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甘南高原红景天中多糖含量的测定



全 文 :湖 北 农 业 科 学 2014 年
收稿日期:2014-03-28
项目基金:甘肃民族师范学院院长基金项目(13-11)
作者简介:丁耀光(1980-),男,甘肃临潭人,讲师,硕士,主要从事天然产物化学研究,(电话)13893912287(电子信箱)dingyaoguang@163.com。
红景天(Rhodiola rosea)系景天科红景天属植
物,草本或亚灌木植物,藏语称“苏罗玛布”。 因其含
花色素,根及根茎呈红色,浸液亦呈红色,故名红景
天[1,2]。红景天根茎富含植物多糖,可入药。红景天多
糖可调节人体血糖平衡,延缓机体衰老,有效增强
细胞活性,对白血病,糖尿病疗效显著,可缓解缺
氧、抵御寒冷,具有抗辐射、抗病毒等功效[3]。甘南藏
族自治州地处西藏高原东北部,冬季寒冷而漫长,夏
季温暖而短暂,全年日照充足,平均气温在-0.5~3.5
℃之间,最高气温为 28 ℃,最低气温为-23 ℃,平均
无霜期 48 d。 该地区属于亚高寒草甸湿润类型,适
合生长多种双子叶、禾本科和莎草科植物。 本试验
通过测定甘南高原红景天中的多糖含量,以期为甘
南地区产红景天的品质评价和开发应用提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
试验样品采自甘南藏族自治州合作市,自然阴
干,粉碎过 20目筛,备用。
1.2 仪器与试剂
CMD-20X 电热恒温鼓风干燥箱 (上海琅轩实
验设备有限公司),ORW1.5S-3E 超声提取仪 (南京
澳润微波科技有限公司),RE-52AA 旋转蒸发仪(上
海宙辉生化仪器有限公司),SHZ-D(A)型循环水真
空泵(天津华鑫仪器厂),HHS-数显恒温水浴锅(江
苏省金坛市环宇科学仪器厂)等。
苯酚、葡萄糖、正丁醇、石油醚、三氯甲烷、浓硫
酸、乙醇等均为分析纯试剂,去离子水。
1.3 方法
1.3.1 脱脂 称取 10 g制备好的红景天样品,置于圆
底烧瓶中, 加 100 mL 石油醚(沸程 60~90 ℃),在
85.5 ℃的恒温水浴中回流提取 50 min, 冷却, 离心
3 min 回收石油醚,重复 2 次,将残渣挥干溶剂,备
用[4]。
1.3.2 粗多糖的提取 在 250 mL 圆底烧瓶中加入
去离子水和脱脂后的红景天残渣, 料液比为 1∶15,
超声提取 30 min, 以 4 000 r / min 离心 6 min, 取上
清,抽滤,收集滤液,再将滤液转入旋转蒸发仪,重
甘南高原红景天中多糖含量的测定
丁耀光,马富花,丁耀春
(甘肃民族师范学院化学与生命科学系,甘肃 合作 747000)
摘要:红景天(Rhodiola rosea)系景天科红景天属植物,富含植物多糖。 通过超声提取红景天中的多糖,采
用苯酚-硫酸比色法测定其含量,结果表明,甘南高原红景天中多糖的含量达到 0.542 4 g / kg,该结果可为
红景天植物的评价提供参考。
关键词:红景天(Rhodiola rosea);多糖含量;甘南高原
中图分类号:O629.12 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2014)14-3396-02
Determination of Polysaccharide in Rhodiola rosea from Gannan Plateau
DING Yao-guang,MA Fu-hua,DING Yao-chun
(Department of Chemistry and Life Science, Gansu Normal University for Nationalities, Hezuo 747000, Cansu, China)
Abstract: Rhodiola rosea is a plant in the Crassulaceae family Rhodiola genus, which is rich in polysaccharides. The
polysaccharide was extracted with ultrasonic extraction and detected with phenol sulfuric acid colorimetry. The results showed
that the content of polysaccharide in Rhodiola rosea from Gannan plateau reached 0.542 4 g / kg. It will provide a reference
for evaluating rhodiola rosea.
Key words: Rhodiola rosea; polysaccharide; Gannan plateau
第 53卷第 14期
2014年 7月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 53 No.14
Jul.,2014
第 14 期
复 2次,浓缩至 30 mL[5, 6]。取出置于锥形瓶中,加入
三氯甲烷-正丁醇(5∶1,V / V) 混合溶液 20 mL,搅拌
20 min,以 4 000 r / min 离心 6 min,收集上清,检测
上清 OD280 nm值,重复至上清无吸收,即蛋白质已经
除尽 [7]。 将上述上清液置于 1 000 mL 量筒,加入 5
倍体积的无水乙醇,静置 24 h 后,抽滤,收集滤渣,
滤渣真空干燥,得到红景天多糖。
1.3.4 测定 采用苯酚-硫酸法分光光度法测定多
糖含量。 称取干燥至恒重的葡萄糖 100 mg,以去离
子水定容至 100 mL, 分别移取标准溶液 0~10 mL,
同法定容至 100 mL,得标准品工作液。 分别取 1 mL
标准品工作液于具塞试管中, 依次加入 1 mL 4%
(m / V)苯酚,7 mL 浓硫酸,振荡 4 min,静置 30 min
后测定 OD490 nm 值, 以 1.0 mL 去离子水作空白对
照,绘制标准曲线。
1.3.5 红景天多糖溶液的配制 称取干燥至恒重
的红景天多糖 0.643 6 g,去离子水定容至 100 mL容
量瓶中[8]。
1.3.6 换算因子的测定 精密称取干燥至恒重的
多糖样品 0.010 5 g 于 100 mL 容量瓶中, 去离子水
定容。 吸取 1 mL待测液,采用“1.3.4”法测定。 根据
公式 f=m / C× D计算换算因子, 其中 m为多糖质量
(g),C 为多糖液中葡萄糖浓度 (mg / mL),D 为多糖
稀释倍数 [9]。
2 结果与分析
2.1 标准曲线和换算因子
用移液管取适量样品溶液 , 加入显色剂,在
400~600 nm 范围内扫描 [9],确定最大吸收波长为
490 nm。 以 OD490 nm为 Y,葡萄糖浓度(mg / mL)为 X,
得标准曲线 Y=0.046 7X+0.006 4,R=0.999 5,线性范
围在 2~10 mg / mL 范围内良好。 计算得换算因子为
f=0.497 6。
2.2 样品中多糖的测定
分取 3 个样品, 参照上述方法处理和检测,样
品中的多糖含量见表 1。
由表 1 可知 ,3 批样品中多糖含量分别为
0.547 2,0.537 8,0.542 1 g / kg,RSD 为 0.41%, 表明
分析方法较稳定。
3 小结
本试验采用超声提取法提取甘南高原的红景
天中多糖,并以葡萄糖为参照物,采用苯酚-硫酸分
光光度法测定了多糖含量。 结果表明,甘南高原红
景天中多糖的含量为 0.542 4 g / kg,该方法适用于分
析红景天中的多糖含量,该结果为开展甘南地区产
红景天的品质评价和开发应用提供参考。
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表 1 样品中多糖含量测定结果
样品编号
1
2
3
平均吸光度
3.54
3.36
3.47
含量//g/kg
0.547 2
0.537 8
0.542 1
平均含量//g/kg
0.542 4
(责任编辑 周有祥)
丁耀光等:甘南高原红景天中多糖含量的测定 3397