全 文 :濒危植物毛莫泽泻的组织培养
周 纯 田惠桥 (武 汉大学生物系 , 武汉 ` 30 72)
T IS u e C u l t u r e o f R a n a l诬S 们几 a r o s t r a t U 们八
Z H O U C h u n
,
T I A N H u i
一伽 a o (庚阿亡杯四心 oj 价诫恻 , w公口 . U丽粉威 , , w公切砚 4 3 0 0 7 2 )
l 植物名称 长咏毛蓖泽泻 (几劝以妇加 , 。 “ 六手
t“ ” 砚 )
。
2 材料类别 带芽的茎段 。
3 培养条件 ( 1) 生长培养基为 M S + B A Z
m g / (L 单位下同 ) + N A A 0 . 2 或 M S十 B A I十
N A A 0
.
2
。
( 2 ) 生根 培养基 为 l / ZM s + IB ^
0
.
1
。 每升培养基中均加 3%蔗糖 。 每日光照
I 4 h
, 光照度 1 5 0 0 l x 。 培养室温度 2 7℃ 。
4 生长与分化情况 将带腋芽的茎段接种
于 生长培 养基上培 养 15 d 时 , 腋芽开 始萌
动 。 培养 1 个月时 , 芽已长出 2~ 3 片叶 。 根据
生长情况 看 , 以 B A I 和 N A A 0 . 2 的培养基
效果较好 , 而在 B A Z 和 N A A 0 . 2 的培养基
上 , 芽的生长速度较慢 。 培养 45 d , 小芽 已长
至 1 . 5 c m 左右 , 有 4 片叶 。 这时将芽转移到
生根培养 基上 , 培养约 20 d 就长出根 , 再生
成完整植株 。 培养 40 d 时 ,将根 系生长较旺
盛的再生植株移栽到泥桶中 (水深 0 . 5 c m ) , 5
个再生植株都成活 。 如果该节茎段带有花芽
时 , 花芽仍可发育 , 2 个 月后 在试管中开 花 ,
但花药发育不正常 。
5 惫义与进展 毛莫泽泻属泽泻科 ,分布于
马来西亚和非洲 ,我国南方个别省份也有分
布 。 它是被子植物中发育较原始的类型 ,对研
究植物系统发育和进化有特殊价值 。 近年来 ,
由于生态环境的剧烈变化 ,这种植物濒临灭
绝 。 国内外均没有对毛茸泽泻进行组织培养
的报道 , 本试验可为保护这种濒危植物提供
一条新途径 。
收稿 1 9 9 3一 1 0一 1 5
秃叶黄皮树的快速繁殖
罗光明 (江西中医学院药学系 , 南昌 ” 3 0 0 0 “ ,
R a Pi d P r o Pa g a t i o n o f P he l lo de 牡 d r o牡 c 人诬牡 e牡 s诬5 v a r
.
g l a b r 诬u s e u l u饥
L U o G u a n s
一
M i
n g (级阿记杯曰吐 oj 月初即 . , , 沙蜘扣 坎劝毕 Of T入以迎如d c加嗯韶 卫诫妇涵 , 人俪盛脚 3 3 00 06 )
l 植物名称 秃叶黄皮树印胶以汕饥由洲 动翻翻一
批 v a r · 妙咖奴卿砒朋 ) 。 /
2 材料类别 幼嫩茎段 。 取其嫩枝 ,经 70 %
酒精 和 0 . 1%升汞表面消毒后 , 在无菌条件
下横切成长 0 . 5 c m 茎段作为外植体 。
3 培养条件 培养基分别为 : ( l) M s 十 B A
0
.
3 m g / L (单 位下同 ) + N A A 0 . 5 ; ( 2 ) M s +
B A 0
.
5 + N A A 0
.
5 ; ( 3 ) M S + B A 1
.
5 + N A A
0
.
5 ; ( 4 ) M S + B A 1
.
0+ N A A O
.
l ; ( 5 ) M S + B A
0
.
5 + N A A 1
.
0 ; ( 6 ) l / 2 M S + N A A 1
.
0 + IB A
1
.
0 ; ( 7 ) l / ZM S + N ^ A 1
.
0 + IB ^ 2
.
0 ; ( 8 )
l 2/ M s 十 N A A 1 . 0 。 培养基均附加蔗糖 3% ,
琼脂 0 . 7% , p H 5 . 8 。 培养温度 25 士 1℃ ,每日
光照 ( 2 0 0 0 lx ) 12 h 。
4 生长与分化情况
4
.
1 愈伤组织诱导 将外植体置于培养基
( 1 )
、
( 2) 中培养 , 3 d 后其茎段膨胀 , 培养基
( l) 中第 8一 1 0 d 茎段出现致密的愈伤组织 ,
收稿 一, 9 5一 1 1一 0 2
DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1994. 04. 013
培养基 ( 2 )中则 滞后 4 一 sd 形成愈伤组织 ,
而且 4 周后培养基 ( l) 中茎段成愈率 ( 92 % )
明显高于培养基 ( 2) 中茎段 ( 74 % ) 。
4
.
2 不定芽诱导 将所获愈伤组织转入培
养基 ( 3) 中培养 , 10 d 后 ,黄 白色的愈伤组织
逐渐分化出不定芽 ,但愈伤组织变褐 , 培养基
变黄 。 4 周后分化率为 62 % 。
4
.
3 不定芽增殖 将不定芽切割分植到培
养基 ( 4 ) 、 ( 5) 中 。 在培养基 ( 4) 中 , 不定芽基部
形成新的芽点 , 并成 为丛生芽 ; 在培养基 ( 5)
中 , 不定芽不形成新的芽点 ,但 4 周后苗的高
度大大超过前者 。
4
.
4 生根成苗 分离不定芽 , 植入培养基
( 6 )
、
( 7 )
、
( 8 )中 , 4 周后 , 以培养基 ( 7 )中试管
苗的不定根形成多且粗壮 , 生根也早 。 在培养
基 ( 8) 中不定芽生根时间长 (约 40 d) ,且试管
苗叶片发黄 , 移栽后成活率低 。 将已生根的试
管苗室内炼苗 5 ~ 6 d 后 , 移栽于洁净细砂苗
床中 ,保温保湿 ,成活率为 82 % 。
5 意义与进展 秃叶黄皮树属芸香科黄柏
属木本植物 , 是常用中药黄柏的资源植物的
主要来源之一 ,具有…清热燥湿的功效 ,临床运
用广泛 ,但因其自然繁殖速度较慢 ,致使药源
紧缺 。 通过组织培养手段快速繁殖试管苗 , 对
工厂化育苗提供了可能前景 。 秃叶黄皮树的
快速繁苗尚未见报道 。
“ 锦丰 ”梨花药培养获得小植株
杨振英 薛光荣 史永忠 (中国农业科学院果树研究所 ,辽宁兴城 1 2 5 1。 0)
T h e P la n t l e t S
Y A N G Z h e n
一
Y in g
,
I n d u e ed b y A n t h er C u lt u er of
“ J in eF n g
P ea r 玄牡 V 诬t r o
X u e G
anU
g
一
R o n s
,
s H I Y O n g
一
hZ
o明 (及次明六无加以流血 oj 为耐叨刀、 ` 脑“绝忿 浊双如叼 oj 月少公幽矛以
占曲 , 郎 , , X啊 c枷夕 乙如呱峋 1 2 5 1 00 )
l 植物名称 梨 (几尸绍 加以义肠堵汤助 O 。
2 材料类别 花药 。
3 培养条件 ( 1) 诱导胚状体培养基为 1 2/
M S + IA A 0
.
Zm g / L ( 单位下 同 ) + B A I ~ 2 ;
( 2 )分化培养基为 M S + G A : 0 . 1 + IB A 0 . 2 +
B A I ; ( 3) 诱导生根培养基为 12/ M s + IA A
1
.
5
。 培养温度 2 5一 3 0 oC ,光照度 2 0 0 0 l x 左
右 , 光照时间为 1 0 h d/ 左右 。
4 生长与分化情况
4
.
1 胚状体的诱导 梨花药接种在培养基
( 1) 上后 , 经过 1 2 0 d 左右的培养 , 有的花药
可在其裂 口 处产生乳 白色的胚状体 , 似苹果
花药胚状体 , 有双子 叶型 , 有的呈畸型子叶
型 ,有的花药可同时产生 2 个以上的胚状体 。
4
.
2 植株分化 将胚状体转入培养基 (2 )
上 ,很快由乳 白色转变为绿色 , 并不断地进行
组织增殖 。 每个月继代培养一次 ,分化培养
8 5 d 时有的胚状体已分化出幼小的植株 。 幼
小的植株在分化培养基上继代培养时 , 能不
断地增殖 。 但小植株不能伸长 ,叶片不扩展 。
经过对培养基的调整 , 在降低 B A 浓度和提
高 G A 3 浓度的培养基上 , 小植株逐渐伸长 , 叶
片逐渐扩展 ,形成正常小植株 。
4
.
3 诱导生根 切取 2 c m 长 、 叶片充分展
开的小植株 , 插入培养基 ( 3) 上 , 10 d 左右诱
导生根 , 14 d 根部明显伸长 ,植株生长正常 。
4
.
4 生根植株移栽 在生根培养基上培养
25 d左右 ,植株经过 自然散射光的锻炼 ,栽植
在盛有沙土的花盆中 , 经过一段时间的保湿 ,
小植株成活很好 。
5 惫义与进展 梨多数属 自花不孕 ,在遗传
学上为高度杂合体 , 给梨遗传理论研究和新
品种改良带来严重障碍 。 通过花药培养诱导
产 生单倍体 ,染色体加倍后可迅速获得纯系
材料 ,这对梨的遗传理论研究和改良品种都
有一定的现实意义 。 国 内外尚未见梨花药培
养再生植株的报道 。
收稿 1 9 9 3一 11一 0 2