全 文 ：西南民族大学学报·自然科学版第 38 卷第 6 期
Journal of Southwest University for NationalitiesNatural Science Edition Nov. 2012___________________________________________________________________
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收稿日期：2012-10-18
通讯作者：韩泳平(1969-),男, 教授, 硕士生导师. E-mail：yphan65@tom.com.
基金项目：西南民族大学研究生创新型科研项目资助(CX2011SP04).
doi: 10.3969/j.issn.1003-4271.2012.06.14
十三味菥冥丸的定性鉴别
李超, 韩泳平
(西南民族大学少数民族药物研究所, 四川 成都 610041)
摘 要: 目的: 建立针对十三味菥冥丸定性鉴别方案; 方法: 采用薄层层析法对制剂中的诃子、紫草茸、茜草进行鉴别,
对大托叶云实、波棱瓜子进行理化鉴别; 此外, 还对制剂进行了重金属和砷盐的限量检查. 结果: 在薄层色谱中均能检
出诃子、紫草茸、茜草三味药材, 薄层色谱斑点清晰, 阴性对照品溶液无干扰, 重金属的检查三批样品均低于 10ppm,
砷盐检查低于 2ppm. 结论: 本文所确定的方法灵敏性好、稳定可靠, 可作为十三味菥冥丸的定性鉴别的依据.
关键词: 十三味菥冥胶囊; 薄层鉴别; 诃子; 紫草茸; 茜草; 重金属
中图分类号: R284, R29 文献标识码: A 文章编号: 1003-4271(2012)06-0927-05


十三味菥冥丸基于藏药源远流长的历史 , 经历代医学专家反复论证和研制 , 现为藏医常用药. 它是由
菥蓂子、茜草、诃子、大托叶云实、芒果核、蒲桃、紫草茸、山矾叶、圆柏枝、豆蔻、巴夏嘎、刀豆、波棱瓜
子等十三味药材制成的一种复方制剂, 具有清热, 通淋, 消炎止痛功效, 临床上用于淋病, 睾丸肿大, 膀胱炎,
腰痛等症[1]. 茜草作为复方中的主药之一, 具有止咳、祛痰、抗炎免疫作用[2]及解热镇痛作用[3] 同时近代研究表
明还具有有抗氧化作用[4]诃子对革兰氏阳性阴性菌均有活性[5]. 诃子的提取物为优良的天然抗氧化剂对亚油酸
的抗氧化效果强于同浓度的茶多酚[6]. 紫草茸主要为活血、止痛, 对疥癣等疾病有较好的疗效效果[7]. 为了有效
控制其制剂质量, 保证临床疗效, 本文采用薄层色谱法对处方中的主要成分菥蓂子、茜草、诃子进行了薄层鉴别,
对大托叶云实、波棱瓜子进行了理化鉴别, 并对该胶囊进行了重金属、砷盐等进行了限量检查, 取得了较为满意
的结果.
1 仪器和试药
METTLER TOLEDO AE240电子分析天平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司]; KQ-250B型超声波清洗器
(昆山市超声仪器有限公司); DZF一6065型真空干燥箱(上海一恒科技有限公司); 紫外光灯(北京智源通生物技术
研究所); 硅胶G(青岛海洋化工集团公司);
紫草茸对照药材(中国药品生物制品检定所, 批号: 1052-9701); 没食子酸对照品(中国生物制品检定所, 批
号: 110831-200302); 茜草对照药材(中国生物制品检定所, 批号: 01742-200210); 硝酸、硫酸、氯仿、苯、乙酸乙
酯等试剂为分析纯.
2 方法与结果
2.1 薄层色谱鉴别
2.1.1 诃子
取样品 5g, 加乙醇 10mL, 经超声、滤过处理后, 水浴上蒸干. 残渣以乙醇 1ml 溶解后作为供试品溶液. 另
取没食子酸对照品(中国生物制品检定所, 批号: 110831-200302), 以乙醇制成浓度 0.5mg/mL 的溶液作为对照品
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溶液. 再取缺诃子的阴性药材 3g, 按照上述方法制成缺诃子的阴性样品溶液. 根据《中国药典》(一部) 附录 VIB
进行试验, 分别移取供试品溶液、没食子酸对照品溶液、缺诃子的空白样品溶液 4 μl 点于同一硅胶 G 板上进行
薄层展开, 展开系统为氯仿－乙酸乙酯－甲酸(6:4:1)混合溶剂, 以 2%三氯化铁乙醇溶液为显色剂. 结果显示,
在供试品与对照品色谱相近位置处出现相同颜色斑点, 而阴性样品无干扰, 如图 1.
2.1.2 茜草
取样品 5g, 加醋酸乙酯 20ml, 超声处理 30 分钟, 滤过, 滤液加水洗数次, 弃去水液, 醋酸乙酯液水浴浓缩至
2ml, 作为供试品溶液. 另取茜草对照药材 0.5g, 加醋酸乙酯 10ml, 超声处理 30 分钟, 滤过, 滤液加水洗数次, 弃
去水液, 醋酸乙酯液水浴浓缩至 2ml, 作为对照药材溶液. 取缺茜草的阴性样品 3g, 按照前述方法制备成相应的
阴性样品溶液. 根据《中国药典》进行试验, 分别吸取供试品溶液、茜草对照药材溶液、缺茜草的空白样品溶液
6μl 点于硅胶 G 板上进行薄层展开, 展开系统为氯仿－甲苯－丙酮－甲酸(5:5:0.8:0.2)混合溶剂, 展开、晾干后, 于
紫外光灯(365nm)下检视. 结果表明, 供试品在与对照药材相近地方显同样颜色斑点, 且阴性样品无干扰, 如图 2

图 1 十三味菥蓂丸中诃子 TLC 鉴别 图 2 十三味菥蓂胶囊中茜草 TLC 鉴别
1. 十三味菥蓂丸样品(20101106) 2. 十三味菥蓂丸样品 1. 十三味菥蓂胶囊样品(20101106) 2. 十三味菥蓂胶囊样品
(20101107) 3. 十三味菥蓂丸样品(20101108) (20101107) 3. 十三味菥蓂胶囊样品(20101108)
4. 没食子酸对照品 5. 缺诃子阴性样品 4. 茜草对照药材 5. 缺茜草阴性样品
2.1.3 紫草茸
取本品粉末 2g, 加醋酸乙酯 15ml, 超声处理 30 分钟, 滤过, 滤液加水洗涤数次, 弃去水液, 醋酸乙酯液水浴
浓缩至 3ml, 作为供试品溶液. 另取紫草茸对照药材 0.5g, 加乙酸乙酯 10mL, 超声 5 分钟, 滤过, 滤液加蒸馏水洗
数次, 弃去水液, 浓缩乙酸乙酯液, 作为对照药材溶液. 再取不含紫草茸药材的阴性样品 2g, 同上述制备法制成
不含紫草茸药材的阴性样品溶液. 根据《中国药典》进行试验, 分别吸取供试品溶液、紫草茸对照药材溶液、缺
紫草茸的空白样品溶液 6μl 点于硅胶 G 薄层板上, 以氯仿-甲苯-丙酮-甲酸(5: 5: 0.8: 0.2)进行展开, 取出、晾干后,
日光下检视. 薄层色谱中, 在供试品与对照药材在相近位置处出现相同颜色斑点, 且阴性样品无干扰. 如图 3.

图 3 十三味菥蓂胶囊中紫草茸 TLC 鉴别
1. 十三味菥蓂胶囊样品(20101106) 2. 十三味菥蓂胶囊样品(20101107)
3. 十三味菥蓂胶囊样品(20101108) 4. 紫草茸对照药材 5. 缺紫草茸阴性样品
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第 6 期 ___________________________________________________________________ 李超 等: 十三味菥冥丸的定性鉴别
2.2 理化鉴别
2.2.1 大托叶云实
(1)供试品溶液的制备
取样品 2g, 加入乙醇 10mL 浸泡、提取, 滤过后以滤液作为供试品溶液.
(2)阴性溶液的制备
按照供试品溶液制备方法, 取缺上述药材的阴性样品 2g, 制成缺大托叶
云实药材的阴性溶液.
(3)方法与结果
分取上述两种溶液各 2mL, 加入三氯化锑试液 1mL 后观察. 供试品溶液加入三氯化锑试液后溶液颜色由黄
色逐渐褪色, 阴性样品溶液加入三氯化锑试液后溶液变为白色悬浊液.
2.2.2 波棱瓜子
(1)供试品溶液的制备
取本品粉末 2g, 加乙醇 30mL, 以稀盐酸酸化, 回流 30min, 滤过, 取滤液 15ml, 用 5%氨水调至中性, 水浴
蒸干, 加 5%硫酸试液 10ml 溶解, 取滤液 1ml, 作为供试品溶液.
(2)阴性样品溶液的制备
取缺波棱瓜子药材的阴性样品 2g, 同供试品法制成缺波棱瓜子药材的阴性样品溶液.
(3)方法和结果
分别分取上述两种滤液 2mL, 加入碘化铋钾试液 1-2 滴后观察. 供试品溶液加入碘化铋钾试液后产生橘黄
色沉淀, 阴性样品溶液加入碘化铋钾试液后溶液没有产生橘黄色沉淀.
2.3 限量检查
2.3.1 重金属
取样品 1g, 炽灼、炭化后, 冷却, 加入硫酸 0.5mL, 加热、除尽硫酸蒸气后, 再加硝酸 0.5mL, 蒸干, 至氧化
氮蒸气除尽后, 在600℃炽灼使完全灰化, 加盐酸2mL, 然后蒸干, 向坩埚中加水15mL溶解, 逐滴滴加氨试液使
之成为中性后, 再逐滴滴加醋酸盐酸缓冲液(pH 3.5)2mL, 微热溶解后, 移置纳氏比色管中, 加水稀释成 25mL,
以此作为供试品溶液管.
移取上述试剂, 于瓷皿中缓慢蒸干, 后加入上述缓冲液2mL, 水15mL, 溶解, 移入纳氏比色管中, 加入铅标
准溶液 1、2、3mL, 再用水定容成 25mL, 以此作为标准对照品溶液管.
在前述各管中分别加入硫代乙酰胺试液 2mL, 摇匀, 放置一段时间, 置于白纸上, 从上向下进行透视, 比较
颜色变化. 结果表明, 通过供试品管所显示颜色与标准管的颜色比较, 均浅于 1mL 标准铅溶液. 结果见表 1 . 三
批样品的重金属含量均低于 10ppm, 符合药典要求.
表 1 三批样品重金属限量检查
批 号 重金属含量
20101106 ＜10ppm
20101107 ＜10ppm
20101108 ＜10ppm
2.3.2 砷盐
取样品 1g, 加氢氧化钙 1g, 加少量水, 搅匀、干燥后, 小火灼烧、炭化后, 再在 550℃完全灰化, 冷却后, 分
别加入盐酸 5mL, 水 21mL, 置测砷瓶中, 按《中国药典》(2010 版)一部附录 IX F 砷盐检查法第二法, 样品管砷
颜色均浅于标准管砷溶液(2mg/mL, 即 2ppm)颜色. 三批样品中的砷含量均低于 2ppm, 符合药典要求.
表 2 三批样品砷盐限量检查
批 号 砷盐含量
20101106 ＜2ppm
20101107 ＜2ppm
20101108 ＜2ppm
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2.3.3 水分
取三批中试样品, 按照《中国药典》(2010 年版)一部附录 IX H 水分测定法第一法项下进行检查, 结果见表
3. 由表可知, 三批样品的水分含量均低于 9.0%.
表 3 三批样品水分检查结果
批 号 含水量(%)
20101106 4.9
20101107 5.2
20101108 5.0
2.3.4 装量差异
取三批中试样品, 按照《中国药典》(2010 年版)一部附录 I L 胶囊剂项下方法检查, 结果见表 4. 由表可知, 三
批样品的装量差异限度均在标示装量的±10%以内.
表 4 三批样品装量差异检查结果
批 号 装量差异(%)
20101106 6.3
20101107 6.0
20101108 6.1
2.3.5 崩解时限
取三批中试样品, 按《中国药典》(2010 年版)一部附录 XⅡ A 崩解时限检查法项下进行检查, 结果见表 5. 由
表可知, 三批样品的崩解时间均在 30 分钟内.
表 5 三批样品崩解时限检查结果
批 号 崩解时限(min)
20101106 16
20101107 15
20101108 16
2.3.6 微生物限度检查
取三批中试样品, 按《中国药典》(2010 年版)一部附录 XⅢ C 微生物限度检查法项下进行检查, 结果见表 6.
由表可知, 微生物限度检查均符合规定.

表 6 三批样品微生物限度检查结果
批 号 细菌数(个/g) 霉菌数(个/g) 大肠杆菌 活螨
20101106 308 29 未检出 未检出
20101107 301 30 未检出 未检出
20101108 293 26 未检出 未检出
3 讨论
本文研究主要采用薄层色谱、理化鉴别等方法对十三味菥冥胶囊中的的诃子、紫草茸、茜草, 以及大托叶
云实、波棱瓜子等药材进行了鉴别, 所制定的方法重现性好、可操作性强. 研究中也对制剂中的其他药材的鉴别
也进行了探讨, 但由于特征性不强或阴性干扰等, 未纳入正文. 通过实验实践可知, 在薄层层析之前薄层板应进
行预饱和, 以防止斑点的扩散及产生边缘效应, 从而达到更好的分离效果. 通过TLC实验, 制定了诃子、紫草茸、
茜草等药材的薄层鉴别方法, 特征斑点明显, 色谱分离清晰, 可用作制剂中诃子、紫草茸、茜草专属性鉴别, 三
批药品中重金属和砷盐的检查均小于10ppm和2ppm, 符合中国药典相关规定. 本文的研究结果可为十三味菥冥
丸质量标准的制定提供依据

参考文献:
[1] 中华人民共和国卫生部. 药品标准 藏药(第一册)[S]. 北京: 中国标准出版社, 1995.
[2] 许兰芝, 陈维宁, 张薇, 等. 茜草醇提物的抗炎免疫作用[J]. 潍坊医学院学报, 2002(1):1-3.
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[3] 刘成立, 许兰芝, 陈维宁, 等. 茜草醇提物的解热镇痛作用[J]. 潍坊医学院学报, 2002 (1): 4-5.
[4] 王艳双, 罗速. 茜草蒽醌对肝癌 SMMC-7721 细胞抗氧化作用[J]. 山东医药, 2010, 50(48): 45-46.
[5] GODBOLE S, PENDSE G. Antibacterial property of some plants [J]. Indian J Pharmacy, 1960, 22(2): 39-44.
[6] 魏安池, 周瑞宝. 诃子抗氧化剂的研究[J]. 中国油脂, 1998, 23(3):43-45.
[7] 祝之友, 严铸云. 紫草茸临床性效考释[J]. 中国中药杂志, 1990, 15(9):54-55.


Qualitative identification of Shisanwei Ximing pills
LI Chao, HAN Yong-ping
(School of Chemistry and Environmental Protection Engineering, Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041, P.R.C.)
Abstract: Objective: To establish TLC method for shisanwei Ximing pills. Method: Fructus Chebulae , lacca , Radix Rubiae
are identified by TLC method and SEMEN CAESALPINIAE CRISTAE, Bō Lénɡ Guā Zǐ are identified by physical and
chemical identification. Meanwhile , the heavy metals and arsenic salts are inspected. Results: TLC method could identify
Fructus Chebulae , lacca , Radix Rubiae in the Shisanwei Ximing pills. The contents of heavy metals and arsenic salts
respectively are less than 10ppm and 2ppm. Conclusion: This method is accurate and reproducible．It can be used for the
quality control of ShisanweiXiming pills.
Key wards: TLC; identification; Shisanwei Ximing pill