免费文献传递   相关文献

柳叶腊梅叶总黄酮超声波协同复合酶提取及抗氧化活性研究



全 文 :124
柳叶腊梅叶总黄酮超声波协同复合酶提取
及抗氧化活性研究
耿敬章
(陕西理工大学生物科学与工程学院,陕西汉中 723000)
收稿日期:2016-04-25
作者简介:耿敬章(1980-) ,男,硕士,副教授,研究方向:食品质量控制与资源开发利用研究,E-mail:gengjingzhang@ 163.com。
基金项目:陕西省社会发展攻关项目(2016SF-354)。
摘 要:以柳叶腊梅叶为原料,研究复合酶协同超声波提取柳叶腊梅叶总黄酮的提取工艺及体外抗氧化活性。以柳叶
腊梅叶总黄酮的提取量为指标,确定了最佳处理酶为纤维素酶和果胶酶复合添加,添加比例为 3∶ 1。并通过响应面优
化实验确定柳叶腊梅叶总黄酮提取最佳工艺条件为超声功率 290 W,超声提取时间 24 min,乙醇浓度 90%,液料比
27(mL/g)。在此条件下进行验证实验,柳叶腊梅叶总黄酮的提取量达到 83.1 mg /g。抗氧化实验表明柳叶腊梅叶总黄
酮的自由基清除效果为 IC50(DPPH·)= 1.22 mg /mL,IC50(·OH)= 0.92 mg /mL,因此,柳叶腊梅叶总黄酮具有较好的体
外抗氧化活性。
关键词:柳叶腊梅叶,总黄酮,提取,复合酶,抗氧化
Extraction of total flavonoids from Chmonathus salicifolius
S.Y.H leaves by complex enzymatic hydrolysis
assisted iltrasonic and its antioxidant activity
GENG Jing-zhang
(College of Biological Science and Engineering,Shaanxi SCI-TECH Universiiy,Hanzhong 723000,China)
Abstract:The extraction of total flavonoids from Chmonathus salicifolius S.Y.H leaves by complex enzymatic
hydrolysis assisted ultrasonic and its antioxidant activity were studied,the optimum enzyme on the extraction
amount of total flavonoids from Chmonathus salicifolius S.Y.H leaves were cellulose and pectinase,and the ratio of
cellulose and pectinase was 3∶ 1.The optimum extraction conditions of total flavonoids from Chmonathus salicifolius
S.Y.H leaves were determined by response surface methodology.It was concluded that ultrasonic extraction power
for 290 W,ultrasonic extraction time for 24 min,ethanol concentration for 90%,and the solution and material ratio for
27(mL/g). And the extraction amount of total flavonoids from Chmonathus salicifolius S.Y.H leaves reached
83.1 mg /g. The flavonoids from Chmonathus salicifolius S.Y.H leaves had good antioxidant activity in vitro,the
oxidation experiments showed that the IC50 of DPPH· and ·OH were 1.22 mg /mL and 0.92 mg /mL,so the
flavonoids from Chmonathus salicifolius S.Y.H had good antioxidant activity.
Key words:Chmonathus salicifolius S.Y.H leaves;total flavonoids;extraction;composite enzymatic;antioxidant
activity
中图分类号:TS202 文献标识码:A 文 章 编 号:1002-0306(2016)21-0124-07
doi:10. 13386 / j. issn1002 - 0306. 2016. 21. 016
柳叶蜡梅(Chimonanthus salicifolius S.Y.H)为蜡
梅科蜡梅属植物[1],俗称石凉茶、山蜡茶等,是优良的
香料植物和药用植物,为畲族广泛应用的中草药之
一[2-3],并且国家卫生计生委已经批准柳叶蜡梅作为
新食品原料开发利用[4]。现代药理研究表明,山腊梅
茶对抗菌消炎、抗病毒效果显著[5]。研究表明,柳叶
蜡梅富含挥发油、槲皮素、黄酮类、生物碱等有效活
性成份,具有清热解毒、预防感冒、助消化、止泻、减
肥、消脂降压、预防心脑血管疾病的作用[6-8]。其中
黄酮类化合物是柳叶腊梅叶中最主要的功能性成
分[9]。黄酮类化合物是一类具有抗氧化、抗肿瘤、
降血糖以及增强免疫力等功效的生物活性的物质
总称,目前,黄酮类化合物提取方法以乙醇浸提法
和超声波、微波辅助提取法[10-11]为主,而复合酶协
同超声提取柳叶腊梅叶总黄酮仍未见报道。因此,
本实验选取柳叶腊梅叶为原料,优化复合酶协同超
声提取柳叶腊梅叶总黄酮的工艺条件,并研究其体
外抗氧化活性,以期为柳叶腊梅的开发利用提供
125
参考。
1 材料及方法
1.1 材料与仪器
柳叶腊梅叶 采集于陕南植物园,洗净后 60 ℃
烘干,粉碎。过 60~80 目筛,备用;芦丁标准品 中
国药品生物制品检定所,纯度 99.7%;纤维素酶(酶活
力 10000 U/g)、果胶酶(酶活力 30000~100000 U/g)、
中性蛋白酶(酶活力 10000 U/g)、木瓜蛋白酶(酶活力
10000 U/g)、碱性蛋白酶(酶活力 10000 U/g) 和氏
璧生物技术有限公司;VC、乙醇、NaOH、NaNO2、
Al(NO3)3 等,所有试剂均为分析纯,天津市富宇精细
化工有限公司;HPD-600 型大孔树脂 郑州勤实科
技有限公司。
ZN-02 型粉粹机 北京兴时利和科技有限公
司;TU-1221 紫外-可见分光光度计 北京普析通用
仪器公司;QCD6150 型数控超声清洗器 天津恒瑞
机电设备有限公司;TDL-40B 型离心机 上海安亭
科学仪器厂;Al204 型电子天平 梅特勒-托利多仪
器 上海有限公司;DHF-9055A 型电热鼓风干燥
箱 上海一恒科技有限公司;RE5298 型旋转蒸发
仪 上海亚荣生化仪器厂 等。
1.2 实验方法
1.2.1 柳叶腊梅叶总黄酮提取工艺流程 柳叶腊梅叶
→称取→调 pH→酶解→灭酶→超声辅助提取→真空抽滤→
收集滤液→滤渣再提取→合并滤液→减压浓缩→石油醚脱脂
→旋转蒸发→柳叶腊梅叶总黄酮粗提物→大孔树脂柱→吸附
→洗脱→收集→浓缩→加乙醇→旋转蒸发浓缩→真空干燥→
柳叶腊梅叶总黄酮纯品
1.2.2 柳叶腊梅叶总黄酮的测定 采用 NaNO2 -
Al(NO3)3 -NaOH比色法
[12]。
标准溶液的配制:准确称取芦丁标准品 10.0 mg
置于 10 mL容量瓶中,95%乙醇溶解后稀释到100 mL。
分别取芦丁标准溶液 0.8、1.6、2.2、3.5、5.0、10.0 mL于 6
只 100 mL 容量瓶中,加入 2.0 mL 5% NaNO2 溶液,
放置 3 min,加 2.0 mL 10% Al(NO3)3 溶液,放置
3 min,最后加 10.0 mL 4% NaOH 溶液。蒸馏水定
容,摇匀。以不加显色剂的空白组作对比,510 nm处
测定系列标准溶液的吸光度,并绘制标准曲线。
样品的测定:准确移取一定量的样品溶液于容
量瓶中,加入显色剂,定容,摇匀。以不加显色剂的
空白组作对比,510 nm处测样品吸光度,代入标准曲
线方程得到不同处理的总黄酮的含量,并按下式计
算柳叶腊梅叶总黄酮的提取量。
柳叶腊梅叶总黄酮的提取量 M =
M1
M0
其中,M为柳叶腊梅叶总黄酮的提取量(mg /g) ;
M1 为不同处理所得的总黄酮的含量(mg) ;M0 为不
同处理所用柳叶蜡梅原料质量(g)。
1.2.3 酶种类的选择 参考有关文献[13],分别选
取纤维素酶、果胶酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性
蛋白酶,添加量为柳叶蜡梅质量的 2%,于 42 ℃的恒
温水浴锅中酶解 90 min,然后煮沸灭酶 10 min,在乙
醇浓度为 80%、超声功率为 300 W、液料比为
15(g /mL)的条件下提取 20 min。以柳叶腊梅叶总黄
酮提取量为指标,筛选出适合柳叶腊梅叶总黄酮提
取的酶种类。
1.2.4 复合酶添加比例的确定 纤维素酶和果胶酶
分别按 4∶ 1、3∶ 1、2∶ 1、1∶ 1、1∶ 2、1∶ 3、1∶ 4(g /g)比例添
加,添加柳叶蜡梅质量 2%,其他同 1.2.3 操作。
1.2.5 柳叶腊梅叶总黄酮提取条件的优化 通过单
因素实验考察乙醇浓度、超声功率、超声提取时间、
液料比对柳叶腊梅叶总黄酮提取效果的影响,在选
取各因素的最优实验范围,采用响应面优化法对柳
叶腊梅叶总黄酮超声提取条件进行优化。
1.2.5.1 超声功率对柳叶腊梅叶总黄酮提取效果的
影响 设定超声提取时间 20 min,乙醇浓度为 85%,
液料比为 21(g /mL) ,分别在超声功率为 150、200、
250、300、350、400、450 W 七个梯度下提取柳叶腊梅
叶总黄酮并且测其提取量。
1.2.5.2 超声提取时间对柳叶腊梅叶总黄酮提取效
果的影响 设定超声功率 300 W,乙醇浓度为 85%,
液料比为 21(g /mL) ,分别在超声提取时间为 5、10、
15、20、25、30、35 min七个梯度下提取柳叶腊梅叶总
黄酮并且测其提取量。
1.2.5.3 乙醇浓度对柳叶腊梅叶总黄酮提取效果的
影响 设定超声功率为 300 W,超声提取时间为
20 min,液料比为 21(g /mL) ,分别在乙醇浓度为
70%、75%、80%、85%、90%、95%、100%七个梯度下
提取柳叶腊梅叶总黄酮并且测其提取量。
1.2.5.4 液料比对柳叶腊梅叶总黄酮提取效果的影
响 设定超声功率为 300W,超声提取时间为20 min,
乙醇浓度为 85%,分别在液料比为 12、15、18、21、24、
27、30(mL /g)七个梯度下提取柳叶腊梅叶总黄酮并
且测其提取量。
1.2.5.5 响应面优化实验 结合单因素实验结果,选
取超声功率、超声提取时间、乙醇浓度、液料比,以总
黄酮提取量为评价指标,采用响应面实验设计方案,
优化柳叶腊梅叶总黄酮超声波协同复合酶提取的工
艺条件,因素水平见表 1。
1.2.6 柳叶腊梅叶总黄酮抗氧化活性研究
1.2.6.1 DPPH·清除率的测定 参考 Shimada K
等[14]的方法。取柳叶腊梅叶黄酮溶液 1.0 mL 与
10 mL 100 μmol /L 的 DPPH·溶液加入同一试管中,
摇匀,黑暗中放置 20 min,测其吸光度,下列公式计
算清除率:
清除率(%)=[(Ac -Ai)/Ac]× 100
式中:Ac -去离子水加 DPPH·溶液的吸光度;
Ai -柳叶腊梅叶黄酮溶液加 DPPH·溶液的吸光度。
1.2.6.2 羟自由基(·OH)清除能力的测定 采用邻
二氮菲-Fe2 +氧化法测定[15]。
2 结果与分析
2.1 标准曲线绘制
按 1.2.2 方法得到的 510 nm 处标准曲线方程式
经统计回归处理,得到线性方程为 y = 7.3673X -
0.0179,R2 = 0.9998,x为标准品的浓度(mg /mL) ;y为
吸光度。
126
表 1 实验因素水平及编码
Table 1 Test factors level and coding
因素
编码水平
- 1.68 - 1 0 1 1.68
A超声功率(W) 215.91 250 300 350 384.09
B超声提取时间(min) 11.59 15 20 25 28.41
C乙醇浓度(%) 76.59 80 85 90 93.41
D液料比(mL /g) 18.95 21 24 27 29.05
2.2 酶种类对柳叶腊梅叶总黄酮提取效果的影响
由图 1可知,当选用单一酶时,柳叶腊梅叶总黄酮
提取量较低,只选用纤维素酶时,总黄酮提取量为单一
酶组最高为 54.2 mg /g。然而,两者酶复合使用时,总
黄酮提取量提高,纤维素酶和果胶酶复合使用时,总黄
酮提取量达到 64.7 mg /g。这可能因为两种酶彼此之
间存在协同作用,提高了提取量。故提取柳叶腊梅叶
总黄酮时,选择纤维素酶和果胶酶复合使用。
图 1 酶种类对柳叶腊梅叶总黄酮提取量的影响
Fig.1 Influence of types of enzyme
on extraction rate of total flavonoids
2.3 酶添加比例对柳叶腊梅叶总黄酮提取效果的
影响
由图 2 可知,纤维素酶和果胶酶以 3∶ 1(g /g)比
例比添加时总黄酮提取量较高,故选择纤维素酶和
果胶酶的添加比例为 3∶ 1(g /g)。
图 2 纤维素酶和果胶酶添加比例
对柳叶腊梅叶总黄酮提取量的影响
Fig.2 Influence of addition ratio of
cellulose and pectinase on extraction of total flavonoids
2.4 柳叶腊梅叶总黄酮提取条件的优化
2.4.1 超声功率对柳叶腊梅叶总黄酮提取效果的影
响 超声波的空化作用能在液体内部产生强烈的冲
击波和微射流,有助于细胞内组分渗透到溶液中,由
图 3 可以看出,在 150~300 W范围内,柳叶腊梅叶总
黄酮提取量随着超声功率的增加而随之增大,当超
声功率为 300 W 时提取量达到最大,因此最佳超声
功率应该控制在 300 W左右。
图 3 超声功率对提取效果的影响
Fig.3 Influence of ultrasonic frequency on extraction effect
2.4.2 超声提取时间对柳叶腊梅叶总黄酮提取效果
的影响 由图 4 可以看出,在 5~20 min范围内,柳叶
腊梅叶总黄酮提取量随着超声时间的延长而随之增
大,当超声时间为 20 min时提取量达到最大,继续增
加超声处理时间,其黄酮提取量反而降低,分析造成
此结果的可能原因是:长时间高温超声处理会破坏
黄酮类化合物的结构,影响黄酮的得率。因此最佳
提取时间应该控制在 20 min左右。
图 4 超声提取时间对提取效果的影响
Fig.4 Influence of extraction time on extraction effect
2.4.3 乙醇浓度对柳叶腊梅叶总黄酮提取效果的影
响 由图 5 可以看出,在乙醇浓度 70% ~85%范围
内,随着乙醇浓度的增大,柳叶腊梅叶总黄酮提取量
逐渐增加,85%时达到最大,随后随着乙醇浓度的增
大,柳叶腊梅叶总黄酮提取量逐渐降低。这是因不
同体积分数的乙醇水溶液极性不同,黄酮类化合物
具有较高的极性,85%乙醇水溶液极性与黄酮类化
合物的极性相似,故选取乙醇浓度 85%为宜。
2.4.4 液料比对柳叶腊梅叶总黄酮提取效果的影
响 如图 6 所示,在液料比 12~24(g /mL)范围内,柳
127
图 5 乙醇浓度对提取效果影响
Fig.5 Influence of ethanol concentration on extraction effect
叶腊梅叶总黄酮提取量随着料液比的增大而增加,
当料液比达到 24(mL /g)时,柳叶腊梅叶总黄酮提取
量达到最大,之后随着料液比增大,柳叶腊梅叶总黄
酮提取量增加趋于平衡,同时,增大料液会增加溶剂
的消耗以及影响提取液的浓缩过程,为节约试剂考
虑,因此选择液料比 24(mL /g)为宜。
图 6 液料比对提取效果的影响
Fig.6 Influence of solution to material ratio on extraction effect
2.4.5 柳叶腊梅叶总黄酮提取条件的优化实验 结
果见表 2。
关于柳叶腊梅叶总黄酮的提取量二次回归拟合
方程:
提取量(mg /g)= 77.47 + 6.48A + 10.38B + 6.95C
+ 0.42D + 4.52AB + 2.52AC + 9.33A D - 0.65BC +
7.91BD + 4.55CD- 7.78A2 - 8.22B2 - 6.85C2 - 2.44D2
(其中,A为超声功率,B 为超声提取时间,C 为乙醇
浓度,D为液料比)。
由表 3 可以看出,模型的 p 值为 < 0.0001,而失
拟项的 p值为 0.3078,说明了柳叶腊梅叶总黄酮提取
的模型与实际情况拟合程度比较好,可以预测柳叶
腊梅叶总黄酮提取的条件。对柳叶腊梅叶总黄酮提
取进行分析,超声功率、超声提取时间、乙醇浓度、液
料比都是显著因素。
由方差分析结果可以看出,AB 的交互作用、AC
的交互作用、AD的交互作用、BC 的交互作用、BD 的
交互作用、CD的交互作用都显著,相应曲面图见图 7
至图 12。
根据柳叶腊梅叶总黄酮提取实验结果和回归方
程各项的方差分析,由响应面分析法优化出柳叶腊
梅叶总黄酮提取最佳工艺条件为超声功率 287.8 W,
超声提取时间 24.4 min,乙醇浓度 89.7%,液料比
26.6(g /mL)。并考虑到实际操作的便利性,确定超声
表 2 柳叶腊梅叶总黄酮提取实验设计及结果
Table 2 Test design and results of total flavonoids
from Chmonathus salicifolius S.Y.H leaves
实验号
超声功率
(W)
超声提取
时间
(min)
乙醇浓度
(%)
液料比
(mL /g)
提取量
(mg /g)
1 350 15 80 27 30.93
2 250 25 80 27 42.23
3 250 15 80 21 56.13
4 300 11.59 85 24 36.74
5 350 25 80 21 51.63
6 350 25 90 21 60.19
7 300 20 85 24 77.50
8 300 20 85 29.05 71.24
9 300 20 93.41 24 69.76
10 250 25 90 27 58.89
11 300 20 85 24 77.50
12 300 28.41 85 24 71.64
13 300 20 85 18.95 69.83
14 300 20 85 24 77.50
15 384.09 20 85 24 66.34
16 350 15 90 27 60.29
17 300 20 85 24 77.50
18 300 20 76.59 24 46.37
19 215.91 20 85 24 44.54
20 250 15 90 21 57.19
21 300 20 85 24 77.40
图 7 超声波功率与超声波提取时间交互作用
对提取量影响的响应面
Fig.7 Response surface of influence of extraction power
and extraction time interaction on extraction amount
功率 290 W,超声提取时间 24 min,乙醇浓度 90%,
液料比 27(g /mL)。在此条件下进行验证实验,三次
平行实验取平均值,柳叶腊梅叶总黄酮的提取量达
到 83.1 mg /g。
2.5 柳叶腊梅叶总黄酮体外抗氧化研究
2.5.1 柳叶腊梅叶总黄酮对 DPPH·的清除能力的测
定 DPPH·法操作简单,反应灵敏,目前已广泛应用
于多种天然产物或单一化合物的抗氧化能力评
价[16]。由图 13 可知,在实验浓度范围内,随着柳叶
腊梅叶总黄酮添加量的增加,DPPH·的清除率升高。
在浓度小于 1.4 mg /mL 时,柳叶腊梅叶总黄酮对
128
表 3 回归方程各项的方差分析
Table 3 The variance analysis of regression equation
方差来源 自由度 平方和 均方 F值 Prob > F 显著性
模型 14 4220.91 301.49 1.255E005 < 0.0001 极显著
A超声功率 1 237.62 237.62 98876.42 < 0.0001 极显著
B超声提取时间 1 609.01 609.01 2.534E005 < 0.0001 极显著
C乙醇浓度 1 660.52 660.52 2.749E005 < 0.0001 极显著
D液料比 1 0.99 0.99 413.64 < 0.0001 极显著
AB 1 67.68 67.68 28160.89 < 0.0001 极显著
AC 1 51.01 51.01 21223.77 < 0.0001 极显著
AD 1 288.20 288.20 1.199E005 < 0.0001 极显著
BC 1 3.38 3.38 1406.46 < 0.0001 极显著
BD 1 207.13 207.13 86190.09 < 0.0001 极显著
CD 1 165.62 165.62 68916.39 < 0.0001 极显著
A2 1 904.73 904.73 3.765E005 < 0.0001 极显著
B2 1 1010.43 1010.43 4.205E005 < 0.0001 极显著
C2 1 701.78 701.78 2.920E005 < 0.0001 极显著
D2 1 89.26 89.26 37141.46 < 0.0001 极显著
残差 6 0.014 2.403E -003
失拟项 2 6.419E -003 3.210E -003 1.60 0.3078 不显著
纯误差 4 8.000E -003 2.000E -003
总差 20 4220.92
注:“Prob > F”< 0.05,代表研究因素为显著因素。
图 8 超声波功率与乙醇浓度作用
对提取量影响的响应面
Fig.8 Response surface of influence of extraction power
and ethanol concentration interaction on extraction amount
图 9 超声波功率与液料比交互作用
对提取量影响的响应面
Fig.9 Response surface of influence of extraction power
and solution to material ratio interaction on extraction amount
DPPH·的清除率明显小于对照组 VC,然而当浓度大
于 1.4 mg /mL时,柳叶腊梅叶总黄酮对 DPPH·的清
图 10 超声波提取时间与乙醇浓度交互作用
对提取量影响的响应面
Fig.10 Response surface of influence of extraction time
and ethanol concentration interaction on extraction amount
图 11 超声波提取时间与液料比交互作用
对提取量影响的响应面
Fig.11 Response surface of influence of solution
to material ratio material ratio interaction on extraction amount
除率与相同浓度的 VC 溶液清除能力逐渐接近。因
129
图 12 乙醇浓度与液料比交互作用
对提取量影响的响应面
Fig.12 Response surface of influence of extraction time
and ethanol concentration and solution
to interaction on extraction amount
此,柳叶腊梅叶总黄酮(IC50 = 1.22 mg /mL)具有较好
的清除 DPPH·的能力。
图 13 柳叶腊梅叶总黄酮对 DPPH·的清除能力
Fig.13 Scavenging activity of total flavonoids
from Chmonathus salicifolius S.Y.H leaves to DPPH·
2.5.2 柳叶腊梅叶总黄酮对羟自由基(·OH)清除能
力的测定 ·OH 是目前已知的最活泼的自由基,也
图 14 柳叶腊梅叶总黄酮对羟自由基(·OH)清除能力
Fig.14 Scavenging activity of total flavonoids
from Chmonathus salicifolius S.Y.H leaves to·OH
是毒性最大的自由基[17]。由图14 可以看出,随着浓
度增大,柳叶腊梅叶总黄酮对·OH 的清除能力逐渐
增强。当浓度小于 1.2 mg /mL 时,柳叶腊梅叶总黄酮
清除·OH 的能力小于对照组 VC,当柳叶腊梅叶总
黄酮浓度在 1~1.4 mg /mL时,柳叶腊梅叶总黄酮清
除·OH的能力显著提高,之后清除·OH的能力总是
大于 VC。当柳叶腊梅叶总黄酮浓度为 2.6 mg /mL,
对·OH 的最大清除率可达91.3%。这说明柳叶腊
梅叶总黄酮(IC50 = 0.92 mg /mL)具有较强的清除
·OH的能力。
3 结论
提取柳叶腊梅叶总黄酮最佳酶种类为纤维素酶
和果胶酶复合添加,且按酶比例 3∶ 1添加。提取柳叶
腊梅叶总黄酮最佳工艺条件为超声功率 290 W,超声
提取时间 24 min,乙醇浓度 90%,液料比 27(g /mL)。
在此条件下进行验证实验,三次平行实验取平均值,
柳叶腊梅叶总黄酮的提取量达到 83.1 mg /g。在柳叶
腊梅叶黄酮提取过程中,各因素的交互作用对实验
结果有较大的影响。当操作条件发生改变时,应根
据因素间的交互作用适当调节其他因素,以保证有
较好的提取效果。
考察了柳叶腊梅叶总黄酮的抗氧化活性,比较
了柳叶腊梅叶总黄酮对 DPPH·和·OH自由基的清除
效果。结果表明,柳叶腊梅叶总黄酮具有良好的清除
自由基能力,柳叶腊梅叶总黄酮的清除效果为 IC50
(DPPH·)= 1.22 mg /mL,IC50(·OH)= 0.92 mg /mL,
因此,柳叶腊梅叶总黄酮具有较好的体外抗氧化活
性,说明柳叶腊梅叶总黄酮的抗氧化能力不仅受黄
酮的浓度的影响,而且还与自由基的种类有关。
参考文献
[1]胡长玉,唐欣昀 .野生柳叶蜡梅叶营养成分分析[J].黄山
学院学报,2007,9(3) :91-93.
[2]沐方芳,张军,王曼曼,等 .野生柳叶蜡梅茎挥发油化学成
分的 GC-MS分析[J].热带作物学报,2013,34(2) :382-385.
[3]周婧,钱超,宋莹莹,等 .野生柳叶蜡梅叶挥发油成分的
GC-MS分析及其抗氧化活性[J].华西药学杂志,2013,28
(3) :238-240.
[4] http:/ /www.nhfpc.gov.cn /sps /s7890 /201405 /367ce408981
e4807809e107417b3d361.shtml 关于批准壳寡糖等 6 种新食品
原料的公告(2014 年 第 6 号)中华人民共和国国家卫生和计
划生育委员会 2014-05-15
[5]温慧萍,费俭,纪佳娜 .畲药柳叶蜡梅止泻作用的初步探
讨[J].中华中医药学刊,2013,31(1) :182-183
[6]章瑶,华金渭,王秀艳,等 .柳叶蜡梅叶氯仿部位化学成分
的研究[J].中国中药杂志,2013,38(16) :2661-2664.
[7]宋燕华,吴惠玲,夏勇,等 .柳叶蜡梅对大鼠的亚慢性毒性
研究[J].浙江预防医学,2013,25(10) :8-12.
[8]潘心禾,史小娟,张新凤,等 .柳叶蜡梅化学成分及其抗氧
化活性研究[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(1) :99-102.
[9]陈亮,张润民,王玉全,等 .超声波辅助法提取柳叶蜡梅叶
总黄酮工艺的优化[J].江苏农业科学,2012,40(7) :258-259.
[10]刘小莉,周剑忠,单成俊,等 .柳叶蜡梅叶总黄酮的微波
提取及抗氧化活性研究[J].食品研究与开发,2011,32(3) :
44-47.
[11]李颖畅,孟宪军,李小红 .大孔树脂纯化柳叶蜡梅叶总黄
酮的工艺研究[J].食品与发酵工业,2008,34(1) :133-137.
[12]张鹏 .银杏叶黄酮的微波提取及其抗氧化性研究[J].安
徽农业科学,2009,37(12) :54965497,5730
[13]严静,陈锦屏 .复合酶酶解法提取青柿子落果中黄酮类
化合物的研究[J].食品工业科技,2011,32(6) :315~317,335.
[14]Shimada K,Fujikawa K,Yahara.Antioxidative properties of
(下转第 293 页)
293
图 3 偏最小二乘法模型预测值和实测值间的相关性
Fig.3 Correlation between predicted values of
alcohol content by FT-NIR and values by standard method
图 4 49 个验证集酒样酒精度近红外模型检测值
与酒精计法检测值的相对偏差分布图
Fig.4 Relative deviation of predicted values of
alcohol content by FT-NIR
3 结论
本文进行了保健酒调配样品生产过程中酒精度
的在线检测近红外模型的建立,对光谱进行一阶导
数处理和平滑处理,使用 PLS 通过 199 个实际数据
建立近红外模型,选择主因子数为 4,RMSEC 为
0.737,交互验证相关系数为 0.9189;RMSEP为 0.788,
交互验证相关系数为 0.9425。随机选择 49 个样品作
为验证集,验证集样品标准方法测量值和 NIR 预测
值的平均相对偏差为 1.32%,标准方法测量值和 NIR
计算值的相对偏差主要集中在 ± 2%之间,满足生产
过程中在线检测酒精度的要求。
参考文献
[1]彭帮柱,龙明华,岳田利,等 .用偏最小二乘法及傅立叶变
换近红外光谱快速检测白酒酒精度[J].农业工程学报,2007,
23(4) :233-237.
[2]樊双喜,钟其顶,李国辉,等 .近红外光谱法快速检测黄酒
的酒精度、总糖和总酸[J].中国酿造,2015,34(2) :135-138.
[3]王豪,邬蓓蕾,林振兴,等 .傅立叶变换近红外光谱法快速
测定葡萄酒中的酒精度[J].中国酿造,2008,34(7) :72-74.
[4]吴军,白琪林,苏胜宝,等 .近红外反射光谱法分析玉米秸
秆纤维素含量的研究[J]. 分析化学,2005,33 (10) :
1421-1423.
[5]阿力塔,徐秀廷,宋娟娟,等 .短波近红外光谱技术对葡萄
酒中总糖含量快速测定的研究[J].分析测试学报,2009,28
(2) :177-180.
[6]周莹,徐惠荣,应义斌 .近红外技术在自然纺织纤维品种
鉴别及成分预测上的应用[J].光谱学与光谱分析,2008,28
(12) :2804-2807.
[7]周扬,吕进,戴曙光,等 .基于贝叶斯决策的近红外光谱药
片分类方法[J].分析化学,2013,41(2) :293-296.
[8]王艳斌,胡于中,李文乐,等 .近红外原油快速评价技术预
测常减压蒸馏装置侧线收率[J].光谱学与光谱分析,2014
(10) :2612-2616.
[9]刘贤,韩鲁佳,杨增玲,等 .基于正交信号校正的秸秆青贮
饲料粗蛋白近红外分析模型传递方法[J].分析化学,2012,40
(4) :596-601.
[10]吴静珠,汪凤珠,王丽丽,等 .基于近红外特征光谱的番
茄苗氮含量快速测定方法研究[J].光谱学与光谱分析,2015
(1) :99-103.
[11]史月华,陆勇,徐光明,等 .主成分回归残差神经网络校
正算法用于近红外光谱快速测定汽油辛烷值[J].分析化学,
2001(1) :87-91.
[12]李代禧,吴智勇,徐端钧,等 .主成分回归残差神经网络
校正算法用于近红外光谱快速测定汽油辛烷值[J].分析化
学,2004,32(8) :1070-1073.
[13]严衍录 .近红外光谱分析基础与应用[M].北京:中国轻
工业出版社,2005:67-68.
[14]李倩倩,吴丽君,刘玮,等 .紫外光谱结合偏最小二乘法
测定手性药物对映体的组成[J].光谱学与光谱分析,2012,32
(2) :500-504.
[15]董海胜,张丽芬,钟悦,等 .拉曼光谱结合偏最小二乘法
测定血清胆固醇含量[J].光谱学与光谱分析,2013,32(5) :
1253-1256.
[16]阿力塔,徐秀廷,宋娟娟,等 .短波近红外光谱技术对葡
萄酒中总糖含量快速测定的研究[J].分析测试学报,2009,28
(2) :
檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾
177-180.
(上接第 129 页)
xanthin on autoxidation of soybean oil in cyclodextrin emulsion
[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,1992,40:
945-948.
[15]刘德胜,刘为忠,颜玲 .樱桃叶多糖的抗氧化活性研究
[J].中国生化药物杂志,2012,33(5) :571-574
[16]熊双丽,卢飞,史敏娟,等 .DPPH自由基清除活性评价方
法在抗氧化剂筛选中的研究进展[J].食品工业科技,2012,33
(8) :380-383.
[17]王国增,林娟,叶秀云,等 .“红茶菌”的抑菌作用及抗氧
化性[J].中国食品学报,2015,15(9) :173-179.