全 文 :·药品检验·
HPLC测定南方菟丝子中槲皮素和山萘酚的含量
郭澄 张纯 邵元福 郑越 黄春明 (上海 200003第二军医大学长征医院)
摘要 目的:建立南方菟丝子中槲皮素和山萘酚的高效液相色谱测定方法。方法:采用 YWG-C18柱 ,甲醇-4g·L-1磷酸(55∶
45)为流动相 ,检测波长 360nm。 结果:该法回收率槲皮素为 102.8%, 山萘酚为 96.7%;RSD 槲皮素为 2.6%, 山萘酚为
0.8%(n =5)。结论:本测定方法为菟丝子类药材质量评价提供了可靠的依据。
关键词 槲皮素;山萘酚;高效液相色谱法;南方菟丝子
Determination of quercetin and kaempferol in the seeds of Cuscuta australis by HPLC
Guo Cheng (Guo C),Zhang Chun(Zhang C),Shao Yuanfu(Shao YF), et al (Changz heng Hospital , Second Military
Medical University , Shanghai 200003)
ABSTRACT OBJECTIVE:To establish an assay of quercetin and kaempferol in the seeds of Cuscuta australis R.Br.with high per-
formance liquid chromatog raphy.METHOD:YWG-C18(10μm , 250mm×4.6mm)was packed in the analytical column.The mobile
phase consisted of me thanol-4g·L-1 phosphoric acid solution(55∶45).The de tection w avelength was 360nm.RESULTS:The aver-
age recoveries of quercetin and daempferol were 102.8% and 96.7% respectlively;RSD were 2.6% and 0.8% respectively.CON-
CLUSION:This method could be used fo r the quality evalua tion of Cuscuta.
KEY WORDS kaempferol , quercetin ,HPLC , Cuscuta australis R.Br.
菟丝子药材系常用的补肾壮阳类中药 ,南方菟
丝子为其主流品种[ 1] 。黄酮类成分是南方菟丝子
的主要活性成分 , 其中以槲皮素和山萘酚为代
表[ 2] 。我们采用 HPLC 测定药材中这二种成分的
含量 ,现报道如下。
1 仪器和材料
美国光谱物理公司高效液相色谱仪 SP -8800
泵 ,Chrom De脱气机 ,Spact ra UV 2000检测器 , SP
-4290积分仪。
槲皮素和山萘酚对照品(中国药品生物制品检
定所);南方菟丝子(上海市药材公司),经郭澄鉴定
为 Cuscuta australis R.Br.的干燥成熟种子。
2 实验方法和结果
2.1 色谱条件
色谱柱:YWG-C18 , 10μm , 250mm×46mm ,流
动相:甲醇-4g·L-1磷酸(55∶45);流速:1.0m l/min;
检测波长:360nm;灵敏度:1.0AUFS 。对照品图谱
见图 1。
2.2 线性关系
精密称取槲皮素对照品 1.23mg 、山萘酚对照品
1.17mg ,分别置 10ml量瓶中 ,用甲醇溶解 ,并稀释
至刻度。2 种溶液再分别吸取 0.2 , 0.4 , 0.8 , 1.2 ,
1.6ml ,置 10ml量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 。在上
述色谱的条件下 ,分别进样 10μl ,测定峰面积。以峰
面 积对进样量回归得回归方程为:槲皮素 A =
72 128.15 C -38 804.68 (r =0.9995),山萘酚
A =83 284.88 C -23 933.24(r =0.9993)。
2.3 样品测定
精密称取 40 目南方菟丝子粗粉约 0.5g ,置索
氏提取器中加100ml石油醚回流脱脂 2h ,再用90ml
甲醇提取 3h ,提取液置 10m l量瓶中 ,加甲醇至刻
度 。进样前用微孔滤膜滤过。样品图谱见图 1 。测
定结果见表 1。
表 1 样品测定结果
样品号 槲皮素含量/ % 山萘酚含量/ %
1 0.018 0.019
2 0.020 0.021
3 0.021 0.022
2.4 精密度试验
取槲皮素浓度为 14.76μg·ml-1 、山萘酚浓度为
14.04μg·ml-1的对照品供试液 ,分别按上述条件重
复进样 5次 ,由标准曲线算得含量 ,进行精密度试
验 。结果见表 2。槲皮素 RSD 为 4.6%, 山萘酚
·113·中国药学杂志 1999年 2月第 34卷第 2期 Chin Pharm J , 1999 February , Vol.34 No.2
RSD 为 3.1%。
图 1 对照品及南方菟丝子样品的 HPLC 图谱
A —对照品;B—南方菟丝子;1—桷波素;2—山萘酚
表 2 精密度试验结果
样品 槲皮素/μg·ml-1 山萘酚/μg·ml-1
1 14.02 14.65
2 13.02 13.75
3 14.10 14.86
4 14.84 14.74
5 14.21 14.37
2.5 加样回收试验
精密称取药材粉末 5份 ,分别加入一定量对照
品供试液 ,依样品测定项下操作 ,进行回收率试验 。
结果见表 3。
3 讨 论
3.1 我们曾用薄层扫描法[ 3]测定菟丝子药材中黄
酮类成分的含量 。本实验采用 HPLC 测定槲皮素
和山萘酚含量 ,干扰因素少 ,是比较合理的一种方
表 3 回收率试验
样品 样品中含量/μg
对照品
加入量/μg
测得总
量/μg
回 收
率/ %
回收率
平均值/ %
RSD
/ %
山萘酚 100.3 175.5 277.0 100.7
107.7 175.5 273.2 94.3 96.7 2.6
117.9 175.5 284.8 95.1
113.0 175.5 283.9 97.4
102.3 175.5 271.1 96.2
槲皮素 95.5 184.5 283.1 101.7
102.5 184.5 292.7 103.1 102.8 0.8
112.3 184.5 303.4 103.6
107.6 184.5 296.7 102.5
97.5 184.5 285.5 101.9
法 ,对菟丝子质量评价及提高疗效有实际意义。本
法测定黄酮成分有拖尾现象 ,故参考在流动相中加
入少量磷酸的方法[ 4] ,并调整各组分比例 ,改善了
分离效果 。经比较 HPLC 和薄层扫描法所测结果
基本一致 ,表明在该条件下 ,HPLC 测定这 2种成分
是可行的。
3.2 本批药材中这 2种成分含量偏低 ,初步分析认
为菟丝子为寄生植物 ,其含量可能依寄主不同差异
较大 ,又与季节不同有关 。提示今后应结合寄主植
物进行化学成分研究 ,以利更加完善药材质量标准 ,
为开发药材资源提供科学依据。
参考文献
1 郭澄 ,张芝玉 ,郑汉臣 ,等.中药菟丝子的本草考证和原植物调查.
中国中药杂志 , 1990 , 15(3):138.
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志 , 1997 , 32(1):8.
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(10):581.
4 张晓琦 ,陈颖怡.高效液相色谱法测定银杏叶提取物中槲皮素的
含量.色谱 , 1994 , 12(4):302.
(收稿:1998-01-15)
高效薄层扫描法测定愈肝扶正胶囊中黄芪甲苷含量
王荣 赵兴红 胡晓丽1(兰州 730020兰州军区后勤部药物研究所;1 兰州 730020兰州军区医学高等专科学校教务部)
摘要 目的:研究愈肝扶正胶囊质量控制方法 。方法:运用高效薄层扫描法对该制剂中黄芪甲苷的含量进行测定。结果:薄
层色谱斑点清晰 , 黄芪甲苷在 2 ~ 12μg 范围内浓度与峰面积线性关系良好 r = 0.9994 , 平均回收率为 98.9%, RSD 为
2.00%。结论:建立的测定愈肝扶正胶囊中黄芪甲苷含量的方法简便 、可靠 ,重现性好 ,可作为该制剂质量控制方法。
关键词 愈肝扶正胶囊;高效薄层扫描法;黄芪甲苷;质量控制
Quality control of Yugan Fuzheng capsule with HPTLCS
Wang Rong (Wang R),Zhao Xinghong (Zhao XH),Hu Xiaoli (Hu XL)(Lanzhou Military Command Medical Insti-
tute , Lanzhou730020)
ABSTRACT OBJECTIVE:To provide a method of quality contro l for Yugan Fuzheng capsule(preparation of Chinese ma teria medi-
ca).METHOD:High performance thin-layer chromatographic scanning(HPTLCS)was used for the determination of astrag alo side Ⅳ
·114· Chin Pharm J , 1999 February , Vol.34 No.2 中国药学杂志 1999年 2月第 34卷第 2期