全 文 ：收稿日期:2006-06-01;　修订日期:2006-10-21
基金项目:重庆邮电大学基金资助项目(A-200424, A-200404, A-200646)
作者简介:潘　正(1976-),男(汉族),河南临颖人 ,现任重庆邮电大学生
物信息学院讲师 ,硕士学位 ,主要从事中药化学成分提取分离及检测技术
的研究.
紫外分光光度法测定唐松草中皂苷的含量
潘　正 , 高运玲 , 蔡应繁
(重庆邮电大学生物信息学院 ,重庆　400065)
摘要:目的 探讨唐松草中齐墩果烷型皂苷的含量 ,为用药提供科学依据。方法 根据皂苷与浓硫酸作用后在 530 nm产
生特征吸收峰 , 对唐松草中皂苷的含量用比色法测定。结果 被测的唐松草植物根和茎叶中均含有齐墩果烷型皂苷。结
论 紫外分光光度法测定唐松草中皂苷的含量平均回收率为 98.8%, 精密度较高 ,测试方法简便可行。
关键词:皂苷;　唐松草;　紫外分光光度法
中图分类号:R284.2　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2007)01-0040-01
　　毛茛科唐松草属植物在部分民族民间药用广泛 , 全世界约有
200种 ,在我国至少有 30种该属植物在 15个民族药用 ,是藏药 、蒙
药等众多民族药用的重要组成部分 [ 1] 。唐松草属植物因其形似马
尾 ,功似黄连 ,故名马尾黄连或马尾连。马尾连始载于《本草纲目
拾遗》:“性寒而不峻 ,为苦而稍减 ,不似川连之厚, 性能去皮里膜外
及经络之邪热 , 小儿伤风及痘科用”。现代研究表明, 唐松草属植
物除含有苄基异喹啉生物碱外 ,还含有皂苷类成分 [ 2] 。
唐松草中的皂苷类成分含有三类:羊毛脂甾烷(lanostane)型 、
齐墩果烷型和环菠萝蜜烷(cycloartane)型 [ 2] ,其中齐墩果烷型 , 如
foetosideC研究发现具有抗肿瘤活性。为了深入挖掘和开发唐松
草属植物活性成分及相关功能基因 , 揭示其生物合成代谢分子机
理 ,本文采用紫外分光光度法测定唐松草属植物齐墩果烷型皂苷
进行分析研究 , 为以后相关研究工作的深入开展奠定基础。
1　材料
1.1　仪器 SHIMADZUUV-2450紫外分光光度仪 , MILLIQ纯水
机 , BǜCHI旋转蒸发仪 , DK-8D型电热恒温水槽 , SartoriusCP224S
电子天平 , 感量为 0.1 mg。
1.2 　药材 经刘毅副教授鉴定为毛茛科植物短梗箭头唐松草
Thalictrumsimplexvar.hypoleucum, 爪哇唐松草 T.javanicmBl.,
小果唐松草 T.microgynumLecoyexOliv.的干燥全草。
1.3　试剂 甲醇 、正丁醇 、石油醚 、香草醛 、无水乙醇 、硫酸均为
分析纯;齐墩果酸对照品购于中国药品生物制品检定所。
2　方法
2.1　测定波长的选择 精密吸取齐墩果酸标准品溶液(1 mg/
ml)50 μl, 置于试管中 , 分别精密加入 8%香草醛乙醇溶液 0.5
ml, 72%浓硫酸(v/v)5 ml,摇匀后于恒温水浴 60℃加热 10 min,
取出试管置冰水浴中冷却 15 min。随行溶剂作空白 ,在 430 ～ 700
nm范围内进行光谱扫描 ,结果齐墩果酸在 530 nm波长处有最大
吸收 , 故选择 530nm为测定波长。
2.2　标准曲线的制备 精确称取齐墩果酸 10 mg, 置于 10 ml容
量瓶中 , 加甲醇溶解并稀释至刻度 ,制成浓度为 1 mg/ml齐墩果
酸标准溶液。
精密量取齐墩果酸标准品溶液 20, 40, 60, 80, 100 μl, 分别置
于具塞比色管中 , 挥去甲醇 ,冷却 ,加入新鲜配制的 8%香草醛 -
乙醇溶液 0.5ml, 72%硫酸溶液 5.0 ml(置冰水浴中混合), 摇匀 ,
盖塞 , 于 60℃水浴上加热 10 min, 立即冷却 , 摇匀 , 随行溶剂作空
白 , 在 530 nm处测定其吸收度 ,标准曲线为 Y=2.48X+0.069,
r=0.996 5。结果呈现良好的线性关系。
2.3 　供试品溶液的制备 精密称取样品适量 , 置于 25 ml烧瓶
中 , 精密吸取甲醇 25 ml, 称重 , 超声 30 min, 冷至室温 , 补重 , 过
滤 , 水浴蒸干后加水 20ml溶解。以石油醚 40ml, 脱脂 2次 , 合并
石油醚液并用 10 ml水洗涤 ,弃去醚层 , 将洗液与水层合并 ,用水
饱合的正丁醇萃取 3次 , 30 ml/次。合并萃取液 , 用 20ml正丁醇
饱合水洗涤 ,挥去正丁醇后用甲醇溶解并定容至 25 ml容量瓶
中 , 摇匀 ,备用。
2.4 　精密度测定 精密吸取同一供试溶液 5份 , 进行含量测定 ,
结果 RSD为 1.20%。
2.5 　重现性实验 精密吸取 5份供试溶液 , 进行含量测定 ,结果
RSD为 2.85%。
2.6　稳定性实验 精密吸取 1份供试溶液 , 分别于 0, 5, 10, 15,
20, 30min测定吸光度 ,结果 RSD为 3.53%,表明 30 min内显色
稳定。
2.7 　含量测定 吸取适量供试液置于具塞试管中 ,按 “标准曲线
绘制”项下的操作测定吸光度。结果见表 1。
表 1　唐松草中总皂苷的含量 mg· g-1
品种 全草 根 茎叶
短梗箭头唐松草 1.68 1.15 1.77
小果唐松草 0.36 0.35 0.33
爪哇唐松草 0.12 ― ―
　　“― ”表示未检测到吸收峰;n=3
2.8　加样回收实验 精密称取唐松草适量 5份 , 定量加入对照品
齐墩果酸 ,制成供试品液 , 并按 “标准曲线绘制”项下的操作测定
吸光度 。结果见表 2。
表 2　加样回收率实验结果
样品量
m/mg
加入量
m/mg
测得量
m/mg
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
0.578 0.550 1.115 97.8
0.578 0.550 1.102 95.5
0.578 0.550 1.123 99.1 98.8 2.25
0.578 0.550 1.129 100.2
0.578 0.550 1.135 101.2
3　讨论
唐松草中根及茎叶中均含有齐墩果烷型皂苷。
我们对不同种唐松草中的齐墩果烷型皂苷的含量进行了比
较 , 结果显示 ,短梗箭头唐松草中齐墩果烷型皂苷的含量明显高
于其他两种唐松草中皂苷的含量 ,原因可能是由采收的不同品种
唐松草药材生长年限的差异引起的。我们采收的短梗箭头唐松
草为多年生草本 ,而其他两种均为一年生草本。对于唐松草生长
年限与其皂苷含量高低的关系 ,有待进一步深入研究。
参考文献:
[ 1 ] 　邹炎洁 ,黄代竹 ,杜　雪.15个民族药用唐松草情况概述 [ J] .中国
民族医药杂志 , 1999, 5(1):38.
[ 2 ] 　V.I.Lutski, A.S.Gromova, E.A.KhamidulinaetalStructural
StudiesandBiologicalActivityofPlantTriterpenoidsfromtheThalic-
trumGenus[ J] .ChemistryofNaturalCompounds, 2005, 41(2):117.
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 1期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2007VOL.18NO.1