全 文 ：第 7 卷 第 2期 沈 阳 药 学 院 学 报 v o l . 7 N o . 2 p . l o 4
1 9 9 0
. 连 总 4 3期 J O U R N A L O F S H E N Y A N G C O L L E G E O F P H A R M A C Y A p r . 1 9 9 0 S u m 4 3
月见草油乳剂的生理药物动力学模型探讨
杜建平 陈济民
药荆教研室
摘 要 本文考察了大鼠按 9二乙k/ g静注 2 号月见草油乳剂后 , 血浆 、 心 、 肝 、 脾 、 肺 、 肾 、
胃肠道 、 脑 、 肌肉中兮亚麻酸浓度变化 ; 大鼠静注一负荷剂量 4 . 5。 乙k/ 9 1 号月见草油乳剂后 , 再
以 4 . 5。 乙/ k g · h 静脉输注至稳态 , 测定竹亚麻酸组织 一血浆表观分配系数。 在此基础上 ,进一步设
计了一个血流限速生理药物动力学模型 , 在 BI M 微型计算机上用 M A X S I M 程序模拟 Y一亚麻酸在
大鼠体内的分布与清除 , 模型包括肝 、 ’肾、 胃肠道 、 肌肉和血浆 。 离心过滤法测得 竹亚麻酸血浆
中游离分数为。 . 透5 9。
关抽饲 丫`亚麻酸 ; 月见草油乳剂 , 体内分布 , 生理药物动力学模型 (简称生理模型 )
月见草 ( o e n o t h e r : b i e n n i o L . ) 是柳叶菜科多年生草本植物 〔 ” , 其种子含油 ( e v e n 纽 g
rP iln
r 。 。。 io1 ) 15 % 以上 , 研究表明该油中主要有效成分 Y一亚麻酸是前列腺素 E , 的前体 , 具
有抗血栓降血脂等多种作用 ` 2 ’ 。 我国东北月见草藏量丰富 , 国内关于月见草油及其主 要 有
效成分 Y一亚麻酸的研究 已开展几年 , 取得一些成果 ` “ 一 。 ’ , 但是 , 关于药物动力学方面的研
究尚未见报道 。 为了开发月见草油新剂型和新用途 , 并为临床应用提供有用信息 , 本文探讨
了月见草油乳剂中亡亚麻酸在大鼠体内的分布及生理模型 。
这种生理模型使生理实质与药物动力学模型结合起来了 , 进而研究有关脏器组织的真实
分布与变化 汇` “ ’ , 加探了药物体内过程的认识 , 通过改变生理参数 , 可以模拟药物在病理 、
药理状态下的体内过程 〔“ ’ , 用于研究和预侧病理 、 药理因素对药物体内过程的影响 。 生理
模型还可以将同一模型按比例放大应用于其他种属动物 t ` 2 ’ , 这对将动物实验资料外推于人
体具有重要意义 。
材料与方法
1
.
1 材料
仪 器 日本岛津 G C 一 g A 气相色谱仪 , 国产液体快速混合器 , 国产恒速输液泵 , 国产电
动匀浆机 ; 自制离心过滤分离蛋白装置 , 构造如图 l 所示 。
试剂 甲醇 、 乙醚 、 石油醚 (沸程 60 一 90 ℃ 下同 ) , 氢 氧 化钾 、 氯化钠 、 三氟化硼乙
醚液均为市售分析纯试剂。
药品 自制月见草油乳 剂 (详 见文献 4 , 6 ) , 1号 ( 8 . 2 7 2 m g 丫一 l i n o l e n ie a e id / m l ) ,
2 号 ( 5 7 。 5 4 m g y 一 l i n o l e n i e a e id /二 l ) 。
收稿日期 : x , s。 一。卜 1 2
DOI : 10. 14066 /j . cnki . cn21 -1349 /r . 1990. 02. 019
2 期 杜建平等 : 月见草油乳剂的生理药物动力学模型探讨
一 内装样管
一 丝线固定
一 半透膜
一 外接收管
图 1 离心蛋白分离装 t
动物 大鼠 , 体重 20 0~ 2 5 09 , 雌雄 各半 , 沈阳药学院动物
室提供 。
1
。
2 方法
1
.
2
.
1 丫一亚麻酸气相 色谱测 定方法
预处理 取适量脏器匀浆或血浆于带塞试管中 , 加入 l lm 乙
醚 , 振摇提取 1。 s m in 后 , 置低温冰箱 , 下层结冻 , 倒出上层乙醚
液于 10 川容量瓶中 , 共提取 3 次 , 用氮气流挥散乙醚 , 残渣加入
。 . s m ol / L氢氧化钾甲醇液 o . Zml , 于 5 ℃ 恒温水浴加热 20 m in 左右 , 使油珠消失 , 放冷 , 加
入三氟化硼乙醚液 o . l m l , 甲醇 o . s lm , 于沸水浴回流 3 m in , 用冰盐水迅速冷却 , 加入内标
石油醚溶液 1 m l , 振摇 , 加入饱和氯化钠水溶液至刻度 , 取上层石油醚液进样 。
色谱条件 固定相 20 % D E G S , 以氮气为截气 , 流速 50 m l/ m in , IF D 检测 , 柱温 1 75 ℃ ,
气化室温度 2 50 ℃ .
1
.
2
.
2 静脉注射后 大鼠体内分布
大鼠 15 只 3 组按 9 m Zk/ g静注 2 号月见草油乳剂后 , 5 m in 、 1 5 m in 和 h2 分组处死 , 取用
滤纸吸干血液的心 、 肝 、 脾 、 肺 、 肾 、 胃肠道 、 脑 、 肌肉湿组织各0 . 49 , 加入 2 m l蒸馏水制
成匀浆 , 立即预处理测定 Y’ 一亚麻酸含量 , 同时分别体静脉取血 , 离心取 1 m l血浆 , 预处理测
定Y 一亚麻酸含量 。
1
.
2
.
3 恒速静脉输注达稳态后 大鼠体 内分布及离心过滤法测 定游 离药物分数
大鼠 5 只以 4 . s m lt/ g静注 1 号月见草油乳剂后 , 再 以4 . sm lk/ g · h静脉恒速输注 3 h ( 预
实验证明血药浓度基本达 稳 态 ) , 处死大鼠 , 取用滤纸吸干血液的心 、 肝 、 脾 、 肺 、 肾 、 胃
肠道 、 脑 、 肌肉各 0 . 49 , 各加2 m l 蒸馏水制成匀浆 , 立即预处理测定 竹 亚麻酸含量 ; 体静
脉取血离心分离血浆 , 取 o . sm l 预处理测定 r 亚麻酸含量 , 其余血浆装入自制离心过滤分离
蛋 白装置 , 以 2 0 0 0 rP m加 in 离心 1 m in , 检查半透膜无破裂 , 装样管贴壁无 渗漏 , 装 样 管
内残 留 有 粘稠的蛋 白类物质 , 取接收管内透过半透膜 的液体 。 . l lm , 双缩尿法 等 检 验 无
蛋 白质存在 , 再精取 0 . 5 m l预处理测定 Y一亚麻酸含量 。 另外 , 经 检 验 半透 膜 不 吸附 竹亚
麻酸 。
1
.
2
.
4 生理模型的建立
iB sc ho f
【` “ ’ 曾详细讨论了生理模型房室的选择方法 , 根据药效学 、 药动学和药物的生
化特征以及机体解剖和生理学而定 。 通常把起药理或毒理效应的一些机体部位列入在内 , 另
外还必须涉及药物消除的器官 , 列入 的组织或体液要易于取样 , 而且组织内含有一定药量 。
本文根据 Y一亚麻酸的体内过程 、 药动学 、 生化和药理研究 〔“ ’ , 选定一个 5房室模型 (见图 2)
描述 Y 一亚麻酸大鼠体内过程 。 基于以下假设 :
几组织内输出的静脉血中与组织中的药物浓度是达成平衡的 ,
b
. 药物分布受血流速度限制 ;
c . 各房室内的药量分布是均匀的 ;
d
. 药物组织 一血浆表观分配系数与药物浓度无关 ;
只有游离药物才能被消除。
根据质量平衡原理对图 2 所示模型给出下列微分方程表达式 〔’ 摇 ’ ;
10 6 沈 阳 药 学 院 学 报 7卷
血浆
川 ~ 卜厂
肾
肌肉
血浆
胃肠道
肝
圈 2 丫 一亚麻胜血滚限邃药动学傲纽用度流程
肾
肌肉
角注 P,
V ,
·
d c
,
/ d t
二 Q , · C l / R , + Q
: . C 。 / R
:
+ Q
、 . C 、 / R 、 + Q
o . C m / R
。
一 ( Q ; + Q : + Q k + Q。 ) . C ,
+ M
·
g ( t )
v :
·
d c
`
/ d t
=
Q
: .
c
, 一 Q : · c : / R :
V
, ·
dC , / d t = Q
; . C , 一 Q , . C : / R ,
一 f · C L : · C , / R ,
v 、 · dC 、 / d t = Q、
·
C
p 一 Q、 · c k / R 、
v 。 · dC二 d/ t 二 Q二
.
C , 一 Q二 . C 。 / R 二
g , 1
,
k
,
m 分别代表血浆 , 胃肠道 , 肝 , 肾和
肌肉 , C L : 为肝清除率 ( m l/ m i )n , M 为给药量 伽 g ) ; g ( )t 为给药输入函数 “ ” ’ , 它把静
脉往射过程模拟为一个短时间的脉冲过程 , 以便于数学处理 ,
g ( t ) = 3 0 (入t ) “ ( 1一 入t ) “
乳 为静脉往射所用时间的倒数 。 丫一亚麻酸体内消除主要是代谢 ` 2 ’ , 即全身清除率近似等于
肝清除率 。
将各类数据 (表 1 )代入微分方程 , 在BI M微型计算机上用M A x sI M程序绘出 C 一 t 曲线 。
表 l y 一亚麻酸在大吸体内分布的生理常数
组 织 容 积 ( m l ) 1 ) 血浆流速 (水不加 in ) t ) R 不2 ) 清 除 率 (机忿加 in )
1
.
3 8
9
。
4 1
1
。
3 2
1
。
4 2
2
.
9 4 7
内舀snù0.…65ta性d
n曰`9…八UO甘,火8古.1八UJ工宙胜孟
” 基于体重为 2 0 09 的大鼠 t艺引 , 2 ) 各组织 中药物分配 系数
2 结果与讨论
o三,一二喇军\侧说
血桨 肝 牌 心 肺
口 s m j。 , 皿 15 m , n
肾 胃肠道 肌 肉
,
. Z h
图 3 静脉注射月见草油乳荆后 Y一亚麻破在大爪体内的分布
a 。 静脉注射月见草油乳剂后竹亚麻酸
组织分布见表 2和图 3 . 由此可见给药后 s m in
血 、 肝 分 布 量 较大 , 除肝脏外 , 其它各组
织随时间下降较快 , 这与文献 2 报道的 r 亚
麻酸代谢过程是一致的 。
b
. 静脉恒速输注给予大鼠月见草油乳
剂使Y 一亚麻酸血药浓度达稳态时 , 各组织的
平均浓度及组织 一血浆表观系数 R :见表 3 。
组织表观分配系数 R , 是一个很重要的药动
学参数 , 它反映了稳态时该组织对药物的摄取能力。
离心过滤法测得竹亚麻酸在血浆中的游离分数为 0 . 45 9土。 . 07 ( n = 5) .
d
. 大鼠静往月见草油乳剂 , 丫一亚麻酸生理模型计算机模拟结果 (C 一 t cu yr “ , M 二 2 0 0 0
林g ) 见图 4 .
2期 杜建平等 : 月见草油乳剂的生理药物动力学模型探讨 1 0 7
衷 2 大限静注月见草油乳荆后单位荆 , 丫一亚麻酸在各组织中的分布 ( m l一 : ) x 10 3
毛 组 织
. . 曰 . . . . . . . . . . . . . . . . .
. _
~ 时 间
s m in sm i
皿 2 il
2
.
5 8 0
.
77 0
.
0 4
2的舀炸白43ù匕嘴孟nù nó 0
. .…0n03Zt畜5824561了.440口l付`比O.…九舀.且.二o0nù,孟-53864747320.…32015
脑浆道肉
心肝脾肺肾肠
胃大肌血
大限各组织的y 一亚麻咬艳态浓度 印 g / g) 及分配系教 ( R , )
组 织
表 3
心 肝 肺 肾 脑 肌肉 血浆
浓 度
标 准 差
R i
8
。
8 5 7
2
。
3 1
0
。
0 44
1 8 8 6
。
7
1 9
。
8
9
。
4 1
6 5 0
。
6
1 0
。
6
3
。
2 5
2 6 5
6
1优
2 8
。
0 9
5
。
2 0
0
。
1 4 0
2 8 4
3
1
。
4 7
。
4 2
胃肠道
2 7 6
。
1
7
。
2 9
1
。
3 8
2 0 0
。
4
6
.
68
6 O
切 血浆 肝ǎ一。咨3侧任
3 6
ǎ一戈呈à
24
侧妊
甘2
0 5 1
,
0 1
.
5 2刀
时间 t h )
6 0 6 0
0 5 1
·
0 1
·
5 2刀
时间 ( h )
` O ,
肾 ` 8 胃肠道 右 8 肌肉
3 6
ǎ一E诊3
3 6
ǎ一E洛砚à
补侧班 2 `
切肠加二戈。3锐侧
1 2 12 1 2
0石 1 . 0 1. 5 2 0
时间 ( h )
0
.
5 1
.
0 1
.
5 2
,
O
时间 ( h )
。 5 1心
时间 ( h )
,
.
5 2
,
O
圈 4 大限静注月见草油乳荆后价亚麻吸生理挑童计算机摸拟结果
图中 ( 。 ) 为实测值通过剂量换算的点与模拟结果比较 接 近 ( 见表 4 ) , 说明 r 亚麻酸在大
鼠体内分布和消除用生理模型描述是可行的 , 关于在病理 、 药理情况下该模型的模拟结果 以
及能否放大至人体还有待于进一步研究。
1 0 8 沈 阳 药 学 院 学 报 7卷
裹 4 实浦位 (拼g /m l) 与棋拟位比较
组 织 时 间 实 测 值 模 拟 值 季
血 浆
s m i n
1 5功 i n
2 h
10
。
1 4
3
。
3 0
0
。
0 8
4
.
8 6
3 2 4
0
.
0 7
肝
5血 i n
1 sm in
2 h
6
。
8 2
7
。
2 6
0
.
2 4
:: :
3 9 2
41勺5nJgC.` .sn`n
肾
s m i n
1 sm i n
2 h
5
。
4 6
0
。
9 0
0
。
0 4
胃 肠 道
s m谊
1 s m i n
2 h
4
。
7 6
O
。
7 6
0
。
0 8
9
。
4 8
3
.
0之
0
。
8 4
肌 肉
s m i n
1 sm i红
2 h
2
.
0 8
1
。
4 8
0
。
10
1
.
3 5
1
.
8 9
0
。
0 9
参 考 文 献
R il ey JP
,
J hC em S oc
, 19` 9 , 2了2 5
H . s日a口 A G . T h e R Ol e of F a t s i n H u m a n aN t u r e , 5 5~ 20 0 , P u b l访h e d b了 V CH V e r la罗 e l lo c h a f t a 公 d
E l l论 H o r w o d , z日5 5
高难琴等 。 中草药 , 10 5 2 , 2 3 (。 ) : 1
姚崇舜等 。 中草药 , 2 05 7 , 1 5 ( 12 ) : 1 1
高难琴等 . 沈阳药学院学报 , 1 9 8 5 , 2 (2 ) : 125
孙淑英等 。 沈阳药学院学报 , 1 9 8 7 , 4 (4 ) : 2 4。
宋宏锐等 . 沈阳药学院学报 , 1 0 8 8 ; 5( 丈) : 64
肖蔑等 。 中草药 , 10 5。 , 17 ( 。 ) : 26
陈光文等 。 沈阳药学院学报 , J 9 8句 3 (1 ) : 47
G以 l呼sk i L E , e t a l . J P h a恤 S e i , 1 05 5 , 7 2 : 1 1 0 3
eB
n o , it
z N
, e t a l
.
C l i
n
P五ar 坦 a e ol T h e r , z。 了4 , 1 6 : 9。
D e dr ic k R L
.
J Rh吕 r口鱿透 i o e t i。 B io p五a r m , z。了3 , 1 : 4 3 5
B ie h
o
f f K B
.
C的 e er C h恤 ot 五e r R e P , 1 9 7 5 , 5。 : 7了了
G ib色i d i M , e t a ! . hP a r m a e ok in e t ics
, 1 , 5 2 , 3 55~ 35 4
,
IN C P r哪
L
a n b or os T
, e t a l
.
J P h盯m S e i , 1 9 77 ; 6 6 ( 20 ) : 1 15 4
( T 转 1 5 6页 )
劝U左
口勺6
80甘
02已口孟惬5口.孟叹应曰透司占J,
15 6 沈 阳 药 学 院 学 报 7 卷
所以人工牛黄的配方中 , 加入一定量的卵磷脂也是必要的 。
5 第二代人工牛黄初步设想的组方
依据前面所述 , 以天然牛黄固有的组成成分为依据 , 我们初步提出第二代人工牛黄的组
方设计 , 去氧胆酸 , 胆酸 , 胆留酸 (主要是结合型 ) , 胆红素钙或其结合型 , 脂肪酸, 卵磷
脂 , 胆固醇 , 无机盐类 , 牛黄酸等成分组成 。 选用适当的基质 (其中应含有肤 , 氨基酸类 ) 。
这样的组方设计基本趋于合理 , 是接近或相当于天然牛黄 。
致 谢 本文承于润海 、 郭允珍教授 , 袁文学研究员审阅和李良铸所长提供部分资料。
参 考 文 献
张能荣。 中成药研究 , 1 9 7如 儿 43
李时珍 。 《 本草纲目 》 , 人民卫生出版社 , 19 7 5 , 5 0t . 1 754
西村正 也。 东医事新志 , 10 3补 6 5 1 7
伊路衍二。 日本药学杂志 , 1 9 03 , (第 2 5 5号 ) : 6 10
木村正康 。 日本药学杂志 , 1 , 6 6 , 8。 : 36 6
木村正康 。 H本药学杂志 , 1 9 6 6 , 习 6 : 8 77
木村正康。 日本药学杂志 , 1 , 6 7 , 8 7 : 5 50
张能荣 。 全国工业生化学术论文 , 19 8 3 , 邹
张能荣。 《 生化药物学术和技术开发讨论会 》 论文 1 9 8补
(上接 108页 )
A S T U D Y O N P HY S IO L O G IC A L P HA RMAC O K IN E T I C S O F 丫一 L IN O L E N IC
A C ! D ! N E V E N! N G P R! M R O S E O! L E M U L S! O N ! N R A T S
D u J i a n P i n g C h e n J im i n
D即 a r t邢 e玲 t o f B i o P九a r邢 a e e u t玄e s
A f t e r i v
.
i n j e e ti o n o f e v e n i n g p r im r o , e 0 11 e m u lo i o n i n r a ts
,
th e e o n e e n t r a t i o n s
o f y 一 l i n o l e n i e a e id i n h e a r t
,
l i v e r
,
k id n e y s
,
b r a i n
,
m侧 e l e , s p l e e n , l u n g , G l t r a e t
a n d p l a s m a w e r e r e e o r d e d
。
T h e t i s s u e
一 t o 一 P l a s m a w a s o b t
a i n e d i n a s t e a d y s t a t e a f t e r
i v
.
i n f u s i o n o f e v e n i n g r i im r o g e 0 11 e m u l s i o n
.
T h e u n b o u n d afr
e t i o n o f y 一 l i n o l e n i c
a e id i n p l a忿m a aw s d
e t e r m i n e d b y ht e m e ht o d o f e助 t r i f u g a l 力l atr t i o 力 . B韶 e d o n th e
a b o v e r e g u l t
, a p l a s m a f l o w r a t e
一
l i m i t e d p h y : i o l o g i e a l p h
a rm a e o k i n e t i e m o d e l w a昌
d e v e l o p e d t o d e , e r i b e th e d i s t r ib u t i
o n a n d e l im i n a ti o n o f 下一 li n o l e n i e a e i d i n t h e Ii v e r ,
m u s e l e
,
G l t r a e t
,
k i d n e y s a n d p l
a s m a o f r a t弓。
K e y w o r d s y
一
l i n o l e n i e a e i d ; E v e n i n g p r im r o s e 0 11
e m u l s i o n ; D i s t r ib u ti o n
P h y , i o l o g i e a l Ph a rm a e o k i n e ti e m o d e l