全 文 ：薄层扫描法测定蒙药查干-汤中土木香内酯的含量
内蒙古医学院药学院(010059)　王焕云
内蒙古中心血站(010020)　　　张　伟
摘　要:本文以硅胶 G为吸附剂 , 石油醚-苯-乙酸乙酯(15:2:1)为展开剂 , 采用双波长扫描法测定查干-汤中土木香内酯的
含量 ,测定波长 600nm ,参比波长 420nm , 平均回收率 101.5%, RSD=0.90%(n=5)。
关键词:薄层扫描法;查干-汤;土木香内酯
中图分类号:R291.2　　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2005)04-0033-02
　　查干-汤又称玛努-4 汤 , 是由土木香 、苦参 、珍珠杆 、山
柰等 4味药材组成的汤剂 , 蒙医临床较常用 ,主要用于治疗瘟
病初期 、发冷发热 、头痛咳嗽 、咽喉肿痛 、胸胁作痛。其中土木
香中土木香内酯的含量测定文献报道用气相色谱法〔1〕 , 本文
采用薄层扫描法测定其含量 ,方法简便 , 结果准确。
1　仪器及试剂
1.1　仪器:日本岛津 CS-930 薄层扫描仪;PBQ-Ⅰ型薄层自
动铺板器(重庆南岸实验电器厂);定量毛细管(美国 Drmmond
公司)。
1.2　试剂:硅胶G(青岛海洋化工厂), 土木香内酯(中国药品
生物制品检定所);蒙药查干-汤均为市售品;所用其他试剂
均为分析纯。
2　方法及结果
2.1　条件选择
2.1.1　层析条件:薄层板为 0.5%羧甲基纤维素钠溶液作为
黏合剂的硅胶 G 板 ,厚度为 0.5mm 湿法铺板 , 晾干 , 105°活化
1 小时;展开剂为石油醚(60 ～ 90℃)-苯-乙酸乙酯(15:2:
1);显色剂为 10%硫酸乙醇溶液 , 显色温度 105℃。
2.1.2　扫描条件:双波长反射法锯齿扫描 ,λs=600nm , λR=
420nm ,灵敏度中等 , 背景校正 ON , SX=3 , 狭缝宽度 1.2mm×
1.2mm。
2.2　样品溶液的制备
2.2.1　供试品溶液的制备:取不同来源的查干-汤约 2.7g ,
精密称定 ,以氯仿冷浸 16 小时 ,过滤 , 定容至 10ml即得。
2.2.2　对照品溶液的制备:取土木香内酯约 0.5mg , 精密称
定 ,以氯仿为溶剂 , 定容至 1ml , 摇匀即得。
2.2.3　阴性对照溶液的制备:按处方比例取苦参 、珍珠杆 、山
柰粉一定量 ,精密称量 , 按“供试品溶液的制备”项下操作 , 制
成阴性对照液。
2.3　定性鉴别:分别取供试品溶液 、对照品溶液及阴性对照
溶液点于同一薄层板上 ,展开 , 晾干 ,显色 , 结果见图 1。
2.4　标准曲线的绘制:用定量毛细管分别吸取对照品溶液
1.0 , 2.0 , 3.0 , 5.0 , 6.0μl点于同一薄层板上 ,按上述条件展开 ,
显色 ,扫描 , 记录斑点峰面积积分值 , 结果点样量在 0.54～ 3.
24μg范围内呈现良好线形关系 , 回归方程为 Y=0.02445+3.
468×10-5X , r=0.99927。见表 1。
表 1　标准曲线
对照浓度(μg/ml) 面积(A)
0.54 14735.13
1.08 30957.36
1.62 45048.03
2.70 78946.3
3.24 91468.3
图 1　
1.土木香内酯　2.阴性对照液　3.供试品液
2.5　精密度试验:在同一块薄层板上点 2μl对照品溶液 5 个
点 , 按上述条件展开 ,显色 , 扫描 , RSD为 2.30%。
2.6　稳定性试验:选取“精密度试验”项下薄层板上其中一
点 , 每隔 0.5 小时扫描 1次 , 在 5小时内斑点面积积分值基本
不变 , 表明在 5小时内稳定 。
2.7　含量测定:精密吸取供试品溶液 4μl及对照品溶液 2μl、
3μl于同一薄层板上 ,展开 , 显色 , 扫描 , 记录面积积分值。采
用外标两点法计算含量 ,结果见表 2。
表 2　查干-汤中土木香内酯的含量测定(n=5)
查干-汤 成　分 含量% RSD%
1内蒙古中蒙医院制剂中心 土木香内酯 0.6065 1.33
2 内蒙古医学院中蒙医学院门诊药房 土木香内酯 0.8341 1.04
3乌兰浩特中蒙制药有限公司 土木香内酯 0.3235 1.82
2.8　加样回收率试验:取已知含量的查干-汤约 0.17g , 5
份 , 精密称定 ,分别加入对照品各约 1mg , 按“供试品溶液的制
备”项下操作 ,取此溶液 4μl及对照品溶液 2μl 、4μl点于同一
块薄层板上 , 展开 ,显色 , 扫描 ,根据药物中被测成分含量计算
回收率 , 结果见表 3。
332005 年 5 月第 4期　　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　
DOI :10.16041/j.cnki.cn15-1175.2005.04.027
表 3　土木香内酯的平均回收率(n=5)
编号 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率% 均值% RSD%
1 0.98 0.9819 100.2
2 0.96 0.9472 98.67
3 0.94 0.9415 100.2 100.7 1.72
4 0.96 0.9683 100.9
5 0.95 0.9823 103.4
3　讨　论
由样品含量测定结果可知 , 同一药品 , 因生产厂家不同有
效成分含量有较大差异 。
参考文献
〔1〕张永萍 , 等.气相色谱法测定土木香药材中土木香内酯和
异土木香内酯的含量〔J〕.中国药科大学学报 , 1993 , 24(4):
248-250.
2004 年 9月 15 日收稿
HPLC法测定五根油丸中胡椒碱的含量
内蒙古自治区药品检验所(010020)　周雪梅　韩塔娜　关玉秋＊
关键词:胡椒碱;HPLC 法;含量测定
中图分类号:R291.2　　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2005)04-0034-01
　　五根油丸由玉竹 、黄精 、苦参 、荜茇等 14 味药组成。有补
肾健脾 、宁心安神作用。主要用于腰酸腿痛 、头晕 、耳鸣 、失
眠 、多梦等病症。目前 , 药品标准中该药尚无成分定量方法。
本文采用高效液相色谱法测定了该药中荜茇主要成分胡椒碱
的含量 ,取得了较满意的结果。具体实验如下。
1　仪器与试药
1.1　仪器:Alltech 426HPLC 泵 , Alltech UVIS-201 型检测器 ,
CHROMITEK色谱工作站。
1.2　试剂与试药:胡椒碱对照品(批号:0775-9702)中国药品
生物制品鉴定所;甲醇为色谱纯 ,水为高纯水 ,其它试剂均为
分析纯。
2　方法学考察
2.1　色谱条件的选择〔1〕:色谱柱:Alltima C-18 柱(250mm×
4.6mm , 5μm);流动相:甲醇-水(75:25);流速:1.0ml/min;柱
温:30℃;检测波长为 343nm。理论板数按胡椒碱峰计算 , 应
不低于 1500。
2.2　供试品溶液及对照品溶液的制备
2.2.1　供试品溶液及阴性对照溶液的制备:取本品 1g , 精密
称定 , 置 25ml 棕色量瓶中 , 精密加入无水乙醇 10ml , 称定重
量 ,放置过夜 ,超声处理 30 分钟 , 放冷 , 用无水乙醇补足减失
重量 ,摇匀 , 滤过 ,即得。
2.2.2　对照品溶液的制备:取胡椒碱对照品适量 , 加无水乙
醇制成每 1ml含 25μg 的溶液作为对照品溶液。
2.3　线性关系考察:取胡椒碱对照品 2.5mg , 精密称定 , 置
25ml棕色量瓶中 , 加无水乙醇使溶解 , 并稀释至刻度 , 摇
匀(0.1032mg/ml), 然后精密吸收 1、 2 、 3、 4 、 5、 6ml 溶液
分别置 10ml棕色量瓶中 , 加无水乙醇至刻度 , 摇匀 , 各取
10μl进样 , 按上述色谱条件测定 , 以峰面积对进样量进行回
归分析 , 结果胡椒碱在 0.1032μg～ 0.6192μg 范围内呈良好的
线性关系。 回归方程为 Y=17555.86X+6386607.9 , r=0.
9999 ,见表 1。
　＊内蒙古民族大学蒙药系 2004届毕业生
表 1　标准曲线数值表
对照品量(μg) 0.1032 0.2064 0.3096 0.4128 0.5160 0.6192
峰面积积分值 670378 1348907 1976751 2659768 3334459 3956129
2.4　稳定性试验:取同一份供试品溶液 , 分别于 0h、2h 、4h、
8h 、24h 进样测定 ,结果胡椒碱在 24 小时内的面积积分值基本
稳定不变。
2.5　精密度试验;取同一份供试品溶液 ,连续进样 5 次 , 测定
胡椒碱峰面积积分值。 RSD为 1.84%。
2.6　重复性试验:取同一份供试品内容物 5份 , 各约 1g , 精密
称定 ,分别按含量测定项下方法操作 , 测定每份含量 , 结果:
RSD为 1.84%。
2.7　加样回收试验:取本品(批号 040302 , 含量 0.2006mg/g)
内容物 5 份 , 各约 0.5g , 精密称定 , 置 25ml棕色量瓶中 , 各精
密加入用无水乙醇配制的胡椒碱对照品溶液(浓度为 0.
1016mg/ml)1ml ,分别按含量测定项下方法操作 , 测定每份含
量 , 计算回收率 ,结果平均回收率为100.31%, RSD为 1.01%。
2.8　样品含量测定:取本品按质量标准[ 含量测定] 项下的方
法处理并测定 , 3批样品的测定结果见表 2。
表 2　样品中胡椒碱含量测定结果
批号 取样量 测得峰面积值 含量(mg/)
040302 1.0233 1151832 0.600
040306 1.0016 1347917 0.702
040309 1.0045 1344395 0.696
3　小　结
本实验样品的前处理曾采用两种方法 , 即将样品切碎后
直接加乙醇超声处理及样品加硅藻土研细再超声处理 , 通过
比较两种方法的含量基本一致 , 但前者简便快捷 , 因此我们采
用此法。本方法重现性好 , 可为该药的质量控制提供适当的
数据。也可为含荜茇类蒙成药制剂的定量作参考。
参考文献
〔1〕中华人民共和国药典〔S〕.1部.2000.188.
2004 年 12月 10日收稿
34　　　　　　　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　2005 年 5 月第 4期