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“发汗”对续断质量的影响



全 文 :第 29 卷 第 12 期
2 0 1 1年 1 2月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 29 No. 12
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“发汗”对续断质量的影响
金奇1,2,来平凡1,杜伟锋3,吴芳1,徐姗姗1
(1.浙江中医药大学,浙江 杭州 310053;2.赣南医学院,江西 赣州 341000;
3.浙江中医药大学中药炮制技术研究中心,浙江 富阳 311401)
摘 要:目的:研究续断产地加工“发汗”对其质量的影响。方法:通过对续断“发汗”前后水溶性浸出物、醇
溶性浸出物、总皂苷和川续断皂苷Ⅵ含量变化的比较进行研究。结果:续断“发汗”后浸出物和醇溶性浸出物和
总皂苷均有不同程度降低,但“发汗”后川续断皂苷Ⅵ的含量升高了。结论:本研究表明续断产地加工“发汗”有
一定的合理性,建议续断的产地加工坚持发汗处理。
关键词:续断;发汗;质量影响
中图分类号:R943. 1 文献标识码:A 文章编号:1673 - 7717(2011)12 - 2636 - 03
Effects of primary processing on quality of Dipsacus asperoides
JIN Qi1,2,LAI Ping-fan1,DU Wei-feng3,WU Fang1,XU Shan-shan1
(1. Zhejiang Chinese Traditional Medical University,Hangzhou 310053,Zhejiang,China;
2. Gannan Medical University,Ganzhou 341000,Jiangxi,China;3. Zhejiang Chinese Medical
University,Rearch Center of TCM Processing Technology,Hangzhou 311401,Zhejiang,China)
Abstract:Objective:To study the effects of primary processing on quality of Dipsacus asperoides. Methods:It was
studied through comparing the content variation of akebia saponin D,total saponins,water and alcohol extracts. Results:
The content variation of akebia saponin D,total saponins,water and alcohol extracts were decreased after primary process-
ing,but the quantity of akebia saponin D was incressed. Conclution:This research shows that habitat processing method of
Dipsacus asperoides is reasonable in some degree,so it is advised to insist the habitat processing of Dipsacus asperoides.
Key words:Dipsacus asperoides;primary processing;effects of quality
收稿日期:2011 - 08 - 19
基金项目:国家科技重大专项课题资助项目(2009ZX09308 - 004)
作者简介:金奇(1984 -) ,男,湖南邵阳人,硕士研究生,研究方向:
生药品种鉴定与品质评价研究。
通讯作者:来平凡(1961 -) ,男,浙江杭州人,教授,博士研究生导
师,研究方向:生药品种鉴定与品质评价研究。
续断为川续断科植物川续断 Dipsacus asper Wall ex
Henry干燥根。味苦、辛,微温,归肝、肾经,具有补肝肾,行
血脉,续折伤的功效,临床上多用于腰膝酸软、风湿痹痛、崩
漏、胎漏、跌打损伤等症[1],产于四川、贵州、湖北、重庆和
湖南等地。续断传统的产地加工中,“发汗”处理是必不可
少的一个环节。本研究对不同的产地“发汗”前后对续断
质量的影响进行了较为系统、全面的研究,以说明产地传统
初加工的必要性。
1 续断药材质量评价指标的建立
随着研究的不断深入,已明确续断中总皂苷有明显地
促进成骨细胞分化和形成[2 - 6]而有抗骨质疏松[7,8]、治疗
骨折的作用[9 - 12]和治疗阿尔茨海默症的作用[13 - 15],而川
续断皂苷Ⅵ是续断中治疗 AD 和白血病的活性物
质[16,17]。通过对《中华人民共和国药典》2010 版(一部)
及续断相关文献的比较分析,本研究选择总皂苷与川续断
皂苷Ⅵ的含量及醇溶性、水溶性浸出物作为评价指标对其
进行研究。
1. 1 仪器、试药和药材
Agilent1200 高效液相色谱仪(美国安捷伦公司) ,UV
- 2450 紫外 -可见分光光度仪(日本岛津) ,KQ - 500DB
型数控超声波清洁器(昆山市超声仪器有限公司) ,AL204
电子天平(瑞士梅特勒 -托利多公司)。DFT - 50 手提式
高速万能粉碎机(温岭市林大机械有限公司) ,DKS - 12
型不锈钢新型电热恒温水浴锅(宁波江南仪器厂)。化学
对照品川续断皂苷Ⅵ(中国药品生物制品检定所,供含量
测定用,批号:111685 - 200401)。乙腈为色谱纯;水为纯
化水,其他试剂均为分析纯。药材均购于浙江中医大学中
药饮片厂,经浙江中医药大学来平凡教授鉴定为中国药典
规定的川续断 Dipsacus asper Wall ex Henry的干燥根。
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DOI:10.13193/j.archtcm.2011.12.38.jinq.055
第 29 卷 第 12 期
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中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 29 No. 12
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1. 2 水溶性浸出物和醇溶性浸出物含量比较
依照《中华人民共和国药典》2005 年版一部“续断”项
下“浸出物”项规定的方法及附录 XA浸出物测定法测定续
断的水溶性浸出物和醇溶性浸出物(乙醇浓度 95%)[1]。
热浸法 取供试品约 2g 精密称定,置 100mL 的锥形
瓶中,精密加水 50mL,密塞,称定重量,静置 1h 后,连接回
流冷凝管,加热至沸腾,并保持微沸 1h。放冷后,取下锥形
瓶,密塞,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,用干燥
滤器滤过,精密量取滤液 2mL,置已干燥至恒重的蒸发皿
中,在水浴上蒸干后,于 105℃干燥 3h,置干燥器中冷却
30min,迅速精密称定重量。除另有规定外,以干燥品计算
供试品中水溶性浸出物的含量(%)。醇浸出物仍照上述,
只需将水换成 95%的乙醇。测定结果如表 1 ~ 2。
表 1 不同产地续断发汗前后水溶性浸出物含量的比较
产地
水溶性浸出物(%)
发汗 不发汗
四川 46. 75 53. 28
湖北 1 54. 92 56. 28
湖北 2 58. 00 58. 50
贵州 1 49. 48 53. 88
贵州 2 47. 42 48. 68
表 2 不同产地续断发汗前后醇溶性浸出物含量的比较
产地
水溶性浸出物(%)
发汗 不发汗
四川 46. 75 53. 28
湖北 1 54. 92 56. 28
湖北 2 58. 00 58. 50
贵州 1 49. 48 53. 88
贵州 2 47. 42 48. 68
由表 1 和表 2 可以看出续断“发汗”后水溶性浸出物
和醇溶性浸出物含量都降低了。
1. 3 紫外分光光度法测定“发汗”前后总皂苷的含量[5]
1. 3. 1 对照品溶液的配制
取齐墩果酸对照品 40. 0mg,精密称定,置 10mL的容量
瓶中,加入甲醇至刻度,摇匀,制成 4mg·mL -1的齐墩果酸
溶液。再精密吸取 1mL,至 10mL 容量瓶中,加入甲醇至刻
度,摇匀,即得 0. 40mg·mL -1的齐墩果酸对照品溶液。
1. 3. 2 显色方法及测定波长的选择
精密吸取齐墩果酸对照品溶液 0. 2mL 至具塞试管中,
水浴挥干溶剂,以空白试剂为对照,加入新配制的 5%香草
醛 -冰醋酸 0. 2mL,高氯酸 0. 8mL,密塞摇匀,于 60℃水浴
中加热 20min,立即取出,冰水浴冷却后加入冰醋酸 5mL,
摇匀。于 200 ~ 800nm 波长范围内进行扫描,选取最大吸
收波长 548nm为测定波长。
1. 3. 3 标准曲线的制备 分别精密吸取上述对照品溶液
0. 0、0. 1、0. 2、0. 3、0. 5、0. 7mL 至具塞试管中,0. 5mL 甲醇
溶液做空白对照,参照“1. 3. 2”项下自“水浴挥干溶剂”起
依法操作,在 548nm 处测定吸光度,以吸光度(Y)为纵坐
标,对照品浓度(mg·mL -1) (X)为横坐标,绘制标准曲线
如图 2 - 1,并计算回归方程得:Y = 40. 872X + 0. 0392,r =
0. 9991。
图 1 紫外分光光度法测定续断总皂苷标准曲线
1. 3. 4 样品溶液的制备 取续断样品粉末(过 3 号筛)约
1. 0g,精密称定,加入 20 倍量 50%乙醇,超声提取 2 次,
30min每次,滤过,滤液置 50mL容量瓶中,加入 50%乙醇至
刻度,摇匀,再取 1mL,至 10mL容量瓶中,加入 50%乙醇至
刻度,摇匀,即得。
1. 3. 5 样品中总皂苷的含量测定 精密吸取各样品溶液
0. 5mL于具塞口试管中,参照“1. 3. 2”项下自“水浴挥干溶
剂”起依法操作,50%乙醇溶液做空白,在 548nm 处测定样
品液的吸光度值,计算不同产地续断样品中总皂苷的含量。
总皂苷含量结果见表 3。
表 3 不同产地续断发汗前后总皂苷含量的比较
产地
续断总皂苷(%)
发汗 不发汗
四川 5. 66 6. 64
湖北 1 4. 98 5. 08
湖北 2 4. 89 5. 53
贵州 1 4. 56 5. 80
贵州 2 5. 04 6. 48
由上表可以看出“发汗”后续断药材总皂苷的含量都降低了。
1. 4 “发汗”前后川续断皂苷Ⅵ含量比较
1. 4. 1 测定方法 依照《中华人民共和国药典》2010 年版
一部“续断”项下“含量测定”项规定的方法(高效液相法)
测定川续断皂苷Ⅵ含量[1]。用十八烷基硅烷键合硅胶为
填充剂;流动相为甲醇 ∶ 水(30 ∶ 70) ;检测波长为 212nm。
理论板数按川续断皂苷Ⅵ峰计算不低于 3000。
1. 4. 2 结果 发汗与不发汗对续断皂苷Ⅵ含量的影响比
较结果见表 4。
表 4 不同产地续断发汗前后续断皂苷Ⅵ含量的比较
产地
续断皂苷Ⅵ(%)
发汗 不发汗
四川 1. 64 1. 25
湖北 1 2. 50 2. 27
湖北 2 2. 90 2. 21
贵州 1 0. 93 0. 61
贵州 2 2. 14 2. 13
由表 4 可以得知续断“发汗”后续断皂苷Ⅵ含量均有
所升高。
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2 分析与讨论
续断“发汗”后水溶性浸出物、水溶性浸出物和总皂苷
都降低了,但“发汗”能使续断皂苷Ⅵ含量也有所升高。上
述结果的原因可能是续断在以麻袋覆盖堆置“发汗”的过
程中酶解了相关物质所致。本研究结果表明“发汗”这一
传统的产地加工方法具有一定的科学性,建议产地加工
“发汗”工艺应该得到坚持,但“发汗”机理还待进一步研
究。受市场经济的影响,药农的加工趋于简单化,要么不发
汗直接晒干或烘干,要么“发汗”的时间、温度达不到要求,
导致商品续断品质下降,这种状况亟待改变。
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2767 - 2768.
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