全 文 ：收稿日期:2009-07-08;　修订日期:2009-12-08
基金项目:内蒙古自治区高等学校科学研究项目(No.NJzg08025)
作者简介:敖恩宝力格(1974-),女(蒙古族),内蒙古赤峰人 ,现任内蒙古
师范大学生命科学与技术学院讲师 ,博士学位 ,主要从事天然蒙药植物的
抗氧化活性研究工作.
瓣蕊唐松草根茎中抗氧化性物质的提取研究
敖恩宝力格 ,邰丽华 ,胡日都胡
(内蒙古师范大学 生命科学与技术学院 ,内蒙古 呼和浩特　010022)
摘要:目的 研究瓣蕊唐松草根茎中提取抗氧化性物质的最佳方法及工艺条件。方法 用不同溶剂 、不同条件对提取的根
茎内含物进行抗氧化实验 , 抗氧化性的测定采用 T-AOC法。 结果 瓣蕊唐松草根茎提取物具有抗氧化性;用乙醇与醋
醇乙酯提取时抗氧化性较高;温度因素对其抗氧化性影响很大;以乙醇为提取溶剂 , 最佳提取条件为固液比 1∶12.5, 浸
提时间 60min,提取温度 60℃。结论 瓣蕊唐松草在天然抗氧化剂开发方面有较好的应用前景。
关键词:瓣蕊唐松草;　抗氧化性;　提取条件
中图分类号:Q946.33　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2010)04-0872-02
　　瓣蕊唐松草 Thalictrumpetaloideum为毛茛科唐松草属植物 ,
在内蒙古自治区 , 主要分布于兴安盟 、呼伦贝尔盟 、通辽市 、赤峰
市 、锡林郭勒盟 、乌兰察布盟 、大青山 、蛮汗山 、乌拉山;分布广 ,产
量极多。其种子入蒙药 ,根及根茎入中药。蒙药主治肺热咳嗽 ,
肺脓肿 , 失眠等;中药主治肠炎 ,赤白痢疾 , 黄痘型肝炎 ,小儿热症
等 [ 1] 。最近的研究发现同属植物成分具有抗癌 、抗凝等功
效 [ 2, 3] 。起药效作用的主要成分是生物碱和皂苷 [ 4 , 5] , 而研究最
多的是生物碱 , 目前已经发现和鉴定的唐松草属植物源生物碱有
十几种。此外 , 汪冶等 [ 5]对偏翅唐松草化学成分做了研究 , 分离
出皂苷与黄酮类。但对瓣蕊唐松草的抗氧化作用的研究还处于
一片空白。
生理情况下 , 人体有 1 % ～ 5 %的分子氧通过多种途径产生
氧自由基 , 过多的氧自由基通过损伤生物大分子 , 破坏细胞的结
构和功能 , 促使疾病的发生与发展。研究发现 , 氧自由基与衰老 、
肿瘤 、炎症 、动脉硬化 、肝和肺疾病等发生密切相关。抗氧化剂由
于能清除人体的这些自由基而具有预防癌症 、心血管疾病等疾病
以及抗衰老的作用。而合成的抗氧化剂如 BHA等可导致 DNA
的损伤及动物恶性肿瘤的发生而其安全性受到质疑 , 因此高效 、
安全的天然抗氧化剂的提取及其应用无疑具有重要的意义 [ 6 , 7] 。
我区瓣蕊唐松草资源丰富 , 以此为原料研制生产的成本较
低 , 可创造经济及社会效益。通过研究 ,我们发现瓣蕊唐松草根
茎含有抗氧化物 , 提取物的抗氧化作用与提取的溶剂 、时间 、温度
及固液比有关。现将得出的最佳提取方案报道如下。
1　材料与方法
1.1　材料 实验用瓣蕊唐松草采自内蒙古赤峰市克什克腾旗 ,采
摘后自然凉干 , 取根茎部分粉碎后保存于阴凉干燥处。总抗氧化
能力检测用 T-AOC(totalantioxidationcompetence)试剂由南京
建成生物工程研究所提供。甲醇 、乙醇 、醋酸乙酯 、正丁醇等均为
分析纯。
主要仪器有 721型分光光度计 , MP2002型电子分析天平 ,
DK-600型电热恒温培养箱及 TDZ4A-W5型离心机等。
1.2　总抗氧化性的检测方法———T-AOC法 浸提物总抗氧化
性的检测采用 T-AOC法。其原理为:样品中的抗氧化物质 ,能
使 Fe3+还原成 Fe2+, 后者可与非啉类物质形成稳定的橙黄色络
合物 , 通过在 520nm比色可测出其总抗氧化能力的高低。
1.3　溶剂对瓣蕊唐松草抗氧化物质提取率的影响 用适当的溶
剂提取是最常用的提取植物成分的方法。我们用 4种不同极性
的溶剂分别提取瓣蕊唐松草根茎中的抗氧化物。
分别称取根茎 2.0 g, 分别量取 10 ml水 、甲醇 、乙醇 、醋酸乙
酯和正丁醇 , 35 ℃恒温培养箱中浸提 60min, 6 000 r/min离心 10
min,取上清液 , 4 ℃冰箱内保存。分别取各种上清液 1 ml, 加 1
mlT-AOC试剂Ⅰ , 2 mlT-AOC试剂Ⅱ与 0.5mlT-AOC试剂
Ⅲ , 在 37 ℃水浴中反应 30 min后加试剂Ⅳ终结反应 , 检测 520
nm处的吸光度。
1.4　浸提时间对抗氧化物质提取率的影响 选取最佳溶剂 ,固液
比为 1∶ 5的条件下 , 分别提取 30, 45, 60, 75, 90及 120 min。
6 000 r/min离心 10 min, 取上清液 ,定容至 25ml, 测 1ml溶液的
总抗氧化活性 ,确定最佳提取时间。
1.5　浸提温度对抗氧化物质提取率的影响 选取最佳溶剂 , 固
液比为 1∶5, 最佳提取时间条件下 ,分别在 25, 35, 45, 60, 90 ℃时
进行浸提。 6 000 r/min离心 10 min, 取上清液 , 定容至 25 ml, 测
1 ml溶液的总抗氧化活性 , 确定最佳提取温度。
1.6　固液比对抗氧化物质提取率的影响 选取适当溶剂 ,在最佳
提取温度 、时间条件下 , 分别以 1∶ 5, 1∶7.5, 1∶10, 1∶12.5, 1
∶15的固液比进行提取。 6 000 r/min离心 10 min,取上清液 , 定
容至 25ml, 测 1ml溶液的总抗氧化活性 ,确定最佳提取固液比。
1.7　正交实验 根据单因素的实验结果设计提取瓣蕊唐松草根
茎抗氧化物质的正交表 ,进行提取正交试验 ,以达到优化提取条
件的目的。
2　结果
2.1　溶剂的选择 由图 1中可见 ,乙醇 、醋酸乙酯提取物的抗氧
化作用显著 ,甲醇提取物抗氧化作用最低。因醋酸乙酯沸点高 ,
后续度增大 ,故以乙醇作为适合的溶剂进行进一步的提取实验。
2.2　浸提时间对抗氧化物质提取率的影响 由图 2可见 , 20 ～ 45
min,吸光值增长显著 , 45 min后 , 吸光值增长不再有明显变化 ,
所以 , 提取时间以 45 min为佳。
　　图 1　溶剂对提取物抗　　　　图 2　浸提时间对搞氧化性　
　　氧化性的影响　　　　　　　物质提取率的影响
2.3　温度对抗氧化物质提取率的影响 由图 3可见 , 提取温度从
15 ℃升到 45 ℃, 吸光值增大 ,当提取温度高于 45 ℃时吸光值开
始降低 , 可能温度升高导致溶剂和提取物的极性变化及两者之间
亲和力变弱 , 导致提取率降低 , 提取物活性下降。因此 ,提取温度
以 45℃为佳 。
2.4　固液比对抗氧化物质提取率的影响 固液比对抗氧化物质
提取率的影响结果见图 4。由图 4可见 , 固液比在 1∶5 ～ 1∶10
时 , 吸光值逐渐增大 , 当固液比小于 1∶10时 , 吸光值开始降低。
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因此 , 提取固液比以 1∶10为佳。
图 3　温度对抗氧化性物质　　　　图 4　固液比对提取物
　　提取率的影响　　　　　　　　　抗氧化性的影响
2.5　正交实验 分别选取最佳时间 、温度 、固液比及上下各一梯
度 , 乙醇作为溶剂进行正交实验。见表 1 ～ 2。
由表 2可见 , 影响提取率的各因素中 , 影响程度的排序为 C
>A>B,即温度因素对抗氧化物质的提取影响最大。经计算每
个因素水平的 K值 , 综合直观图比较得出 , 理论上抗氧化物质的
最佳提取条件为 A3B2C3 ,即固液比 1∶12.5, 浸提时间 60 min, 提
取温度为 60℃。
表 1　乙醇提取瓣蕊唐松草根茎抗氧化含物正交实验
因素水平 A固液比
B
浸提时间 t/min
C
温度T/℃
1 1:7.5 45 35
2 1:10.0 60 45
3 1:12.5 90 60
表 2　正交实验及结果
实验号 A B C 吸光度
1 1 1 1 0.281
2 1 2 2 0.259
3 1 3 3 0.276
4 2 1 2 0.268
5 2 2 3 0.294
6 2 3 1 0.278
7 3 1 3 0.286
8 3 2 1 0.291
9 3 3 2 0.277
K1 0.816 0.835 0.850K2 0.840 0.844 0.804K3 0.854 0.831 0.856
k1 0.272 0.278 0.283
k
2 0.280 0.281 0.268k3 0.285 0.277 0.285
R 0.013 0.004 0.017
3　结论
氧自由基和脂质过氧化关系到衰老和许多疾病包括癌 、糖尿
病 、高血压病与高血脂等的病因 [ 8 ～ 10] 。所以 , 寻找天然 、高效 、低
毒的抗氧化剂已成为各国生物 、医学工作者共同的目标。
瓣蕊唐松草作为民间草药 ,其药理价值逐渐被引起重视 。最
近的研究发现同属植物具有抗癌 , 抗凝作用 [ 2 , 3] , 而癌症与体内
自由基的产生有密切关系。因此 ,研究和开发抗氧化剂及防治与
自由基有关的疾病有重大意义。
通过本研究发现 ,瓣蕊唐松草根茎具有抗氧化性 ,用乙醇与
醋酸乙酯提取时抗氧化性较高;温度因素对其抗氧化性影响很
大;以乙醇为提取溶剂 , 最佳提取条件为固液比 1∶12.5, 浸提时
间 60min、提取温度 60℃。
综上所述 ,瓣蕊唐松草具有抗氧化作用 , 分布广泛 , 产量极
高 , 因此进一步加强其抗氧化性和药理研究 ,使其得到有效的开
发和利用 ,对社会和经济发展具有重大意义和价值。但具体是哪
种物质对抗氧化起主要作用 ,尚需进一步的研究。
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