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白花曼陀罗和白屈菜水浸液杀菌效果研究



全 文 :白花曼陀罗和白屈菜水浸液杀菌效果研究
宋瑞佳 ,侯伟倬 ,杨 杰 ,冯静 ,张小娜 ,范红哲 ,甄占萱* ,邓淑华 (承德医学院 ,河北承德 067000)
摘要 [目的 ]研究药用植物白花曼陀罗(DaturametelL.)和白屈菜(ChelidoniummajusL.)对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌水浸液的杀菌
效果。 [方法 ]取当年生成熟白花曼陀罗和白屈菜植株 ,用沸水浸提法制成药液 ,以双黄连口服液为对照 ,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌
进行杀菌研究。 [结果 ]白花曼陀罗对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均无明显抑杀作用;白屈菜对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有明显的抑
杀作用 ,但对金黄色葡萄球菌抑杀作用比对大肠杆菌的更强。 [结论]白屈菜水浸液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有明显的抑杀作用 ,
而白花曼陀罗水浸液无杀菌作用。
关键词 白花曼陀罗;白屈菜;水浸液;杀菌;大肠杆菌;金黄色葡萄球菌
中图分类号 R284.1  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2010)09-04941-02
EffectsofWaterExtractfromDaturafastuosaL.andChelidoniummajusL.onSterilization
SONGRui-jiaetal (ChengdeMedicalColege, Chengde, Hebei067000)
Abstract [ Objective] TheaimwastolearntheefectsofDaturafastuosaL.andChelidoniummajusL.waterextractonsterilizationofE.co-
liandS.aureus.[ Method] ThestudyselectdtheripeunderyearlingD.fastuosaandC.majuswithboilingwater.WithShuanghuanglianas
thecontrol, theefectsofD.fastuosaandC.majusonS.aureusandE.coliwerestudied.[ Results] TheresultsshowedthatD.fastuosahas
noobvioussterilizationefectsonS.aureusandE.coli, whileC.majuswasonthecontrary.[ Conclusion] C.majuswaterextracthasobvious
inhibitoryefectsonS.aureusandE.coli, andD.fastuosawaterextracthasnobactericidalefect.
Keywords  DaturafastuosaL.;ChelideniummajusL.;Waterextract;Sterilization;E.coli;S.aureus
基金项目 承德医学院大学生科研项目。
作者简介 宋瑞佳(1987-),女 ,河北邢台人 ,本科生 , 专业:中药。 *
通讯作者 ,高级实验师。
收稿日期  2009-12-02
  白花曼陀罗(DaturametelL.)别名洋金花 、狗核桃 、山大
麻子等 ,为茄科 1年生草本植物;它的植株有毒 、果实有剧
毒;全株入药 ,主要有效成分有东莨菪碱 、莨菪碱等 ,易溶于
水 ,微溶于醇 [ 1] ;人体临床有平喘止咳 、祛风 、麻痹止痛 、镇静
等作用。白屈菜(ChelidoniummajusL.)别名山黄连 、八步
紧 、雄黄草等 ,为罂粟科多年生草本植物;全株入药 ,主要有
效成分为白屈菜碱 、白屈菜红碱 、黄连碱等;性凉 、苦 、有毒;
具有镇痛 、止咳 、解毒 、消肿之功效 [ 1] 。在药用植物中有毒植
物在人类生产和生活的历史过程中起着很大作用。从资源
利用上讲 ,有毒植物为经济植物的一个类别 ,属于应用植物
资源范畴。只有认识它们 ,了解开发利用它们 ,才能发挥其
应有的价值 。为了开发应用有毒植物资源 ,笔者曾于 2007
年 ,以家蚕为试验材料 ,研究了白花曼陀罗水溶浸提液对鳞
翅目昆虫的触杀与胃杀作用 ,结果表明 ,白花曼陀罗水浸液
对家蚕无触杀作用 ,但有明显的麻醉作用 [ 2] 。在此基础上 ,
笔者研究了白花曼陀罗 、白屈菜水浸液的杀菌作用 ,以期为
今后药用植物在农业和中医药方面的应用奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试菌种。大肠杆菌标准株 ,金黄色葡萄球菌标
准株。
1.1.2 供试植物。当年生白花曼陀罗新鲜植株 ,当年生的
白屈菜全株。
1.1.3 对照药物。三精牌双黄连口服液 。
1.2 方法
1.2.1 菌种培养。将供试菌种接种在营养肉汤中后 ,放入
37℃恒温箱中培养 18 ~ 24 h即可。培养好的供试菌种稀释
100倍后作为细菌供试液待用。菌种的培养等操作均在无菌
室中进行。
1.2.2 水浸液的制备。取当年生白花曼陀罗新鲜植株(包
括枝干 、叶 、花 、果)和当年生白屈菜全株适量 ,用沸水浸提法
浸提 [ 2] ,制成水浸药液供试验用 。
1.2.3 液体杀菌试验。试验在 24孔板中进行。每 1个 24
孔板为 1组 ,容纳白花曼陀罗水浸液 、白屈菜水浸液 、双黄连
口服液 3个药样 ,分别编号为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。每个供试药样设原液 、
1∶1稀释液 、1∶2稀释液 、1∶4稀释液 、1∶8稀释液 5种处理;另设
阳性对照(营养肉汤中只加细菌液 ,不加杀菌药液)、阴性对
照(营养肉汤中不加细菌液 ,也不加杀菌药液)。
在 24孔板中 ,每个药样占据 1行 5个孔 ,先在第 1孔中
滴加 1.0 ml供试药液 ,以后各孔滴加 1.0ml营养肉汤;再于
第 2孔中加入 1.0ml供试药液 ,使之成为 1∶1稀释液 ,混合后
从中吸取 1.0 ml放入第 3孔中 ,使之成为 1∶2稀释液 ,依次类
推 ,第 4、5孔分别倍比稀释成 1∶4、1∶8液体。将最后 1孔多
余的 1.0 ml液体弃去 ,使各孔液体量相同。在 24孔板各供
试行的 1 ~5孔中 ,用加样枪分别加入 50 μl大肠杆菌菌液。
第 6孔设为阴性 、阳性对照。另取一块 24孔板 ,按上述操
作 ,加入金黄色葡萄球菌菌液。每组处理设 2个重复。
将以上加入供试菌液的 24孔板放入 37 ℃恒温箱中培
养 18 ~24h后取出 ,观察各孔细菌生长情况 。混浊者为有细
菌生长 ,记录为 “ +”;清纯者为无细菌生长 ,记录为 “ -”;清
纯中略见混浊体者记录为 “ ±”。以此初步判断各处理孔中
的药液对细菌有无抗杀作用 [ 3] 。
1.2.4 平板培养观察 。用直径为 7.5 cm的二重皿 ,加入营
养琼脂 ,制成固体平板培养基 。用加样枪从 “1.2.3”各孔中
分别取 100 μl细菌液 ,放于二重皿固体平板培养基中(简称
平板),用载玻片涂匀 。每孔取 2次 ,分别铺于 2块平板中 ,
即作为 2次重复。然后将加入细菌液的平板放入 37 ℃恒温
箱中培养 18 ~ 24 h后取出 ,观察各平板中细菌生长情况 。无
细菌生长者记录为 “★”;生长较少者记录为 “菌落 ”;生长较
多者记录为 “苔 ”。
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(9):4941-4942 责任编辑 姜丽 责任校对 卢瑶
2 结果与分析
2.1 液体杀菌试验结果 由表 1可知 ,白花曼陀罗对金黄
色葡萄球菌和大肠杆菌均无抑杀作用;白屈菜对金黄色葡萄
球菌和大肠杆菌有明显的抑杀作用 ,但与三精牌双黄连口服
液相比杀菌作用略弱。
表 1 24孔板液体细菌培养结果
Table1 Theliquidbacterialcultureresultsin24orificeflat
细菌名称
Bacterianame
药液名称
Waterextract
编号
No.
原液
Rawliquor
1∶1稀释
1∶1dilution
1∶2稀释
1∶2dilution
1∶4稀释
1∶4dilution
1∶8稀释
1∶8dilution
阴性对照
Negativecontrol
阳性对照
Positivecontrol
金黄色葡萄球菌 白花曼陀罗 D.fastuosa Ⅰ + + + + + - +
S.aureus 白屈菜 C.majus Ⅱ - - + + + - +
三精牌双黄连口服液 Ⅲ - - - ± + - +
Shuanghuanglian
大肠杆菌 白花曼陀罗 D.fastuosa Ⅰ + + + + + - +
E.coli 白屈菜 C.majus Ⅱ - + + + + - +
三精牌双黄连口服液 Ⅲ - - ± + + - +
Shuanghuanglian
2.2 平板培养观察结果 由表 2可知 ,白花曼陀罗对金黄
色葡萄球菌和大肠杆菌均无抑杀作用 ,致使各平板中均长满
菌苔;而白屈菜和三精牌双黄连口服液对金黄色葡萄球菌的
抗杀作用比对大肠杆菌更强 。
表 2 平板细菌培养结果
Table2 Thebacterialcultureresultsin2re-dishflat
细菌名称
Bacterianame
药液名称
Waterextract
编号
No.
原液
Rawliquor
1∶1稀释
1∶1dilution
1∶2稀释
1∶2dilution
1∶4稀释
1∶4dilution
1∶8稀释
1∶8dilution
阴性对照
Negativecontrol
阳性对照
Positivecontrol
金黄色葡萄球菌 白花曼陀罗 D.fastuosa Ⅰ 苔 苔 苔 苔 苔 ★ 苔
S.aureus 白屈菜 C.majus Ⅱ ★ ★ 苔 苔 苔 ★ 苔
三精牌双黄连口服液 Ⅲ ★ ★ ★ 苔 苔 ★ 苔
Shuanghuanglian
大肠杆菌 白花曼陀罗 D.fastuosa Ⅰ 苔 苔 苔 苔 苔 ★ 苔
E.coli 白屈菜 C.majus Ⅱ 菌落 苔 苔 苔 苔 ★ 苔
三精牌双黄连口服液 Ⅲ ★ ★ 菌落 苔 苔 ★ 苔
Shuanghuanglian
3 结论与讨论
(1)该研究结果表明 ,有毒植物白花曼陀罗对大肠杆菌
和金色葡萄球菌均无抑杀作用。相关研究表明 ,白花曼陀罗
对昆虫也没有触杀作用 ,只有麻醉作用 [ 2] 。由此可见 ,白花
曼陀罗不宜作为农药植物在农林业中应用 ,只能作为麻醉药
物在医学上应用。
(2)白屈菜虽有杀菌作用 ,但与对照三精牌双黄连口服
液比较 ,杀菌效果较差。可能的原因:一是白屈菜自身杀菌
能力差;二是白屈菜为单方 ,而三精牌双黄连口服液为复方 ,
复方药剂通过合理配伍可使杀菌作用表现得更强 、更全面。
(3)三精牌双黄连口服液杀菌效果较强的另一个原因可
能与药液浓度有关。双黄连口服液已经通过国家认证 ,成人
1次口服 10 ml,浓度太低 ,剂量不足 ,就不会达到治病效果 。
而白屈菜等药液的制备粗浅 ,只按中药饮片的煮制方法进行
了粗提取。由此可知 ,今后对供试药原液的制备方法要进一
步改善 。
参考文献
[ 1] 杜怡斌.河北野生资源植物志 [ M].保定:河北大学出版社 , 2000:178,
207, 214.
[ 2] 甄占萱 ,杨贵明 ,李季生,等.白花曼陀罗水浸液对家蚕的药杀效果研
究Ⅰ[ J].安徽农业科学, 2009, 37(3):1151-1152.
[ 3] 李凡,刘晶星.医学微生物学 [ M].北京:人民卫生出版社, 2008:32.
[ 4] AORIGELE,WANGCJ, YUJE, etal.Sterilizationefectsofbacterialin-
hibitoronEscherichiacoliincatlemanurecompost[J].AgriculturalSci-
ence&Technology, 2008, 9(6):154-156.
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ofFnBPligandbindinggeneofStaphylococcusaureus[J].AgriculturalSci-
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4942           安徽农业科学                         2010年