全 文 ：不 同·培养基对云芝产 丝体
多 糖 含 量 的 影 晌馨 赵 岚(浙江省中 华锐巍二弓研 究所 )
云芝是一种药用真菌 , 它含有丰富的多糖成份 ,
是一种较为有效的抗癌治癌药物 。 日本从云芝中提
取云芝多糖 ( P S K )广泛用于 :!谷床 . 多糖含量的多少
直接影响云芝的品质 , 本实验选用不同的液体培养
基培养云芝菌丝体 , 考察不同的配方对云芝多糖的
影响 ,为今后的液体培养提供理论依据 .
材浦斗及方诀
(一 )供试材料 菌种是从长白山 自然 保 护
区来集的云芝子实体分离得黝` 培养基设四种 : ①蔗
糖 、 黄豆粉 、 蛋白膝 、 K H : P O ; 、 M峪 O ` 、 V B l 。 ②葡
萄糖 .花生粉 、 酵母粉 、 K H 二P O 锡 、 M g S O ` 。 ③葡萄
糖 、花生粉 、玉米粉 、 K H : P O : 、 M : 5 0 ` . ④蔗糖 、蚕蛹
粉 、淀粉 、 M络O ` 、 K H : P O ` 。 仪器为C S一。 30 双波长
薄层扫描仪 。 标准品分析纯葡萄糖 、半乳糖 、廿露城 。
(二 ) 云芝 多糖水解 首先要制备样 品 , 取
液体培养菌丝休 , 用蒸馏水冲洗三次 , 于 80 ℃烘箱内
烘千 。水解时取不同样品 1 0 m马 分别加入 1~ 正水
解管 , 水解管内各加入 1N H _ 5 0 ; 10 m l , 封管后在
1 0 0℃水浴中水解 2 0小时 , 然后用 IN B a ( O H ) 中和
至 p H = 7 . 。 , 并将水解液置 10 ℃烘箱内浓缩 。
(三 ) 云芝多据 成 汾分 离 ①薄届方 沂 : 硅
胶 G 1 5 g + P H s N a H P O ;一 N t兑 H P O ` 缓冲液 4 5m l
研匀 , 铺于 2 0 x Z o c m 的平反上明干 , 在 1 0 ℃ 烘箱
内烘烤活化 1小时 . ②展开系统 : 丁醇 : 丙酮 : 水 ( 4
,
5 , 1 )
。 点样量为 扭 1定量毛细管 , 点样量从 1~
知 1. 展开方式为上行 , 展距 1 5 “ : :叭包和数分钟 ) . ⑧
显色 : 层析后的薄层板挥干溶剂 , 用苯胺一一二苯
胺显色剂喷雾 , 于 1 0 ℃烘箱中烘数分钟 , 可见不同
颜色的斑点 。
(四 )薄层扫描 ①测定条件 : 反射式锯齿扫
描 ;狭缝1 25 x 1 . 25 m m ; 灵敏度中 ; 线性参数 S x 二
3 ;峰检出方式为面积法 . ②波长确定 :对标准品斑点
进行光谱测定 , 以其在可见区的最大吸收波长为样
品波长 。肪 = 6 35 n m 。
结果与讨论
不同培养基的层析结果如A 图 。 从 A图可见 , l
号培养基面积最大 , 为 78 6了6 . 5 , 其次为 I 号培养基
5 35 47
.
45
, 以下依次为 I 号培养基 4 5 4 2 6 . 3 3 , 万号培 .
养基 3 1 4 02 . 6 4 。 说明 l 号培养基对云芝菌丝体多糖
` . “
戈 碱 霉户川 共妞气介聋蕊 举蒸 , 户 产荃奋 四 啊 ( 盆畏盛嘴 二户 口 , 口石一: , }魏划认
的产生和积累最为有效 .
从层析图和图 I 、 丁的峰的数目和形状可见 , 、
I 号样品经水解后可分离出三种单糖 ; I 、 l 、 万号
样品为二种单糖 , 说明不同培养基对云芝菌丝体多
糖的组分也有一定的影响 . 三种单糖各为何种单搪
粼琴各单糖的含量是多少 , 还有待于进一步研究 .
` 本实验为今后如何以多糖作为指标 , 进行云芝
液体培养及发酵工艺的研究提供 了一种快速准确的
测试方法 , 同时对其它以多糖为主要指标的液体发
醉也适用 , 参 考 文 献 (略 )
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