全 文 ：对叶百部为百部科植物对叶百部 （Stemona tuberosa
Lour.）的干燥块根，具有润肺下气止咳，杀虫的功效、主治百
日咳、久咳不止、肺结核、钩虫病、蛲虫病等，外用杀虱 [1]。对
叶百部主产于广西，湖南、贵州、四川等地也有分布 [2]。广西、
福建、贵州、河南等地所产者个较大，山东、江苏、四川、安
徽、浙江所产者较细小 [2]。对叶百部的主要成分为生物碱类，
药理研究表明，对叶百部具有良好的镇咳祛痰，抗菌抗病毒
和杀虫等作用 [3]。据此，桂林三金药业、广西花红药业、广西
金嗓子药业等区内 30 家制药企业和国内 140 家制药企业
制成颗粒剂、片剂、膏剂、糖浆剂销往全国，可内服，也可外
用，多个产品已成为国内外知名品牌，生产企业也成为当地
的经济支柱之一。百部药材完全依靠采挖野生资源，而百部
自然繁殖能力弱，生长缓慢，3 年以上才能形成产量，需求明
显大于产出，造成其药材经常缺货断档 [4]，发展人工种植已
成当务之急。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料采自桂林亦元生现代生物技术有限公司的种
质资源圃。
1.2 试验方法
1.2.1 材料的采集。在春季选择连续 3 d 以上晴天 9：00—
10：00 采集茎段作为试验材料 [5-7]。
1.2.2 外植体的处理。将材料采回实验室后，去除叶片，截
取对叶百部带侧芽茎段，放入无菌瓶中，用自来水冲洗 1 h；
无菌的条件下，用 75%酒精浸泡 40 s，再用 0.1%氯化汞溶液
处理，无菌水清洗 4~6 次，备用。
为探讨 0.1%氯化汞溶液不同处理时间对对叶百部消毒
效果的影响，分别进行 6、10、14 min 的处理时长，接于相同
的培养基中，接种时将外植体斜插入培养基，并以侧芽贴近
培养基表面 1 mm 左右为宜，每个培养瓶接种 1 个茎段，每
个处理接种 30 瓶以上，培养 10 d 后统计并观察各处理的培
养情况。
1.2.3 诱导培养。在无菌条件下，将已灭菌的材料接到诱导
培养基中，每个处理接种 30 瓶，光照培养，30 d 后统计结
果，试验方案详见表 1。
试验还选用不同木质化程度的外植体进行诱导培养，
分别接种在编号为③的改良 MS +6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5
mg/L 诱导培养基上，每种材料接种 30 瓶，光照培养，分别
10、30 d 统计结果。
1.2.4 继代增殖培养。在无菌条件下，将诱导出的新芽剪切
成带 1~2 个芽的茎段，接于不同的继代培养基中，每个培养
瓶接 10 个茎段，40 d 后统计并观察试验结果。
继代培养基：改良 MS +6-BA 1.0~3.0 mg/L+KT 0~1.0
mg/L+NAA 0~1.2 mg/L+IBA 0~0.3 mg/L。
1.2.5 生根培养。在无菌条件下，将继代材料切成带侧芽的
切段，接于不同生根培养基中，每个处理接种 10 瓶以上，每
瓶接种 20 株。接种后置于弱光条件下培养 5 d，后光照培
养，40 d 后统计结果。
生根培养基：1/2 改良 MS+NAA 0~2.5 mg/L+IBA 0~3.0
mg/L+AgNO3 0.5 mg/L。
1.2.6 培养条件。试验用培养基均以改良 MS 为基本培养
基，附加蔗糖 40 g/L，琼脂粉 5.4 g/L，pH 值 5.8～6.0，生根培
养基还添加 0.5 g/L 活性炭。光照强度为 1 400~1 800 lx，光
照时间 12 h/d，组养温度（25±2）℃。
1.2.7 生根苗移栽及管理。将生根苗置于常温下遮荫处炼
苗 4~5 d，后打开盖子 2~3 d，让组培苗逐渐适应外界的环
境。将组培苗取出，用自来水将培养基冲洗干净，然后移植
到移栽基质中，详见表 2。
移植前用 0.1%高锰酸钾溶液对基质进行消毒，24 h 后
用清水将高锰酸钾溶液冲洗干净，12 h 后再将生根苗移栽
到试验基质中。移植后盖上塑料薄膜保湿 ，并进行遮荫处
理，保持试验基质保持湿润且不积水为宜，并注意病虫害的
防治。栽植培养期间偶见叶斑病的发生，在发病初期及时将
对叶百部组织培养快繁技术研究
杨振德 1 苏钰琴 2 周传明 1 韦祥意 2 罗文正 2
（1广西大学，广西南宁 530004； 2桂林亦元生现代生物技术有限公司）
摘要 试验以对叶百部带侧芽嫩茎为材料，对其进行组培快速繁殖技术研究。结果表明：用 0.1%氯化汞对外植体进行消毒处理最佳为
10 min，外植体污染率仅为 5.9%；木质化程度较轻或未木质化的带侧芽茎段为外植体较优；改良 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L 为最佳
初始诱导培养基，诱导率为 80.0%。改良 MS+6-BA 1.5 mg/L+KT1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L 为最佳的继代增殖培养基，增殖倍数为 4.0。1/2 改良
MS 为基本培养基，在 NAA 和 IBA 组合的培养基对生根的作用有明显促进作用，生根率均在 58.0%以上，最高生根率达到 90%。以草炭为
移栽基质移栽，移栽存活率为 99.0%，平均苗高增幅为 8.8 cm。
关键词 对叶百部；组织培养；快速繁殖
中图分类号 R282.71 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）02-0105-03
基金项目 桂林市科学研究与技术开发计划项目“医药及生物技术新
产品开发与产业化示范”（20140105-4）。
作者简介 杨振德（1966-），广西北流人，教授，从事植物生理学、植物
生长发育调控技术等学科的教学与研究工作。
收稿日期 2015-12-16
培养基编号 培养基
① 改良 MS +6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L
② 改良 MS +6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L
③ 改良 MS +6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L
表 1 对叶百部初始诱导培养基的试验方案
处理代号 基质
A 草炭
B 黄心土
C 河沙
D 黄心土+河沙（1∶1）
表 2 对叶百部生根苗移栽的试验方案
园艺学现代农业科技 2016 年第 2 期
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园艺学 现代农业科技 2016年第 2期
2.2.2 不同材料类型的外植体对初始诱导效果的影响。试
验选用不同木质化程度的对叶百部带侧芽茎段进行初始诱
导试验，以探讨不同材料类型的外植体对初始诱导效果的
影响，试验结果见表 5。可以看出，外植体的木质化程度对初
始诱导效果有一定的影响。随着木质化程度的提高，对叶百
部的诱导率有着下降的趋势，具体表现为培养 30 d 后，材料
一的诱导率为 78.8%，材料二的诱导率为 74.2%。此外，随着
木质化程度的提高，对叶百部外植体的萌发速率有下降的
趋势。因此，材料一的诱导效果优于材料二。
2.3 继代增殖培养
试验选用 NAA 和 IBA 生长素类生长调节物质，选用 6-
BA 和 KT 作为细胞分裂素类生长调节物质，探讨生长调节
物质对对叶百部增殖效果的影响，试验结果见表 6。可以看
出，不同浓度的植物激素组合对继代增殖培养存在着一定
消毒时间
min
接种瓶数
瓶
污染瓶数
瓶
萌发瓶数
瓶
污染率
%
6 34 6 18 17.6
10 34 2 25 5.9
14 34 2 27 5.9
表 3 不同消毒时长的消毒效果
培养基编号
6-BA
mg/L
NAA
mg/L
接种瓶数
瓶
污染瓶数
瓶
出芽瓶数
瓶
诱导率
%
30 d 后平均苗高
cm
① 1.0 0.2 40 3 19 51.4 2.6
② 1.0 0.5 40 0 32 80.0 3.7
③ 1.5 0.5 36 2 27 76.5 5.4
表 4 植物生长调节物质对初始诱导效果的影响
材料类型 接种瓶数∥瓶 污染瓶数∥瓶 10 d 出芽瓶数∥瓶 10 d 诱导率∥% 30 d 出芽瓶数∥瓶 30 d 诱导率∥%
材料一 35 2 26 78.8 26 78.8
材料二 35 4 21 67.7 23 74.2
表 5 不同材料类型的外植体对初始诱导效果的影响
培养基编号 6-BA∥mg/L KT∥mg/L NAA∥mg/L IBA∥mg/L 平均苗高∥cm 增殖倍数 芽苗生长情况
J1 1.0 - 0.2 - 2.1 1.5 长势差，部分叶片组织坏死
J2 2.0 - 0.2 - 2.6 2.0 长势较好，叶色正常
J3 1.0 - - 0.3 4.5 2.5 叶色正常，芽苗较壮
J4 2.0 - - 0.3 3.4 2.8 叶色正常，芽苗较壮
J5 3.0 - - 0.3 3.9 3.5 产生部分丛生芽，芽苗粗壮
J6 1.5 1.0 0.2 - 4.2 4.0 产生较多丛生芽，芽苗粗壮
表 6 生长调节物质对对叶百部增殖效果的影响
图 1 对叶百部初始诱导培养苗
病叶摘除，同时用 50%托布津可鲜性粉剂或 50%多菌灵可
湿性粉剂 1 000 倍液喷 1~2 次。此外，在该地区于春、夏、秋
季进行移栽试验时，对叶百部容易遭受蜗牛的危害，因此可
在清晨日出之前撒生石灰粉或喷洒 l%石灰水，或用茶籽饼
粉 60～75 kg/hm2撒施。
1.3 数据统计与方法
污染率（%）=污染的瓶数/接种瓶数×100
诱导率（%）=侧芽萌发的瓶数/（接种的瓶数-污染瓶数）
×100
平均苗高=该处理所有苗木高度之和/苗木株数
增殖倍数=继代培养后的芽苗株数/继代前的芽苗株数
生根率（%）=生根株数/接种株数×100
存活率（%）=存活株数/栽植株数×100
2 结果与分析
2.1 不同消毒时长对外植体消毒效果的影响
试验选用 75%酒精及 0.1%氯化汞溶液对对叶百部的
外植体进行消毒，并设计 0.1%氯化汞溶液消毒时间的单因
素试验，研究它对对叶百部外植体消毒效果的影响，结果见
表 3。可以看出，随着消毒时间的增加，外植体的污染率逐渐
下降，且趋向于稳定，消毒时间的增加有效制止了外植体污
染的发生。
2.2 初始诱导培养
2.2.1 植物生长调节物质对初始诱导效果的影响。植物生
长调节剂是植物培养基中的关键性物质，起决定性作用，将
生长素与细胞分裂素配合使用，可促进不定芽的分化、侧芽
的萌发与生长。该试验选用 6-BA 和 NAA，并设立不同的浓
度及组合，共 3 个处理，以探讨它们对对叶百部初始诱导结
果的影响，试验结果见表 4。可以看出，不同生长调节物质的
配比，对叶百部带侧芽茎段的诱导效果存在一定的差异。固
定 6-BA 的浓度为 1.0 mg/L 时，其诱导率和平均苗高随着
NAA 浓度的提高而提高，当 NAA 的浓度由 0.2 mg/L 提高至
0.5 mg/L，其诱导率由 51.4%提高至 80.0%，平均苗高的增幅
达 1.1 cm；固定 NAA 浓度为 0.5 mg/L 时，当 6-BA 浓度由
1.0 mg/L 提高至 1.5 mg/L，其诱导率由 80.0%降低至 76.5%，
而平均苗高由 3.7cm 增至 5.4 cm。可见，以改良 MS+6-BA
1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L 为初始诱导培养基可以得到较高的
诱导率，并得到质量较优的初始诱导苗（图 1）。
106
培养基
编号
NAA
mg/L
IBA
mg/L
AgNO3
mg/L
生根率
%
S1 1.5 - 0.5 18.3
S2 2.0 - 0.5 28.5
S3 2.5 - 0.5 35.0
S4 - 1.0 0.5 11.6
S5 - 2.0 0.5 56.2
S6 - 3.0 0.5 70.3
S7 2.0 0.5 0.5 58.0
S8 2.0 1.0 0.5 90.0
表 7 不同生根配方对生根诱导效果的影响
处理 基质 移植株数∥株 50 d 存活率∥% 栽植时平均苗高∥cm 50 d 平均苗高∥cm 平均苗高增幅∥cm
A 草炭 30 99.0 4.3 13.1 8.8
B 黄心土 30 86.7 4.4 11.8 7.4
C 河沙 30 76.7 4.4 9.1 4.7
D 黄心土+河沙（1∶1） 30 93.3 4.2 10.0 5.8
表 8 试验基质对移栽效果的影响
差异。固定 NAA 浓度为 0.2 mg/L，当 6-BA 浓度从 1.0 mg/L
提高至 2.0 mg/L时，对叶百部的继代增殖倍数和平均苗高随
着 6-BA 浓度的增加而上升，芽苗长势较好，且未见有部分
叶片组织坏死的现象。固定 IBA 浓度为 0.3 mg/L，对叶百部
的继代增殖倍数也随着 6-BA 浓度的增高而上升，当 6-BA
浓度为 3.0 mg/L 时，增殖倍数达到了 3.5。试验过程发现 J6
配方表现最好，说明适当加入激动素 KT 对继代苗的增殖有
较好的促进作用，增殖效果最好，增殖倍数达到了 4.0。部分
增殖效果见图 2、3。
2.4 生根培养
无菌条件下，将继代材料切成 1~2 cm，接种于不同生根
培养基中，接种后置于弱光条件下培养 5 d，后置于日光灯
下培养，40 d后统计并观察生根诱导结果，试验结果见表 7。
可以看出，以 1/2 改良 MS 为基本培养基，只添加 NAA 时，
随其浓度的增加生根率有增高的趋势，但生根率均不太高，
均在 35.0%以下；只添加 IBA 时，生根率也是随着浓度的提
高而增高，生根效果得了的改善，生根率最高达到了 70.3%；
NAA 和 IBA 组合的培养基对生根的作用有明显促进作用，
生根率均在 58.0%以上，最高生根率达到 90%，取得了较好
的生根效果。部分生根诱导效果如图 4所示。
2.5 生根苗的移栽
为探讨不同移栽基质对对叶百部的移栽效果，该试验
根据不同基质的透气性和保水保肥能力，选用草炭、黄心土
和河沙为材料，进行 4 个处理。移栽 50 d 后，开始统计并观
察移栽结果，试验结果见表 8。可以看出，移栽 50 d 后，移栽
存活率以 A 号基质最高，移栽存活率为 99.0%，其次分别为
D 号基质、B 号基质、C 号基质，移栽存活率分别为 93.3%、
86.7%、76.7%；而平均苗高增幅也以 A 号基质最高，平均苗
高增幅为 8.8 cm，其次分别为 B号基质、D号基质、C号基质，
平均苗高增幅分别为 7.4、5.8、4.7 cm。可见，以草炭为移栽基
质，可获苗木存活率为 99.0%，平均苗高为 8.8cm。部分移栽
效果见图 5、6。
图 2 对叶百部继代培养苗（J2 第 3代）
图 3 对叶百部继代培养苗（J5 第 3代）
图 4 对叶百部生根诱导培养苗
3 结论与讨论
综上所述，以 0.1%氯化汞溶液为消毒剂，最佳消毒时间
为 14 min，外植体的污染率仅为 5.9%。以木质化程度较轻或
未木质化的带侧芽茎段为外植体进行初始诱导效果较好。
以改良 MS+6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.5 mg/L 为最佳诱导培养
基，诱导率为 80.0%。以改良 MS+6-BA 1.5 mg/L +KT1.0 mg/L+
NAA 0.2 mg/L 为最佳继代增殖培养基，增殖倍数为 4.0，芽
苗粗壮。以 1/2 改良 MS 为基本培养基，只添加 NAA 或 IBA
时，随着浓度的增加生根率有所增高，但生根率均不理想，
NAA 和 IBA 组合的培养基对生根有明显促进作用，生根率
均在 58.0%以上，最高生根率达到 90%，最得了较好的生根
（下转第 115页）
杨振德等：对叶百部组织培养快繁技术研究
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图 5 对叶百部移栽效果 图 6 对叶百部移栽苗生根情况
效果。组培苗室外移栽过程，不同的基质对苗木的生长有着
不同的影响，对叶百部组培生根苗选用以草炭作为移栽基
质移栽效果最好，移栽存活率为 99.0%。
4 参考文献
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中药分册，2004，26（5）：269-270.
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学杂志，2007（6）：843-844.
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（上接第 107页）
（上接第 113页）
避免雨水过多而造成裂果。
3.8 病虫防治
坚持预防为主，综合防治的原则。以农业防治为基础，
进行以“生态控制、生物防治、物理防治和安全化学防治技
术”集成优化的绿色防控技术，通过合理的水、肥、修剪等栽
培措施，增强树势，提高树体抗逆能力，营造良好的园内小
气候；剪除病虫枝、清除病僵果和枯枝落叶；使用太阳能杀
虫灯、诱虫色板等，利用害虫的趋性、偏嗜性原理，诱杀害
虫；叶斑病、炭疽病使用 70%甲基托布津 1 000 倍液或 50%
多菌灵 800 倍液喷雾防治；黄毛虫、梨小食心虫、天牛等，可
用 20%杀灭菊酯 2 000 倍液或 5%氯氰菊酯 2 000 倍液喷雾
防治。值得注意的是，化学防治要使用高效、低毒、低残留的
农药，以保证产品质量安全[5-6]。
3.9 采收
在果实充分成熟时，分批采摘。采时做到手握果柄，轻
拿轻放。若鲜果外销或长途运输，可在果实 8成熟时采收。
4 参考文献
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[6] 李建中，高丽.重庆地区大五星枇杷栽培管理技术[J].西南园艺，2005
（5）：56-58.
治灰霉病的发生。
6.3 幼果期至着色期
可以选用世高 、霉能灵等药剂防治白腐病和预防白
粉病。
6.4 采收结束
葡萄采收后，工作重点是做好养根保叶工作。具体措施
如下：①补充养分，恢复树势。及早追肥，采果后立即追速效
肥 1 次 [1-8]。另外，需施足基肥。②揭除棚膜，及时修剪。有预
备枝的留预备枝剪除结果枝，无预备枝的剪除不合理枝（包
括重叠枝、过密枝、细弱枝等），留强旺枝预备翌年结果或留
1～2 个芽短截更新 [1-5]。③搞好灰霉病、霜霉病、炭疽病、白腐
病等病害防治 ，及时用势科 （苯醚甲环唑 ）、安泰生 （丙森
锌）、安玛（烯酰吗啉）、翠喜（咪鲜胺）、美泰（戊唑醇）、健达
（吡唑醚菌酯·氟唑菌酰胺）、卓旺（嘧菌酯）等。
7 其他管理
7.1 施足基肥
10 月，沟施有机肥 15 t/hm2、豆饼 1 500 kg/hm2、过磷酸
钙 750 kg/hm2和三元复合肥 45 kg/hm2。
7.2 冬季修剪
一般在 12 月中旬至 1 月中旬进行，修剪方式根据架
式、树势等确定。
7.3 破眠剂的使用
在保温初期，用软毛刷蘸取适量单氰胺 20～50 倍液适
量涂抹枝蔓基部几个芽眼，先端芽眼不需涂。如果全园进行
短梢修剪，则破眠剂可以不用。
7.4 棚膜撤除
采收结束后，及时将棚膜撤除，使叶有足够的光照进行
养分合成，保证下一年的开花结果。
8 参考文献
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李 工：宣城市夏黑葡萄塑料雨棚栽培技术
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