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吴茱萸与伪品臭辣树果实的生药学鉴定



全 文 :收稿日期:2015-09-03
基金项目:上海市卫生局青年科研项目(20114y022)
作者简介:张红梅(1978-),女,博士,副教授,研究方向:中药活性成分与质量标准研究;Tel:021-51322203,E-mail:naturecolor@ 163. com。
* 通讯作者:赵志礼,Tel:021-51322507,E-mail:zhilzhao@ sohu. com。
吴茱萸与伪品臭辣树果实的生药学鉴定
张红梅1,李 国2,宋 龙1,赵志礼1*
(1. 上海中医药大学中药学院,上海 201203;2. 浙江星光农业开发有限公司,浙江 温州 325400)
摘要 目的:对吴茱萸及其伪品臭辣树的果实进行生药学鉴定研究。方法:对吴茱萸和臭辣树的原植物形态
特征、果实性状特征、横切面与粉末显微特征、薄层色谱特征进行研究,以图文形式详细记录并进行比较鉴别。结
果:吴茱萸与臭辣树在原植物形态、果实性状、显微和理化特征方面均不同,可用所描述的各方面特征进行鉴别。
结论:该文为鉴别吴茱萸及其伪品臭辣树提供了生药学资料。
关键词 吴茱萸;臭辣树;生药学鉴定
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2016)03-0515-04
DOI:10. 13863 / j. issn1001-4454. 2016. 03. 012
吴茱萸为芸香科植物吴茱萸 Euodia rutaecarpa
(Juss. )Benth. 、石虎 Euodia rutaecarpa (Juss. )
Benth. var. officinalis(Dode)Huang和疏毛吴茱萸 Eu-
odia rutaecarpa(Juss. )Benth. var. bodinieri(Dode)
Huang的干燥近成熟果实,具有散寒止痛、降逆止
呕、助阳止泻的功效〔1〕。近年来,由于受经济利益
驱动,市场上常见以同属植物臭辣树 Euodia fargesii
Dode. 的果实伪充或掺杂。有关吴茱萸与臭辣树果
实详细生药学鉴别的文献报道较少〔2-6〕。本文从原
植物形态、性状、显微、理化特征方面对吴茱萸与臭
辣树的果实进行比较鉴别,分析二者鉴别特征的异
同点,为鉴定吴茱萸药材真伪提供生药学资料,以保
证临床用药的安全与有效。
1 仪器与材料
1. 1 仪器 Leica-RM2016 轮转式切片机(莱卡医
疗仪器有限公司);MZ168-TLED 体视显微镜(Motic
麦克奥迪实业集团有限公司);BA310-T生物显微镜
ZF-90 型暗箱式紫外投射仪(上海顾村电光仪器
厂);GF254薄层层析用硅胶板(批号:20100902,青岛
海洋化工厂);薄层色谱展开缸。
1. 2 材料 柠檬苦素(批号:20110506)、吴茱萸碱
(批号:MUST-10110305)、吴茱萸次碱 (批号:
20110828)对照品均购自上海源叶生物科技有限公
司,质量分数均 > 98%。切片石蜡(50 ~ 52 ℃)、番
红生物染色剂、固绿 FCF、中性树胶均购自国药集团
化学试剂有限公司。其余试剂为分析纯。
实验样品采集于浙江省温州市,由笔者赵志礼
教授鉴定为芸香科植物吴茱萸 Euodia rutaecarpa
(Juss. )Benth. 及臭辣树 Euodia fargesii Dode. 的干
燥近成熟果实,标本存放于上海中医药大学中药学
院生药学教研室。
2 方法与结果
2. 1 原植物鉴别 通过观察吴茱萸与臭辣树原植
物的枝干、表面、叶对生情况、叶数、叶形、果序及果
实种子等原植物形态特征,对二者分别进行特征描
述。
吴茱萸为常绿灌木或小乔木,高 2. 5 ~ 10 m。
树皮青灰褐色,小枝紫褐色,幼枝、叶轴、叶柄及花序
轴均被绣色长柔毛,裸芽被紫褐色长茸毛。奇数羽
状复叶,对生;小叶 5 ~ 9,椭圆形至卵形,边全缘或
浅波浪状,两面均密被长柔毛,有粗大腺点。花单
性,雌雄异株;聚伞状圆锥花序顶生,花白色,5 数。
果实成熟时紫红色,表面有粗大的腺点;心皮 5,每
心皮具种子 1 枚,黑色有光泽。
臭辣树为乔木,高约 15 m。树皮青灰褐色,幼
枝及花序轴被锈色短柔毛。奇数羽状复叶,对生;小
叶通常 7 片,少为 5 或 11 片,椭圆状披针形、卵状矩
圆形至披针形,顶端长渐尖,基部楔形,常偏斜,边缘
有不明显的钝锯齿,叶面无毛,无腺点。花单性,雌
雄异株;聚伞状圆锥花序顶生,花白色,5 数,小形。
果实成熟时紫红或淡红色,略皱折,心皮 5 ~ 4、稀 3
个,每心皮有 1 黑褐色种子。
2. 2 性状鉴别 通过观察吴茱萸及臭辣树果实药
材的大小、颜色、表面、气、味等性状特征,对二者进
行性状特征描述。见图 1。
吴茱萸果实类球形或略呈五角状扁球形,直径
2 ~ 5 mm,表面暗黄绿色至棕褐色,有多数点状突
起,顶端稍有下凹,呈五角星状裂隙,分隔为 5 瓣,彼
此结合紧密,表面粗糙,有圆形而稍下凹的油室,花
萼及果柄上可见黄白色茸毛。横切面可见子房 5
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室,每室有椭圆形种子 1 粒,棕褐色。香气浓郁,味
苦而微辛辣。
臭辣树果实呈星状扁球形或类圆锥形,直径 2
~ 7 mm。表面呈棕褐色或黑褐色,粗糙,有皱纹,偶
见凹下的腺点,顶端呈梅花状深裂。多由 5 或 4 枚
中部以下离生的果瓣组成。果柄的茸毛稀少。横切
面可见子房 4 ~ 5 室,每室有椭圆形种子 1 粒,棕褐
色,有凸起的皱纹。气微,味苦微辛。
图 1 吴茱萸(A)和臭辣树(B)果实药材性状图
2. 3 显微鉴别
2. 3. 1 果实横切面:对吴茱萸和臭辣树样品进行
石蜡永久切片制作,借助生物显微镜和体视镜及显
微成像系统,观察样品外果皮、中果皮、内果皮等组
织各部位,并记录横切面的显微特征。见图 2。
吴茱萸果实横切面呈类圆形,由 5 心皮发育成
的 5 个果瓣组成,每果瓣 1 室,果瓣间共有裂隙 5
条。果瓣外果皮细胞 1 列,呈方形至类长方形,有的
细胞中含橙皮苷结晶,被薄角质层,偶有含红棕色物
的表皮腺毛;中果皮宽厚,细胞形态不规则,其间有
类圆形至阔长圆形油室分布,靠近外果皮处油室较
大,中果皮中部及下方约有 10 ~ 20 个维管束环列,
位于中果皮内侧至近内果皮处的薄壁细胞中含草酸
钙簇晶。内果皮窄,细胞狭长,呈梭形,切向排列成
4 ~ 7 层。种皮细胞呈梭形,栅状排列,壁较厚,胚乳
细胞多角形。
臭辣树果实横切面呈类圆形,由 5 心皮发育成
的 5 个果瓣组成,每果瓣 1 室,果瓣间共有裂隙 5
条。果瓣外果皮细胞 1 列,呈方形至类长方形,被薄
角质层,密布非腺毛;中果皮宽厚,细胞类圆形至不
规则形,其间有类圆形油室分布,近外果皮处油室较
大,在中果皮中部及下方有散在维管束及切向排列
的导管群。内果皮窄,细胞狭长,呈梭形,切向排列
成 3 ~ 5 层。种皮细胞呈长方形或类方形,壁较厚,
胚乳细胞多角形。
2. 3. 2 粉末:通过光学显微镜观察,并运用显微成
像系统记录吴茱萸与臭辣树果实的腺毛、非腺毛、草
酸钙结晶、石细胞、油室、气孔、导管、纤维等显微特
征,总结吴茱萸与臭辣树粉末显微鉴别特征的异同
点。见表 1 及图 3、4。
2. 4 薄层色谱鉴别 取药材样品粉末约 1 g,置具
塞三角瓶中,加 80%乙醇 10 mL,超声(250 W,40
kHz)处理30 min,过滤,滤液作为供试品溶液。另
图 2 吴茱萸(A)和臭辣树(B)果实一分果瓣横切面详图(×100)
1. 外果皮 2. 橙皮苷结晶 3. 中果皮 4. 油室 5. 内果皮 6. 草酸钙簇晶 7. 维管束 8. 非腺毛
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表 1 吴茱萸与臭辣树果实粉末显微鉴别特征比较
吴茱萸 臭辣树
非腺毛 较多,壁平滑,或有角质纹线及疣状突起,有的胞腔内含
黄棕色物质。由 1 ~ 9 个细胞组成,长 20 ~ 400 μm,直径
10 ~ 40 μm
众多,壁平滑,无壁疣,有的胞腔内含黄绿色物质。
多由单细胞组成,长 30 ~ 110 μm,直径 5 ~ 20 μm
腺毛 众多,大多破碎,梨形、椭圆形,含黄棕色物质。头部由 6
~ 13 个细胞组成,长 30 ~ 120 μm,直径 20 ~ 70 μm,柄由
1 ~ 3 个细胞组成,单列

草酸钙结晶 众多,成群或散在,多数为簇晶,直径 5 ~ 30 μm。偶见方
晶,直径 5 ~ 10 μm

石细胞 众多,类圆形、长方形、纺锤形或不规则形,壁较厚,孔沟
及纹孔明显,直径 5 ~ 35 μm
众多,类圆形、长方形、纺锤形或不规则形,壁较
厚,孔沟及纹孔明显,直径 10 ~ 50 μm
油室 众多,多破碎,直径 70 μm以上 较少,多为碎片
气孔 众多,不等型 不等型
导管 众多,成束存在,主要为螺纹、梯纹、网纹导管。偶见呈
长棱形的管胞
较多,主要为螺纹、梯纹、网纹导管
纤维 存在少量纤维束,壁较厚,且光滑 较多,成束存在,长菱形,壁较厚,具孔沟
图 3 吴茱萸果实粉末图(×400)
1. 导管 2. 油室 3. 非腺毛 4. 草酸钙簇晶 5. 石细胞
6. 纤维 7. 腺毛
图 4 臭辣树果实粉末图(×400)
1. 石细胞 2. 纤维 3. 非腺毛 4. 油室 5. 导管
分别取吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素对照品适
量,加 80%乙醇分别制成每 1 mL 含对照品各约 1
mg的对照品溶液。吸取上述供试品溶液和对照品
溶液适量,分别点于同一硅胶 GF254薄层板上,以正
己烷-氯仿-丙酮-甲醇(24 ∶ 9 ∶ 5. 5 ∶ 1)为展开剂,展
开,取出,晾干。薄层板先置于 254 nm 紫外灯下检
视,再喷以 10%硫酸乙醇溶液,置于 365 nm 紫外灯
下检视,最后喷以 2%香草醛-10%硫酸乙醇显色剂,
加热至斑点显色清晰,置可见光下检视。
254 nm紫外灯下检视结果显示,吴茱萸供试品
与吴茱萸碱、吴茱萸次碱对照品在 TLC 相应位置上
显荧光淬灭斑点,而臭辣树供试品在相应位置上未
显现明显斑点。喷以 10%硫酸乙醇溶液,置于 365
nm紫外灯下检视结果显示,吴茱萸供试品与吴茱萸
碱、吴茱萸次碱对照品在 TLC 相应位置上显相同颜
色的荧光斑点,而臭辣树供试品仅与吴茱萸次碱对
照品在 TLC 相应位置上显相同颜色的荧光斑点。
喷以 2%香草醛-硫酸乙醇显色剂,置于日光下检视
结果显示,吴茱萸供试品与柠檬苦素对照品在 TLC
相应位置上显相同的紫红色斑点,而臭辣树供试品
在 TLC中未见明显斑点。见图 5。
图 5 吴茱萸与臭辣树果实样品 TLC图
A. 254 nm下 B. 365 nm下 C. 可见光下 1. 吴茱萸碱
2. 吴茱萸次碱 3. 柠檬苦素 4. 吴茱萸 5. 臭辣树
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3 讨论
3. 1 吴茱萸与臭辣树在原植物嫩枝、叶、芽的被柔
毛情况、叶形及叶表面腺点分布等方面有区别。吴
茱萸幼枝、叶轴、叶柄及花序轴均被绣色长柔毛,裸
芽被紫褐色长茸毛,而臭辣树幼枝及花序轴被锈色
短柔毛;吴茱萸小叶椭圆形至卵形,边全缘或浅波浪
状,两面均密被长柔毛,有粗大腺点,而臭辣树小叶
椭圆状披针形,卵状矩圆形至披针形,顶端长渐尖,
基部楔形,常偏斜,边缘有不明显的钝锯齿,叶面无
毛,无腺点。
3. 2 吴茱萸与臭辣树在果实性状上的区别主要表
现为吴茱萸果实顶端稍有下凹,呈五角星状裂隙,分
隔为 5 瓣,彼此结合紧密,而臭辣树顶端呈梅花状深
裂,4 ~ 5 枚果瓣中部以下离生;吴茱萸果实表面有
多数点状突起及下凹的油室,而臭辣树果实表面偶
见凹下的腺点;吴茱萸花萼及果柄上可见黄白色茸
毛,臭辣树果柄的茸毛稀少;臭辣树辛辣味较吴茱萸
差。
3. 3 吴茱萸与臭辣树果实显微鉴别特征的区别在
于,吴茱萸外果皮外侧偶有含红棕色物的腺毛,而臭
辣树的外果皮密布非腺毛;臭辣树较吴茱萸的油室
分布少且小;吴茱萸外果皮细胞中偶含橙皮苷结晶,
臭辣树中未见;吴茱萸中果皮薄壁细胞中含成群的
草酸钙簇晶,臭辣树中未见。
3. 4 吴茱萸与臭辣树薄层色谱的区别为,吴茱萸
在薄层板上呈现的斑点数较多,主要含吴茱萸碱、吴
茱萸次碱及柠檬苦素,而臭辣树含较少吴茱萸次碱,
未呈现吴茱萸碱及柠檬苦素斑点。
3. 5 本文通过对吴茱萸与臭辣树果实系统的生药
学鉴别研究,总结并比较二者原植物形态、果实性
状、显微、薄层色谱鉴别特征的异同点,为鉴定吴茱
萸药材的真伪提供了详细的生药学鉴别资料。
参 考 文 献
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