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有关物质测定方法进行测定 , 记录色谱图。以峰面积 (A)
对浓度 (C) 得线性回归方程分别为萘普生:A=100 871 C
- 829. 9 (r =0. 999 91 , n=5);6-甲氧基-2-萘乙酮:A=
9 553. 6 C - 151. 6 (r=0. 999 7 , n=5)。结果 , 萘普生与 6-
甲氧基-2-萘乙酮 、 1. 024 ～ 9. 216 0 μg m L - 1分别在 0. 302
4～ 0. 705 6μg mL - 1峰面积与浓度呈现良好的线性关系。
2. 7　精密度试验
分别取线性范围测定的第 3 点溶液 , 连续进样 6 次 , 计
算 RSD , 萘普生为 0. 36%, 6-甲氧基-2-萘乙酮为 0. 59%,
表明进样精密度良好。
2. 8　稳定性考察
取样品适量 , 照 “ 2. 1. 2项下的供试液配制” 方法 , 制
成约含萘普生 0. 5 mg mL - 1的溶液 , 分别于 0 、 1 、 2、 4 、
8 h 测定其有关物质 , 记录色谱图 , 结果本品供试品溶液在
8 h 内稳定性良好 , 能满足有关物质检测的时间要求。
2. 9　有关物质测定方法及结果
取对照溶液 20μL 注入液相色谱仪 , 调节检测灵敏度 ,
使萘普生主成分色谱峰的峰高约为满量程的 20%。再取对
照溶液和供试品溶液各 20 μL , 分别注入高效液相色谱仪 ,
记录色谱图至萘普生主成分峰保留时间的 3 倍。供试品溶液
色谱图中 6-甲氧基-2-萘乙酮峰面积不得大于对照溶液色谱
图中 6-甲氧基-2-萘乙酮峰面积 (0. 1%), 最大杂质 (除 6-
甲氧基-2-萘乙酮外) 峰面积不得大于对照溶液的 6-甲氧基-
2-萘乙酮峰面积的 1倍 (0. 2%), 各杂质峰面积之和不得大
于对照溶液中萘普生峰面积 (1%)。供试品的色谱图见
图 8。
图 8　供试品 HPLC 图
2. 10　样品测定
分别对 3 批样品进行测定 , 结果见表 1。
表 1　复方萘普生栓有关物质测定结果
样品批号 有关物质 (%)
20030902 0. 35
20031101 0. 26
20040103 0. 42
　　由表 1 结果可见 , 3批样品的有关物质检测结果均符合
要求。
3　讨论
复方萘普生栓的杂质主要来源于萘普生和己烯雌酚 , 萘
普生 400 mg 和己烯雌酚 4 mg , 因己烯雌酚的含量只有萘普
生的 1%, 并且在 240 nm 处的紫外吸收弱于萘普生 , 说明
选择不同的对照品测定制剂中有关物质的含量将得出不同的
结果 。假如选择萘普生为对照 , 有关物质的实际量会高于测
得量;相反 , 如果选择己烯雌酚为对照 , 则有关物质的实际
量会低于测得量。为了更有效地控制产品质量 , 我们以控制
萘普生的有关物质为主 , 用已知杂质法测定萘普生中的 6-甲
氧基-2-萘乙酮 , 用萘普生自身对照法测定其他有关物质。
本试验中选择萘普生为自身对照 , 尽管并不能反映出产品中
杂质的真实含量 , 但在质量控制中 、 评价产品质量及工艺稳
定性 、 产品的稳定性等方面有重要的意义。
本研究建立了复方萘普生有关物质的测定方法 , 并对样
品中有关物质进行了限度检查 , 参考中国药典二部 2000 年
版中的指标均符合要求 , 取得了较为理想的结果。
参考文献
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[ 3] 中国药典 2000年版. 二部[ S] . 2000. 附录ⅣA
薄层扫描法测定华山参中总东莨菪内酯的含量
王勇1 , 庆伟霞1 , 李松武1 , 2 , 李明静1 , 刘绣华1* (1. 河南大学化学化工学院 , 开封　475001;2. 河南省食品药品
监督管理局 , 郑州　450002)
摘要:目的　建立薄层扫描法对华山参中总东莨菪内酯的含量测定方法。方法　采用高效硅胶 G 薄层色谱板 , 以
氯仿-甲醇 (15∶1) 为展开剂 , 采用单波长荧光线性扫描法 , 选择 “ K400” 为滤光片 , 激发波长 340 nm 测定。结
果　东莨菪内酯在 0. 06～ 0. 3 μg 线性关系良好 , 样品回收率 104. 40%。 结论　该方法快速简捷 , 精密度高 , 重现
性好 , 可用于华山参中总东莨菪内酯含量的测定。
关键词:薄层扫描法;华山参;东莨菪内酯
中图分类号:R927. 2　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672 2981 (2005) 05 0274 03
作者简介:王勇 (1979 ～ 　), 男 , 研究生 , 主要从事分析化学工作　　T el:13781158761　　E-mail:w yw an g 228@
163. com　　*通讯作者:刘绣华 (1966～ 　), 女 , 教授　　T el:(0378) 2192451　　E-mai l:xiuhu al@371. net
Cen t ral South Pharmacy. October 2005 , Vol. 3 No. 5　中南药学 2005年 10月第 3卷第 5期
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Determination of scopoletin in Physochlaine inf undibularis Kuang by TLCS
Wang Yong 1 , Qing Wei-xia1 , Li Song-w u1 , 2 , Li M ing-jing 1 , Liu Xiu-hua1* (1. College of Chemistry and
Chemica l Engineering , Henan University , Kai f eng　475001;2. Henan Food and Drug Administration ,
Zhengzhou　450002)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To establish a method to de termine the contents of scopoletin in Physochlaine in f undibu-
laris Kuang by TLCS. METHODS　Sing le-w aveleng th TLC scanning was used w ith chlo rof rom-methanol (15∶1) a s
developer. The plate w as scanned at 340 nm in the f luore scence linear scan mode. RESULTS　The linea rity wa s good
within the range 0. 06 ～ 0. 3μg (r=0. 999 7) . The average recovery w as 104. 40%. CONCLUSIONS　The method is
simple , rapid , sensitiv e and highly r epr oducible fo r detecting scopoletin in Physochlaine in f und ibularis Kuang.
KEY WORDS:T LCS;P hysochlaine inf undibularis Kuang;scopole tin
　　华山参 (Physochlaine inf undibularis Kuang) 系茄科
(So lanaceae) 泡囊草属植物 , 学名漏斗泡囊草 , 又名华山人
参 、 秦参 , 因主产于西岳华山而得名。河南 、 山西也有大量
分布。本品具有滋补强壮 、 平喘止咳 、 补虚温中 、 安神镇
静 、 除风寒 、 健脾胃等功效。用于神经衰弱 、 精神分裂 、 胃
腹疼痛 、 失眠头痛 、 咳喘多汗和防治慢性气管炎等症[ 1～ 2] 。
20 世纪 70年代末 , 中药厂家已将其加工成华山参片 、 华山
参气雾剂等[3 ～ 4] 。华山参药材中含有东莨菪内酯 ( scopo le-
tin) 及其樱草糖苷[ 5] , 东莨菪内酯具有祛风 、 抗炎 、 止痛 、
抗真菌 、 抗肿瘤作用[ 6] , 是华山参的主要药理活性成分之
一 , 因此笔者认为应以东莨菪内酯含量为标准 , 文献[ 7]采用
紫外分光光度法测定东莨菪内酯的总含量 , 但紫外分光光度
法选择性不强 , 干扰严重。为此 , 我们研究了华山参药材中
东莨菪内酯的提取方法及其 TLCS 测定方法 , 为华山参质量
标准研究提供参考。
1　仪器与试药
CAM AG Scanner3 薄层扫描仪(瑞士);CAMAG LINO-
M AT5半自动点样仪(瑞士);970CRT 荧光分光光度计;硅胶
G高效薄层板(青岛海洋化工厂);分析天平(北京赛多利斯天
平有限公司)。甲醇为色谱纯 , 其他试剂均为分析纯;东莨菪
内酯对照品(中国药品生物制品检定所);华山参(Physoch-
laina in f undibularis Kuang)样品由河南天方药业集团提供。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件
氯仿-甲醇 (15∶1) 上行展开 , 在 CAMAG Scanne r3上
采用单波长荧光线性扫描 , 选择 “ K400” 滤光片 , 激发波
长为 340 nm;狭缝 4 mm×0. 2 mm;扫描速度 100 nm s- 1 。
2. 2　样品溶液的制备
取干燥样品粉末 (3 份) 约 1. 0 g , 精密称定 , 置 250
mL 圆底烧瓶中 , 加入含 0. 1 mol L - 1盐酸的80%乙醇溶液
80 mL , 提取 2次 , 1 次 2 h (90 ℃水浴)。过滤 , 滤液减压
浓缩至 20 m L加入 40 mL 氯仿提取 2次 , 每次 1 h (90 ℃水
浴)。冷却 , 分液 , 合并氯仿相。然后在 80 ℃下将氯仿蒸
干 , 残渣用甲醇溶解并定容至 10 mL , 摇匀。用 0. 22 μm 微
孔滤膜滤过 , 滤液作为供试品溶液 , 待测。
2. 3　对照品溶液的制备
精密称取东莨菪内酯对照品适量 , 加甲醇制成 0. 12
mg m L - 1的溶液 , 即得。
2. 4　波长的选择
在 970CRT 荧光分光光度计上分别记录浓度为 0. 12
mg m L - 1的东莨菪内酯对照品在 200 ～ 800 nm 波长范围内
的发射光谱和激发光谱 (见图 1～ 图 2)。
图 1　东莨菪内酯对照品发射光谱
图 2　东莨菪内酯对照品激发光谱
由图 1～ 图 2可知 , 东莨菪内酯的最大激发波长为 340
nm , 最大发射波长为 428 nm。为此 , 选择 “ K400” 滤光
片 , 激发波长 340 nm 进行测定较为适宜。
2. 5　标准曲线的考察
用半自动进样仪分别吸取东莨菪内酯对照品溶液 0. 5 、
1. 0 、 1. 5、 2. 0 、 2. 5 μL , 点于同一块硅胶 G 高效薄层板上 ,
展开 , 扫描 , 以东莨菪内酯峰面积 (Y) 为纵坐标 , 进样量
(X)为横坐标 ,绘制标准曲线 , 回归方程为 Y =6. 716×103 X
+2. 649×103 , r=0. 999 7;在 0. 06 ～ 0. 3 μg 线性关系良好。
2. 6　回收率试验
取样品粉末约 1. 0 g , 精密称定 , 共 9 份 , 在 1 ～ 3 份样
品中加入对照品溶液 1 m L;4 ～ 6 份样品中加入对照品溶液
2 mL;7 ～ 9 份样品中加入对照品溶液 3 mL , 按照样品溶液
制备方法提取后在 T LCS 色谱条件下测定 , 结果见表 1。
中南药学 2005年 10月第 3卷第 5期　Cen t ral South Pharmacy. Octob er 2005 , Vol. 3 No. 5
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表 1　回收率测定结果 (%, n=9)
样品编号 样品量 (g) 对照品量 (mL) 测得量 (mg) 回收率 (%) 平均回收率 (%) RSD (%)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1. 0002
1. 0010
1. 0008
1. 0030
1. 0042
1. 0045
1. 0042
1. 0033
1. 0028
1
1
1
2
2
2
3
3
3
1. 230
1. 287
1. 315
1. 527
1. 475
1. 422
1. 365
1. 521
1. 480
97. 7
102. 1
104. 4
110. 6
106. 5
102. 7
98. 6
110. 0
107. 0
104. 4 4. 14
2. 7　稳定性试验
取样品溶液 , 于冰箱 (4 ℃) 避光放置 , 在 T LCS 色谱
条件下于 0、 10 、 20 、 30、 40 、 50 、 60 min 分别进样。结
果 , 样品在 60 min 内稳定 , 测得峰面积相对标准偏差 RSD
为 2. 06%。
2. 8　重复性试验
精密称取同一样品 4 份 , 按样品溶液制备方法操作 , 依
法测定。 TLCS 法含量的 RSD为 3. 54%。
2. 9　精密度试验
取东莨菪内酯对照品适量 , 精密称定 , 用甲醇稀释制成
100μg mL - 1的溶液 , 重复进样 5次 , 5 次峰面积相对标准
偏差 RSD为 1. 36%。
2. 10　样品测定
在选定的 TLCS 色谱条件下 , 测定华山参中总东莨菪内
酯的含量 (质量百分含量), 结果见表 2。
表 2　华山参中总东莨菪内酯的含量 (%)
编号 含量 平均含量 相对标准偏差
1 0. 115
2 0. 115 0. 114 1. 01
3 0. 113
3　结论
东莨菪内酯具有内酯的通性。在碱溶液中加热水解 , 内
酯环破裂生成能溶于水的顺式邻羟基桂皮酸盐。如果在碱水
溶液中加热时间过长 , 可使顺式邻羟基桂皮酸异构化。本实
验直接用 0. 1 mol L - 1盐酸的 80%乙醇溶液来提取 , 不仅
可一步得到东莨菪内酯的乙醇溶液而且又有利于保持东莨菪
内酯结构的稳定 , 使待测物提取完全。
东莨菪内酯具有祛风 、 抗炎 、 止痛 、 抗肿瘤 、 抗真菌的
作用 , 是华山参的主要药理活性成分之一。本实验所建立的
TLCS 测定华山参中总东莨菪内酯含量的方法准确 、 简捷 、
精密度高 、 重现性好 , 为华山参质量标准研究提供了可靠的
依据。
关于东 莨 菪 内 酯 的 测定 方 法 , 文 献 报 道 的有
H PLC[ 8～ 11] 、 薄层扫描法 (T LCS )[12] 、 紫外分光光度法等。
本文建立了华山参药材中总东莨菪内酯的提取方法及其含量
测定的 TLCS。与 HPLC 相比 , T LCS 具有操作简便 , 分析
速度快 , 溶剂消耗少等优点[ 13] , 并且可同时测定多个样品 ,
成本低廉 , 虽不及 H PLC 的准确度和灵敏度 , 但很适用于
大批量中草药化学成分的快速分析。
参考文献
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