSD 为 0.04%,
结果表明本实验在 150 min 内稳定性良好。
2.2.7 加样回收试验
取已知含量的同一样品粉末 6 份,每份约 0.5 g,精密
称定,分别加入适量标准品,按供试品溶液制备方法平行制
备,在相同条件下测定吸光度,计算回收率。结果平均回收
率为 99.28%,RSD 为 1.52%。(见表 1)

表 1 加样回收试验结果(n=6)
编号
样品量
(g)
原有量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率
(%)
RSD
(%)
1 0.5002 7.363 8.00 15.08 98.16
2 0.5004 7.366 8.00 15.47 100.68
3 0.5008 7.372 8.00 15.13 98.43
4 0.5007 7.370 8.00 15.53 101.04
5 0.5008 7.372 8.00 14.96 97.32
6 0.5003 7.364 8.00 15.37 100.04
99.28 1.52

2.3 测定结果
分别取 6个不同产地同一批药材样品粉末 3份,按供试
品溶液方法制备供试品溶液,在 416 nm 处分别测定吸光度,
按标准曲线法计算含量。(见表 2)

表 2 6 批药材样品总生物碱的测定果表(n=3)
编号 产地 平均吸光度(A) 平均含量 (mg/g) RSD(%)
1 广西恭城 1.0584 29.43 1.1
2 广西东兰 0.5168 14.90 1.3
3 广西凤山 0.5184 14.95 1.5
4 广西南丹 0.4803 13.93 1.4
5 广西天峨 0.5731 16.42 1.1
6 广西都安 0.4225 12.46 0.9
(下转第 135 页)

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本病的疗效。

【参 考 文 献】
[1] 胥少汀,葛宝丰,徐印坎.实用骨科学第四版[M].北京:人民
军医出版社,2012.
[2] 吕永涛,尚智.补益肝肾方治疗膝骨性关节炎临床观察[J].
中国社区医师:医学专业,2013,15(22):74-75.
[3] 余超刚.补肾化瘀法治疗膝骨关节炎的临床疗效观察[J].
成都中医药大学学报,2009,(3):33-34.
[4] 刘存根,彭再如.补阳还五汤加减治疗膝骨关节炎临床观
察[J].中国实验方剂学杂志,2009,(6):94-94.
[5] 朱兰妃,韩平,黄秀锦.桃红四物汤治疗膝骨性关节炎气滞
血 瘀 证 的 临 床 研 究 [J]. 时 珍 国 医 国 药 ,2013,24(11):
2702-2704.
[6] 赵风歧.当归四逆汤治疗膝骨性关节炎的临床研究[J].中
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[8] 蒋尧传.独活寄生汤治疗膝骨关节炎随机平行对照研究
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关节炎 30 例临床观察[J].江苏中医药,2014,(1):45-46.









(上接第 121 页)测得 6 份药材样品总生物碱的含量为
12.46~29.43 mg/g。
3 讨论
通过 TLC 显示,桂北地区不同产地的各个样品斑点数目
不一,对应斑点显色强度也有不同,说明桂北不同地区产的
对叶百部种内所含生物碱有差异,且较为显著。
通过采用紫外可见光分光光度法测定桂北地区不同产地
对叶百部总生物碱含量,得出 6 个产地药材样品总生物碱的
含量为 12.46~29.43 mg/g,平均含量为 25.87mg/g,样品中
总生物碱含量的最高值和最低值相差 1 倍以上,其中当地自
采的样品中广西恭城(29.43mg/g)、广西天峨(16.42mg/g)含
量较高。初步怀疑桂北地区不同来源的对叶百部质量存在较
大差异。
本实验初步建立了桂北产对叶百部的薄层色谱鉴别方法
及用紫外可见光测定其总生物碱含量的方法,方法简便、快
速、准确,为建立桂北产对叶百部的质量研究及桂北产对叶
百部资源开发提供了依据。

【参 考 文 献】
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国医药科技出版社,2010:123-124.
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作组第二册)[M].福州 :福建科学技术出版社,1997:
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[5] 李耀华,陈广钜,王孝勋,等.广西不同产地对叶百部总生
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[6] 陈晓霞,张旭,沈晓庆,等.对叶百部中总生物碱含量测定
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[7] 王孝勋.对叶百部的质量评价研究[D].成都:成都中医药
大学,2012.