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基于气味指纹分析的八角茴香与莽草鉴别研究



全 文 :基于气味指纹分析的八角茴香与莽草鉴别研究
卢一1,谢达帅1,胥敏1,张超1,黄永亮1,2*
(1.成都中医药大学,成都 611137;2.成都中医药大学 临床医学院,成都 610075)
摘要:八角茴香与莽草同为木兰科植物的果实,其在性状上极其相似,难以区分。莽草具有一定的毒性,
被掺到八角茴香中难以辨别。作为常用香料,八角茴香气味浓郁且独特,而莽草具有不同于八角茴香的
特异芳香气。因此,气味鉴别是八角茴香与莽草区分的常用方法。研究以气味鉴别为切入点,采用气味
指纹分析技术,对八角茴香与莽草的气味进行检测,依据获得的气味指纹信息,结合化学计量学方法对
八角与莽草进行快速鉴别。结果表明:八角茴香与莽草在气味特征上存在明显差异,统计质量控制分析
(SQC)与软独立建模分析(SIMCA)模型能够实现八角茴香与莽草的区分;主成分分析(PCA)可明显区
分八角茴香与莽草;判别因子分析(DFA)模型累积方差总贡献率为100%,正确判别率不小于99%。
本研究采用气味指纹分析技术可反映出八角茴香及莽草的气味特征差异,并与化学计量学方法相结合,
实现了八角茴香与莽草的快速鉴别。
关键词:气味指纹分析;八角茴香;莽草;鉴别
中图分类号:TS264.3   文献标志码:A    doi:10.3969/j.issn.1000-9973.2016.06.004
文章编号:1000-9973(2016)06-0018-05
Discrimination of Illicium verumand Illicium anisatumbased
on Odor Fingerprints Analysis
LU Yi 1,XIE Da-shuai 1,XU Min1,ZHANG Chao1,HUANG Yong-liang1,2*
(1.Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu 611137,China;2.Colege of
Clinical Medicine,Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu 610075,China)
Abstract:Illicium verum and Illicium anisatum,belonging to Magnoliaceae,are very similar in
appearance,so the identification of them is very difficult.The odor of Illicium verumand Illicium
anisatumis different,and odor is one of the important evaluation indexes to identify them.The
present study starts from the odor identification,and smel fingerprint analysis technology is used to
detect the odor of Illicium verum and Illicium anisatum by fingerprint analysis.Based on the
information obtained,the stoichiometry methods are used to do rapid identification of Illicium anisatumand
Illicium verum.The results show that there are significant differences between the odor
characteristics of Illicium verumand Illicium anisatum,statistical quality control analysis(SQC)and
soft independent modeling analysis (SIMCA)model can distinct Illicium verum and Illicium
anisatum;principal component analysis(PCA)can clearly distinguish Illicium verumand Illicium
anisatum ;the total cumulative contribution rate of discrimination factor analysis(DFA )model is
收稿日期:2015-12-24        *通讯作者
基金项目:国家“十二五”科技支撑计划项目(2012BAI-29B11)
作者简介:卢一(1991-),男,贵州仁怀人,硕士,主要研究方向为中药炮制;
黄永亮(1985-),男,中药师,博士,主要研究方向为中药炮制学、临床药学。
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100%,the correct classification rate is no less than 99%.The present study uses odor fingerprint
analysis to reflect the odor of Illicium verumand Illicium anisatumand characterize the differences,
and combine with the stoichiometry methods to achieve the identification of Illicium verum and
Illicium anisatum.This study provides a new method and a new technology for the rapid
identification of Illicium verum and Illicium anisatum,which is beneficial to the inheritance and
development of odor identification experience.
Key words:odor fingerprints analysis;Illicium verum;Illicium anisatum;discrimination
   八角茴香为木兰科植物八角茴香 (Illicium
verum Hook.f.)的干燥成熟果实。其性辛、温,归肝、
肾、脾、胃经,具有温阳散寒、理气止痛之功[1]。现代药
理研究表明:八角茴香具有抗菌、镇痛、抗病毒等药理
作用[2-5]。八角茴香不仅应用于医药领域,并且作为
调味品广泛应用于食品领域,市场需求量大,所以一些
不法分子用伪品充当八角茴香。莽草 (Illicium
anisatum)为同科植物莽草的果实,有毒,果实性状与
八角茴香非常相似,极易混淆,出现过很多误把莽草当
作八角茴香食用的中毒事件[6]。目前,对八角茴香的
鉴别方法有显微鉴别,TLC[7],UV,IR[8-11],GC-MS,
HPLC[12]等,但都存在传统方法样品处理比较复杂,有
机试剂用量较多,鉴别时间比较长等缺点,因此,建立
一种快速、可靠、方便的鉴别方法具有重要意义。
气味指纹分析仪又叫电子鼻,是一种仿生嗅觉系
统,原理是利用传感器阵列将气味信号转化为电信号,
模拟动物嗅觉器官,是一种用于气味分析的现代技术
设备。主要由信号处理系统、气敏传感器阵列和模式
识别系统3部分组成。其核心部分是交叉气敏传感器
阵列,由具有不同选择性的金属氧化物传感器按一定
的阵列组成,对混合气体具有良好的检测和识别精度。
目前,电子鼻技术已经广泛应用于质量评价[13,14]、霉
变研究[15]、气味鉴别[16]、伪品鉴别[17]、等级鉴定[18,19]、
食品过程监控[20,21]、贮藏期[22,23]等方面。
本文通过采用气味指纹分析技术,获取八角茴香
及莽草气味指纹图谱,利用化学计量学方法分析实现
对八角茴香与莽草进行快速鉴别研究。
1 材料与仪器
1.1 材料
八角茴香,购于成都荷花池中药材专业市场,共
20批。莽草,购于广西玉林银丰国际中药港中药材专
业市场,共10批。经鉴定,均为木兰科植物八角茴香
与莽草的干燥成熟果实。
1.2 仪器
α-FOX4000型电子鼻(由 HS-100型自动进样器、
传感器阵列和信号处理系统3部分功能器件组成;传
感器阵列由17根金属氧化物型半导体传感器构
成) 法国 Alpha Mos公司,数据处理软件(Alpha-
Soft Version 2012.45);SPSS 17.0数据分析软件;粉
碎机(FW135型) 天津市泰斯特仪器有限公司;电子
天平(BP211D) Sartorius。
2 方法
2.1 样品制备
将样品分别打粉,过5号筛,备用。
2.2 传感器信号分析
α-FOX4000型电子鼻共有17根传感器。检测样
品时以采集时间(120s)为横坐标,以响应值为纵坐
标,绘制每根传感器在采集时间(120s)内的响应变化
曲线,见图1。数据分析与处理时应选择每个传感器
的最大响应值进行数据分析。
0.5
0.0
-0.5
-1.0
-1.5


时间(s)
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120
图例
LY2/LG
LY2/G
LY2/AA
LY2/gCTL
LY2/gCT
T30/1
P10/1
P10/2
P40/1
T70/2
PA/2
P30/1
P40/2
P30/2
T40/2
图1 电子鼻传感器响应值变化曲线(样品B-9)
2.3 方法学考察
为使电子鼻具有良好的分析效果,尽量保持传感
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器响应值在0.3~0.8范围内,故对八角茴香电子鼻检
测进行单因素方法学考察。由于八角茴香气味比较浓
郁,本研究中电子鼻检测固定称样量为0.1g,自动进
样分析体积为2500μL,分别对样品的振荡时间及振
荡温度进行单因素考察,初步建立八角茴香及莽草电
子鼻技术鉴别方法。
2.3.1 振荡时间考察
称取样品 0.1g,振荡温度 60 ℃,进样体积
2500μL。振荡时间分别考察3,5,8,10,15min进行
分析。由于八角茴香气味浓郁,在3min与5min响
应值无明显变化,表明八角茴香气味在3min后趋于
饱和稳定。依据不同振荡时间电子鼻获得八角茴香样
品响应值,进行相似度分析,见图2。实验最终以
3min作为样品分析的孵化时间。
0
1
2
10 min
15 min
3 min
5 min
8 min
LY
2/
%L
G
LY
2/
%G
LY
2/
%A
A
LY
2/
%g
CT
L
LY
2/
%g
CT
T3
0/
%1
P1
0/
%1
P1
0/
%2
P4
0/
%1
T7
0/
%2
PA
/%2
P3
0/
%1
P4
0/
%2
P3
0/
%2
T4
0/
%2
T4
0/
%1
TA
/%2
图2 不同振荡时间电子鼻传感器响应值相似度分析
2.3.2 振荡温度考察
称取样品 0.1g,振荡时间 600s,进样体积
2500μL。振荡温度分别考察40,50,60℃进行分析,
40℃时传感器响应值分布在0.3~0.8,且传感器未过
载为评价指标。最终选取40℃为本实验研究的孵化
温度。
2.4 分析方法
2.4.1 样品制备
精密称取过5号筛的各样品0.1g,置于20mL
顶空进样瓶中,顶空进样分析,每份样品测定1次。
2.4.2 检测参数设置
数据获取时间120s,获取周期1s,延滞时间
600s,空气流速150mL/min,注射体积2500μL,注射
速度2500μL/s。自动进样器参数:振荡时间180s,振
荡温度40℃,冲洗时间120s,注射器温度70℃,搅拌
速度500r/min,搅拌开始时间5s,搅拌停止时间2s。
2.4.3 重复性考察
根据上述确定的方法进行重复性考察。连续分析
和采集同一样品6份的传感器响应值,结果见表1。
除LY2/AA传感器的RSD小于5.0%以外,其余各传
感器RSD均小于3%。证明数据结果可靠,仪器稳定
性良好。
表1 电子鼻重复性考察结果(n=6)

传感器 RSD 传感器 RSD
LY2/AA -4.239 T40/2  1.453
LY2/gCTL -2.810 P30/1  1.445
P30/2  2.504 PA/2  1.396
P10/1  2.210 T30/1  1.174
LY2/gCT -2.170 TA/2  1.099
LY2/G -1.716 T70/2  0.887
LY2/LG  1.630 P10/2  0.721
P40/1  1.506 T40/1  0.677
P40/2  0.650 - -
2.5 化学计量学分析
因电子鼻传感器比较多,获取的数据维度高,所以
为便于数据处理分析,常与化学计量学方法,如统计质
量控制分析(SQC)、软独立建模分析(SIMCA)、主成
分分析 (PCA)、判别因子分析 (DFA)、方差分析
(ANOVA)等结合分析。
3 八角茴香与莽草鉴别分析
3.1 主成分分析(PCA)
将电子鼻获取的八角茴香及莽草的传感器响应值
进行PCA分析,结果见图3。
0.2
0.1
0
-0.1
BJ
MCPC
2-
15
.9
67
%
PC1-83.218%
-0.2 -0.1 0 0.1 0.2 0.3
图3 八角茴香及莽草PCA分析
由图3PCA二维图可知,PC1与PC2总贡献率达
到99.185%;其中可以很明显地看出八角茴香与莽草
之间存在明显的差异,表明电子鼻对八角茴香与莽草
具有很好的鉴别能力,因此可以采用电子鼻技术实现
对八角茴香与莽草进行快速鉴别。
3.2 判别因子分析(DFA)
3.2.1 全变量DFA模型分析
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本实验将电子鼻获取的八角茴香与莽草的所有传
感器响应值进行DFA分析,根据八角茴香与莽草样
品获取的30组数据建立DFA模型,另外,随机抽取
9组数据作为模型验证集,结果见图4。对9个未知样
品的判别结果见表2。
4
3
2
1
0
-1
-2
-3
DF
2-
1.
06
1E
-1
1%
DF1-100%
-3 -2 -1 0 1 2 3 4 5 6
Unknown
BJ
MC
图4 八角茴香与莽草DFA分析(全部传感器)
表2 9个未知样品的判别结果
未知样品编号 判别分组 判别结果 判别率(%)
U1 八角茴香 No  57.0
U2 八角茴香 Yes  76.0
U3 八角茴香 Yes  91.0
U4 八角茴香 Yes  78.2
U5 八角茴香 Yes  92.5
U6 八角茴香 Yes  83.0
U7 莽草 Yes  86.7
U8 莽草 Yes  100.0
U9 八角茴香 No  50.3
  由图4和表2可知,利用所有传感器响应值进行
DFA建模,其对未知样本的识别效果较差,故有必要
对传感器进行优化选择。
3.2.2 传感器优化DFA分析
现以所有样品的传感器响应值为研究对象,采用
单因素方差分析(ANVOA)来优选传感器,结果见
表3。最终选择F值>160的传感器为本实验 DFA
建模的最优传感器,即以 LY2/LG,P30/2,P40/2,
LY2/gCL,P10/2这5根传感器为优选传感器。
表3 传感器响应方差分析结果
传感器类型
方差分析
F值 P
传感器类型
方差分析
F值 P
LY2/LG  242.416 <0.001 T40/1  106.612 <0.001
P30/2  230.664 <0.001 PA/2  101.575 <0.001
P40/2  217.971 <0.001 T30/1  74.709 <0.001
LY2/gCT  168.807 <0.001 T40/2  69.092 <0.001
P10/2  162.651 <0.001 LY2/G  51.473 <0.001
T70/2  147.150 <0.001 P10/1  49.573 <0.001
续 表
传感器类型
方差分析
F值 P
传感器类型
方差分析
F值 P
P40/1  146.503 <0.001 LY2/AA  1.879 <0.001
TA/2  130.912 <0.001 LY2/gCTL  1.474 <0.001
P30/1  107.532 <0.001 - - -
  本实验将电子鼻获取的八角茴香与莽草用上述
5根传感器响应值进行DFA分析,根据八角茴香与莽
草获取的30组数据建立DFA模型,另外,随机抽取的
9组数据作为模型验证集,结果见图5。对9个未知样
品的判别结果见表4。
表4 9个未知样品的判别结果
未知样品编号 判别分组 判别结果 判别率(%)
U1 八角茴香 Yes  99.0
U2 八角茴香 Yes  100.0
U3 八角茴香 Yes  100.0
U4 八角茴香 Yes  98.4
U5 莽草 Yes  96.7
U6 莽草 Yes  100.0
U7 莽草 Yes  100.0
U8 莽草 Yes  98.0
U9 莽草 Yes  100.0
2
1
0
-1
-2
Unknown
BJ
MC
DF
2-
0%
DF1-100%
-7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8
图5 八角茴香与莽草DFA分析(优选传感器)
  由图5可知,DF1和DF2的累积方差总贡献率达
到100%,表明该模型能很好地区分八角茴香与莽草。
由表4可知,依据建立的DFA模型,对9组样品中的
9个未知样本进行了判别,9个未知样本均落在相应的
组别中,判别效果良好,正确判别率均不小于99%。
3.3 统计质量控制分析(SQC)
本实验将电子鼻获取的八角茴香与莽草传感器响
应值进行SQC分析,以八角茴香为参照组,建立SQC
模型,见图6。八角茴香与莽草区分明显,以莽草为参
照,其他20批八角茴香均在区域外,表明SQC模型能
够区分八角茴香与莽草;根据组内的距离可知,10批
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莽草气味差异较小,20批八角茴香气味差异较大,可
能是因为不同产地的八角茴香气味差异较大。
0.005
0.000
-0.005
-0.010
BJ
MC

离(





10 20 30
图6 八角茴香与莽草的SQC分析
3.4 软独立建模分析(SIMCA)
本实验将电子鼻获取的八角茴香与莽草传感器响
应值进行SIMCA分析,结果见图7。以八角茴香为参
照,莽草均在参照区域外,说明SIMCA分析能区分八
角茴香与莽草,SIMCA为有效模型,可用于八角茴香
与莽草的区分。
1.00-03
1.00-04
1.00-05
1.00-06
1.00-07
BJ
MC残

0.1 1 10 100
距离
图 7八角茴香与莽草的SIMCA分析
4 结论与讨论
八角茴香作为药食两用中药,气味是其重要的性
状特征,也是判别质量优劣的重要因素。莽草与八角
茴香在形状上极其相似,出现过很多误把莽草当作八
角茴香食用的中毒事例,所以建立一种高效、快速的鉴
别方法意义重大。
本研究在传统经验鉴别的基础上,采用气味指纹
分析技术结合化学计量学方法,对八角茴香与莽草的
气味特征进行分析研究。结果表明:气味指纹分析技
术能够对八角茴香与莽草的气味进行客观化描述,
SQC,PCA,SIMCA,DFA模型均可以用于气味指纹
特征分析。其中,SQC,SIMCA能够实现对八角茴香
与莽草的区分;PCA结果显示八角茴香与莽草区分明
显;DFA模型正确判别率为100%。从电子鼻传感器
响应特征以及化学计量学模型分析可知,八角茴香与
莽草之间气味特征存在显著差异。通过气味指纹分析
技术可以实现对八角茴香与莽草的快速鉴别。气味指
纹技术与传统鉴别方法相比更加快速、客观化,对食
品、中药鉴别的发展具有重要的意义。本文通过气味
指纹图谱技术应用于八角茴香与莽草的鉴别研究,为
食品与中药的气味鉴别研究提供思路借鉴。
参考文献:
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加,辣椒的脱水率和固形物获取率增大,在相同条件
下,脱水率的值远大于固形物获取率的值,脱水率与固
形物获取率比值随着食盐含量的增加而增大,经温度
为45℃渗透液(45%蔗糖+10%食盐)渗透脱水2,4,
6h,辣椒的脱水率与固形物获取率比值分别为4.21±
0.12,5.11±0.10,5.56±0.13。
在渗透脱水过程中,辣椒的有效水分扩散系数随着
渗透温度的升高而变大,近似呈线性规律。在渗透液为
45%蔗糖+10%食盐(+水),渗透温度为45℃条件下,
辣椒的有效水分扩散系数为1.57×10-10 m2/s。
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基础研究  第41卷 第6期
2016年6月
               中 国 调 味 品
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