全 文 ： 来稿日期：２０１３－０９－１２
作者简介：武海晨（１９８８－），男，河南汤阴人，福建农林大学２０１１级园林植物与观赏园艺专业硕士研究生，主要研究方向：园林规
划设计；通讯作者：彭东辉（１９７１－），男，福建屏南人，副教授，博士，主要从事园林植物与应用研究。
不同激素种类和浓度对贴梗海棠芽
诱导及增殖的影响研究
武海晨１，付 超２，陈进燎１，郝 杨１，彭东辉１
（１．福建农林大学艺术园林学院，福建 福州３５００００；２．北京绿东国创农业科技有限公司，北京１０００００）
摘要：目的 筛选出贴梗海棠的最佳芽诱导培养基和增殖培养基。方法 以贴梗海棠的茎段为外植体，分
别设置１２组和１６组培养基激素浓度，进行组织培养，对试验结果进行记录并进行数理统计分析。结果 激素
配制为ＮＡＡ （０．２ｍｇ·Ｌ－１）和６－ＢＡ （１．２ｍｇ·Ｌ－１）时，芽的诱导效果达到最佳；激素配制为 ＮＡＡ
（０．５ｍｇ·Ｌ－１）和６－ＢＡ （０．６ｍｇ·Ｌ－１）时，增殖率最高。结论 本试验在芽诱导率和增殖系数方面分别比前人
研究高出３％和１００％。但是在光照时长、培养基酸碱度、培养温度等方面未进行梯度设置，后续的科研工作
可从这些影响因素入手，使贴梗海棠的组织培养技术趋于成熟。
关键词：贴梗海棠；组织培养；激素浓度
中图分类号：Ｓ ６８５．９９ 文献标识码：Ａ ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－１４９２．２０１３．０５．０１０
Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｈｏｒｍｏｎｅ Ｔｙｐｅｓ ａｎｄ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｎ Ｂｕｄ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ａｎｄ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈａｅｎｏｍｅｌｅｓ ｓｐｅｃｉｏｓａ
ＷＵ Ｈａｉ－ｃｈｅｎ１，ＦＵ Ｃｈａｏ２，ＣＨＥＮ Ｊｉｎ－ｌｉａｏ１，ＨＡＯ Ｙａｎｇ１，ＰＥＮＧ Ｄｏｎｇ－ｈｕｉ １
（１．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ａｒｔｓ ＆Ｌａｎｄｓｃａｐｅ Ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ，Ｆｕｊｉａｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ ３５００００，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｌｖｄｏｎｇｇｕｏｃｈｕａｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｅｌｅｃｔ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｍｅｄｉｕｍｓ ｆｏｒ ｂｕｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈａｅｎｏｍｅｌｅｓ
ｓｐｅｃｉｏｓａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｗｉｔｈ ｓｔｅｍ ｓｅｇｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｃｈａｅｎｏｍｅｌｅｓ ｓｐｅｃｉｏｓａ ａｓ ｅｘｐｌａｎｔｓ，ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍｓ ｗｅｒｅ ｓｅｔ
ｕｐ １２ｇｒｏｕｐｓ ａｎｄ １６ｇｒｏｕｐｓ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｒｅｓｐｅｃ－
ｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ｒｅｃｏｒｄｅｄ ａｎｄ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｙ ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ
ＭＳ＋ＮＡＡ （０．２ｍｇ·Ｌ－１）＋６－ＢＡ （１．２ｍｇ·Ｌ－１），ｗｈｉｃｈ ｈａｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ．Ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｐｒｏ－
ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ ＭＳ＋ＮＡＡ （０．５ｍｇ·Ｌ－１）＋６－ＢＡ （０．６ｍｇ·Ｌ－１．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｂｕｄ
ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｒａｔｉｏ ｉｎ ｔｈｉｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗｅｒｅ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｂｙ ３％ａｎｄ １００％ｔｈａｎ
ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｐｒｅｖｉｏｕｓ ｏｎｅｓ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅ ｉｌｕｍｉｎａｔｉｏｎ ｌｅｎｇｔｈ，ｍｅｄｉｕｍ ｐＨ，ａｎｄ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｈａｄ
ｎｏｔ ｂｅｅｎ ｓｅｔ．Ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｗｏｒｋ ｃａｎ ｓｔａｒｔ ｆｒｏｍ ｔｈｅｓｅ ｆａｃｔｏｒｓ ｔｏ ｍａｔｕｒｅ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ
Ｃｈａｅｎｏｍｅｌｅｓ ｓｐｅｃｉｏｓａ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｃｈａｅｎｏｍｅｌｅｓ ｓｐｅｃｉｏｓａ；ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ；ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
贴梗海棠 （Ｃｈａｅｎｏｍｅｌｅｓ ｓｐｅｃｉｏｓａ），俗称红梅，蔷薇科木瓜属，果实具有很高的药用价值和食用价
值。其花朵鲜润丰腴、绚烂耀目，是春季主要的庭院花之一，可应用于花境，也可作盆栽观赏，是理想的
花果俱佳树桩盆景材料。
前人对贴梗海棠开展一些基础性研究工作，如贴梗海棠的扦插生根技术［１］、整形修剪技术［２］、栽培管
理技术［３］、病虫害防治技术［４］和盆景制作技术［５］。在贴梗海棠的组培快繁方面也有过研究［６，７］，但前人试
验激素梯度较大，且人工芽诱导率和增殖系数较低，尚不能达到工厂化育苗的水平。目前其繁殖主要用分
株、扦插和压条的方法，由于其产苗量低，导致其市场价格高。通过离体器官建立贴梗海棠高效快繁再生
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第２９卷第５期
２０１３年１０月
（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｂｅｉ Ｎｏｒｔｈ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ）
Ｖｏｌ．２９Ｎｏ．５
Ｏｃｔ．２０１３
体系，获得大量苗木、降低成本，可为其组培快繁以及遗传转化育种开辟一条有效的途径。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料与地点
供试材料为贴梗海棠。试验在福建农林大学园林学院组织培养室进行。
１．２ 试验方法
本试验采用 ＭＳ为基本培养基，琼脂浓度为４．０％，培养温度 （２３±２）℃，光照时间为１４ｈ／ｄ，培养
基ｐＨ６．０～６．５。附加不同浓度的ＮＡＡ和６－ＢＡ，以筛选出贴梗海棠芽诱导和增殖阶段所用培养基最佳的
ＮＡＡ和６－ＢＡ浓度组合。
１．２．１ 外植体的制备
本研究选择生长健壮且无病虫害贴梗海棠的茎尖，先用洗衣粉浸泡３０ｍｉｎ，流水冲洗２～３ｈ，将其
切成５～７ｃｍ的茎段，然后放入超净工作台，用７０％酒精处理３０ｓ，无菌水冲洗３～４次，再用０．１％升
汞溶液处理１０ｍｉｎ，无菌水浸洗５次后用无菌滤纸吸干水分后，切成１．０～１．２ｃｍ的单芽茎段供接种使用。
１．２．２ 芽的诱导
将消毒后的外植体接种于起始培养基上，本试验以 ＭＳ为基础培养基，加入不同浓度的 ＮＡＡ和６－
ＢＡ （浓度设计见表１），每处理５０个，重复３次。
在相同的条件下观察其３０ｄ后的生长状态，统计诱导出芽的外植体数。
诱导率＝ （出芽外植体个数／接种外植体总个数）×１００％。
表１ 芽诱导培养基激素浓度配制
处理组 ＮＡＡ （ｍｇ·Ｌ－１） ６－ＢＡ （ｍｇ·Ｌ－１）
１ ０．１ ０．８
２ ０．１ １．０
３ ０．１ １．２
４ ０．１ １．４
５ ０．２ ０．８
６ ０．２ １．０
７ ０．２ １．２
８ ０．２ １．４
９ ０．３ ０．８
１０ ０．３ １．０
１１ ０．３ １．２
１２ ０．３ １．４
表２ 增殖培养基激素浓度配制
处理组 ＮＡＡ （ｍｇ·Ｌ－１） ６－ＢＡ （ｍｇ·Ｌ－１）
１ ０．４ ０．４
２ ０．４ ０．５
３ ０．４ ０．６
４ ０．４ ０．７
５ ０．５ ０．４
６ ０．５ ０．５
７ ０．５ ０．６
８ ０．５ ０．７
９ ０．６ ０．４
１０ ０．６ ０．５
１１ ０．６ ０．６
１２ ０．６ ０．７
１３ ０．７ ０．４
１４ ０．７ ０．５
１５ ０．７ ０．６
１６ ０．７ ０．７
１．２．３ 丛生芽的增殖培养
将诱导培养基中诱导出芽体按每段带有一个芽切割，转接到增殖培养基上。培养基采用 ＭＳ培养基，
加入不同浓度的ＮＡＡ和６－ＢＡ （浓度设计见表２）。每处理５０个，重复３次。
定期观察并记录生长萌发状况，５０ｄ后统计增殖芽数。
增殖系数＝增值后总芽数／初始芽数。
１．２．４ 数据处理与分析
数据处理使用ＤＰＳ软件进行统计分析。
２ 结果与分析
２．１ 贴梗海棠芽的诱导分化
从表３可以看出，当 ＮＡＡ和６－ＢＡ的浓度分别为０．２ｍｇ·Ｌ－１和１．２ｍｇ·Ｌ－１时，诱导率最高，为
９３％，此浓度配制供试材料贴梗海棠有明显的芽萌动和分化。运用数理统计的原理方法对试验结果进行方
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２０１３年１０月 河北北方学院学报 （自然科学版） 第５期
差分析，通过表４的数据可知，７号培养基平均诱导率最高，与其他培养基的诱导率间存在极显著差异，
由此可知最佳诱导培养基为７号配方。
表３ 不同激素浓度配制对贴梗海棠芽诱导的影响
处理组 培养基
ＮＡＡ
（ｍｇ·Ｌ－１）
６－ＢＡ
（ｍｇ·Ｌ－１）
１ ２ ３
接种数 诱导数 接种数 诱导数 接种数 诱导数
平均诱导
率 （％）
１ ＭＳ ０．１ ０．８ ５０ ３９ ５０ ４０ ５０ ３７ ７７
２ ＭＳ ０．１ １．０ ５０ ４３ ５０ ４０ ５０ ４２ ８３
３ ＭＳ ０．１ １．２ ５０ ４３ ５０ ４４ ５０ ４３ ８７
４ ＭＳ ０．１ １．４ ５０ ４２ ５０ ４２ ５０ ４１ ８３
５ ＭＳ ０．２ ０．８ ５０ ４３ ５０ ４２ ５０ ４０ ８３
６ ＭＳ ０．２ １．０ ５０ ４７ ５０ ４４ ５０ ４４ ９０
７ ＭＳ ０．２ １．２ ５０ ４６ ５０ ４６ ５０ ４７ ９３
８ ＭＳ ０．２ １．４ ５０ ４４ ５０ ４５ ５０ ４１ ８７
９ ＭＳ ０．３ ０．８ ５０ ４２ ５０ ３８ ５０ ４０ ８０
１０ ＭＳ ０．３ １．０ ５０ ４３ ５０ ４３ ５０ ４４ ８７
１１ ＭＳ ０．３ １．２ ５０ ４６ ５０ ４３ ５０ ４６ ９０
１２ ＭＳ ０．３ １．４ ５０ ４０ ５０ ４４ ５０ ４１ ８３
表４ 不同激素浓度配制对贴梗海棠芽诱导影响结果的差异显著性分析
处理组 诱导率均值 （％） ５％显著水平 １％极显著水平
７ ９２．６６６ ７ ａ Ａ
６ ９０．０００ ０ ａｂ ＡＢ
１１ ９０．０００ ０ ａｂ ＡＢ
８ ８６．６６６ ７ ｂｃ ＡＢＣ
１０ ８６．６６６ ７ ｂｃ ＡＢＣ
３ ８６．６６６ ７ ｂｃ ＡＢＣ
５ ８３．３３３ ３ ｃｄ ＢＣＤ
２ ８３．３３３ ３ ｃｄ ＢＣＤ
４ ８３．３３３ ３ ｃｄ ＢＣＤ
１２ ８３．３３３ ３ ｃｄ ＢＣＤ
９ ８０．０００ ０ ｄｅ ＣＤ
１ ７７．３３３ ３ ｅ Ｄ
表５ 不同激素浓度配制对贴梗海棠增殖的影响
处理
组
培养
基
ＮＡＡ
（ｍｇ·Ｌ－１）
６－ＢＡ
（ｍｇ·Ｌ－１）
１ ２ ３
初始
芽数
增殖后
芽数
初始
芽数
增殖后
芽数
初始
芽数
增殖后
芽数
平均
增殖
系数
生长
状况
１ ＭＳ ０．４ ０．４ ５０ ２９０ ５０ ２８２ ５０ ２８６ ５．７ 良好
２ ＭＳ ０．４ ０．５ ５０ ３０２ ５０ ３０４ ５０ ３１０ ６．１ 良好
３ ＭＳ ０．４ ０．６ ５０ ３３７ ５０ ３２７ ５０ ３２８ ６．６ 良好
４ ＭＳ ０．４ ０．７ ５０ ３０１ ５０ ３０８ ５０ ３０４ ６．１ 良好
５ ＭＳ ０．５ ０．４ ５０ ３１４ ５０ ３０７ ５０ ３１２ ６．２ 良好
６ ＭＳ ０．５ ０．５ ５０ ３２９ ５０ ３２２ ５０ ３１９ ６．５ 良好
７ ＭＳ ０．５ ０．６ ５０ ３５４ ５０ ３５１ ５０ ３４７ ７．０ 良好
８ ＭＳ ０．５ ０．７ ５０ ３３７ ５０ ３３９ ５０ ３４４ ６．８ 良好
９ ＭＳ ０．６ ０．４ ５０ ３０５ ５０ ３１３ ５０ ３１４ ６．２ 良好
１０ ＭＳ ０．６ ０．５ ５０ ３３１ ５０ ３３７ ５０ ３３６ ６．７ 良好
１１ ＭＳ ０．６ ０．６ ５０ ３４９ ５０ ３５９ ５０ ３５４ ７．１ 玻璃化
１２ ＭＳ ０．６ ０．７ ５０ ３５３ ５０ ３５１ ５０ ３４５ ７．０ 玻璃化
１３ ＭＳ ０．７ ０．４ ５０ ３２８ ５０ ３２１ ５０ ３２４ ６．５ 玻璃化
１４ ＭＳ ０．７ ０．５ ５０ ３３９ ５０ ３４８ ５０ ３４７ ６．９ 玻璃化
１５ ＭＳ ０．７ ０．６ ５０ ３７５ ５０ ３６６ ５０ ３６４ ７．４ 玻璃化
１６ ＭＳ ０．７ ０．７ ５０ ３６９ ５０ ３６８ ５０ ３５９ ７．３ 玻璃化
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２０１３年１０月 武海晨 等：不同激素种类和浓度对贴梗海棠芽诱导及增殖的影响研究 第５期
２．２ 贴梗海棠丛生芽的增殖培养
从表５可以看出，１５号培养基的增殖系数最高，达到７．４，但是组培苗呈半透明状，外观形态异常，
即玻璃化，影响后期的再分化。正常生长组培苗中，７号培养基增殖系数最高，可达到７．０。同样，运用
数理统计的原理方法对试验结果进行方差分析，通过表６的数据可知，双因素的交互作用差异性最显著的
依次是１５、１６、１１、７号培养基，由于１５、１６、１１号培养基均出现了玻璃化现象，因此不做考虑。而７
号培养基在未出现玻璃化的处理组中具有最高的增殖率，因此选出７号培养基配方 ＭＳ＋ＮＡＡ （０．５ｍｇ
·Ｌ－１）＋６－ＢＡ （０．６ｍｇ·Ｌ－１）为最适增殖培养基。
表６ 不同激素浓度配制对贴梗海棠增殖影响结果的差异显著性分析
处理组 增殖系数均值 ５％显著水平 １％极显著水平
１５ ７．３６６ ７ ａ Ａ
１６ ７．３０６ ７ ａ Ａ
１１ ７．０８０ ０ ｂ Ｂ
７ ７．０１３ ３ ｂｃ ＢＣ
１２ ６．９９３ ３ ｂｃ ＢＣ
１４ ６．８９３ ３ ｃｄ ＢＣＤ
８ ６．８００ ０ ｄｅ ＣＤＥ
１０ ６．６９３ ３ ｅｆ ＤＥＦ
３ ６．６１３ ３ ｆｇ ＥＦＧ
１３ ６．４８６ ７ ｇ ＦＧ
６ ６．４６６ ７ ｇ Ｇ
５ ６．２２０ ０ ｈ Ｈ
９ ６．２１３ ３ ｈ Ｈ
２ ６．１０６ ７ ｈ Ｈ
４ ６．０８６ ７ ｈ Ｈ
１ ５．７２０ ０ ｉ Ｉ
３ 讨论与结论
本试验以 ＭＳ为基本培养基，通过设置ＮＡＡ和６－ＢＡ两种激素不同浓度的处理，探究最合适的激素
浓度配比，使贴梗海棠获得理想的芽诱导率和增殖系数。通过对试验情况的记录，以及数理统计分析得
知，不同激素浓度配比对芽的诱导和增殖影响差异较大。本试验最终确定最佳诱导培养基配方为 ＭＳ＋
ＮＡＡ （０．２ｍｇ·Ｌ－１）＋６－ＢＡ （１．２ｍｇ·Ｌ－１），诱导率最高，达到９３％；在组培苗不出现玻璃化 （不影响
后期的再分化）的前提下，培养基配方 ＭＳ＋ＮＡＡ （０．５ｍｇ·Ｌ－１）＋６－ＢＡ （０．６ｍｇ·Ｌ－１）为最佳增殖培
养基，增殖系数达到７．０。
本试验的研究结果，在芽诱导率和增殖系数方面分别比前人研究高出３％和１００％。但是本试验在光
照时长、培养基酸碱度、培养温度等方面未进行梯度设置，后续的科研工作可从这些影响因素入手，使贴
梗海棠的组织培养技术趋于成熟。
参考文献：
［１］韩伟．扦插生根过程中贴梗海棠插穗生理生化指标的变化［Ｊ］．山东农业科学，２００９，（０３）：２８－３０．
［２］刘合刚，刘国杜．贴梗海棠的整形修剪技术［Ｊ］．中药材，２００１，２４（１１）：７８５－７８７．
［３］邓运川，沙刚．贴梗海棠的栽培管理［Ｊ］．中国花卉园艺，２０１０，（１４）：３４－３５．
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［５］戴驰．贴梗海棠盆景制作与养护技术［Ｊ］．现代农业科技，２０１１，（２３）：２６６－２６７．
［６］马冬菁．贴梗海棠组织培养技术研究初报［Ｊ］．辽宁林业科技，２００７，（０４）：５０－５１．
［７］陈罡．贴梗海棠组织中继代增殖条件的研究［Ｊ］．生物技术通报，２００８，（ｚ１）：２１０－２１２．
［责任编辑：刘守义 英文编辑：刘彦哲］
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２０１３年１０月 河北北方学院学报 （自然科学版） 第５期