全 文 ：文章编号:1001-6910(2010)10-0033-03 ·药学研究·
HPLC法测定华山参中山莨菪碱的含量
康　辉 1 ,聂桂华 2 ,代雪平2
(1.郑州市食品药品检验所 ,河南 郑州 450006;2.河南省食品药品检验所 ,河南 郑州 450003)
摘要　目的:建立以高效液相色谱法测定华山参中山莨菪碱
含量的方法。方法:以山莨菪碱为对照品 ,色谱柱为 phenome-
nexLuna5uC18-phenyl(250mm×4.6 mm, 5μm),柱温 40 ℃,
流动相为 0.3%磷酸 -甲醇(70∶30), 流速 1.2mL/min, 测定
波 长 为 210 nm。 结 果:山 莨 菪 碱 的 进 样 量 在
1.978～ 19.78 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系
(r=0.999 9), 平均回收率为 95.92%, RSD为 2.6%
(n=5)。结论:本方法准确 、可靠 、重复性好 , 可用于华山参
药材的质量控制。
关键词:高效液相色谱　华山参　山莨菪碱　含量测定
中图分类号:R284　　文献标志码:B
　　华山参[ 1]为茄科植物 (漏斗泡囊草)Physochlai-
nainfundibularisKuang的干燥根。其原植物为多年
生草本 ,生于山坡 、沟谷或草地 ,花期 3月 ～ 5月 ,果期
5月 ～ 6月。春季采挖 ,除去须根 ,洗净 ,晒干。主产
区为河南 、陕西 、山西等地。 《中国药典》最早收载于
1977版一部 ,最新的 2010版中仍有收载。根据文
献 [ 1-3]报道 ,华山参中含有阿托品 、东莨菪碱 、消旋山
莨菪碱 、脱水东莨菪碱 、异东莨菪醇 、山莨菪碱等生物
碱 ,还含有东莨菪内酯 、氨基酸 、多糖等多种成分。华
山参的制剂有华山参滴丸 、华山参片 、华山参气雾剂
等。为较好地控制华山参的质量 ,笔者以高效液相色
谱法对华山参中山莨菪碱含量进行了测定。
1　仪器与试药
Waters2690高效液相色谱仪 -Waters996二极
管阵列检测器;Agilent1100系列高效液相色谱仪;
KQ-300型超声波清洗器 ,昆山超声仪器有限公司
产品。山莨菪碱对照品 ,中国药品生物制品检定所
提供 ,批号 0249-9501;乙腈为色谱纯 , Merck公司
产品;水为纯净水 。
2　方法与结果
2.1　色谱条件
PhenomenexLuna5uC18 -phenyl(250mm×4.6mm,
5 μm)色谱柱 ,流动相 0.3%磷酸 -甲醇 (70∶30),
流速为 1.0mL/min,柱温 40 ℃,测定波长为 210nm。
在此条件下山莨菪碱峰和杂质峰分离较好 ,色谱图
见图 1 ～ 2。
2.2　对照品溶液的制备
取山莨菪碱对照品约 10 mg,精密称定 ,用甲醇
溶解制成每毫升含 5 mg的对照品溶液 。
2.3　供试品溶液的制备
取华山参药材细粉 1g,精密称定 ,置具塞瓶中;
精密加入甲醇 25 mL和氨试液 0.5 mL;密塞;放置
1h后超声提取 1 h;放冷 ,滤过 ,取续滤液;微孔滤
膜(0.45 μm)滤过 ,作为供试品溶液 。
2.4　线性关系考察
取山莨菪碱对照品溶液(0.494 5 g/L),分别进
样 4, 5, 10, 20, 30, 40 μL,分别注入液相色谱仪进行
测定 。回归方程:Y=0.011X-0.059 7(r=
0.999 97)。结 果表明 , 山莨 菪碱在 1.978 ～
19.78μg范围内线性良好。
表 1　线性关系的试验结果
进样体积 /mL 4 5 10 20 30 40
进样量 X/μg 1.978 2.472 5 4.945 9.89 14.835 19.78
峰面积 Y 182.85 236.87 454.38 902.47 1 347.91 1 810.11
2.5　精密度试验
精密吸取同一样品溶液 20 μL,重复进样 6次 ,
测定峰面积 ,结果表明精密度良好 。见表 2。
2.6　准确度试验
取已知样品(山莨菪碱的含量为 2.192 mg/g)6
份 ,每份约 1 g,精密称定;精密加入山莨菪碱对照品
的甲醇溶液(0.061 6 g/L)25 mL, 各加入氨试液
0.5 mL;超声处理 1 h;用甲醇补足减失的重量;照
上述方法测定山莨菪碱含量 ,计算回收率。结果见
表 3。
·33·　　中医研究　 2010年 10月　第 23卷　第 10期　TCMRes.October2010 Vol.23No.10　　
表 2　精密度试验结果
序号 1 2 3 4 5 6 平均峰面积 RSD/%
峰面积 1 499.97 1 488.23 1 498.87 1 509.23 1 496.96 1 504.22 1 499.58 0.47
表 3　回收率试验结果
称样量 /g 样品含量 /mg 对照品加入量 /mg 测得总量 /mg 回收率 /% 平均回收率 /% RSD/%
0.922 2 2.021 5 1.54 3.498 6 95.92
0.966 4 2.118 4 1.54 3.590 4 95.58
0.944 6 2.070 5 1.54 3.539 4 95.38
0.997 7 2.186 9 1.54 3.740 8 100.90
1.003 1 2.198 8 1.54 3.730 6 99.47
95.92 2.6
2.7　稳定性试验
取同一供试品溶液 ,分别在 0, 3, 9, 10, 14 , 16 h
进样 ,测定峰面积。结果 ,供试品溶液在 16 h内基
本稳定。见表 4。
表 4　稳定性试验结果
时间 /h 0 3 9 10 14 16 平均峰面积 RSD/%
峰面积 621.45 628.64 625.57 621.78 621.97 613.89 622.22 0.8
2.8　不同商品规格的色谱柱试验
取同一样品 ,按含量测定项下的方法用不同色
谱柱测定其含量 。结果表明 ,此方法在不同色谱柱
上均有良好的适用性 。见表 5。
表 5　不同商品规格的色谱柱测定结果
色谱柱 含量 /% 平均值 /%
phenomenex 0.22
kromasil 0.23 0.225
2.9　重现性试验
取同一样品 , 重复测定 6次 , 测定平均值为
1.19%, RSD为 2.7%(n=6)。
2.10　样品测定
10批样品山莨菪碱含量测定结果见表 6。
表 6　华山参药材中山莨菪碱的含量测定结果　 n=2
样品产地及来源 山莨菪碱含量 /%
河南(河南天方药业中药有限公司 ,批号 1) 0.19
山东蒙城(市场购买) 0.12
河南(河南天方药业中药有限公司 ,批号 2) 0.15
河南舞阳(自采) 0.16
河南(本所标本室) 0.10
湖北(市场购买) 0.11
河南(浙江中医药大学中药饮片厂 080815,原药材) 0.12
贵州(浙江中医药大学中药饮片厂 080816,原药材) 0.15
河南登封嵩山(自采) 0.22
河南登封嵩山(自采) 0.15
3　小　结
笔者曾选择华山参中东莨菪碱 、阿托品和山莨
菪碱 3种生物碱进行含量测定。结果 3者中阿托品
的峰形不佳 ,东莨菪碱含量极低 、不同产地含量差别
大 ,山莨菪碱峰形好。故笔者选择山莨菪碱作为指
标成分 。笔者曾将 0.4%醋酸铵溶液 -甲醇
(70∶30)和 0.3%磷酸 -甲醇(70∶30)两种流动相作
比较 ,结果后者出峰时间和峰形较好 ,故选 0.3%磷
酸 -甲醇(70∶30)作流动相。
至于供试品溶液制备方法的选择:笔者曾取同
一样品 4份 ,各 1 g,精密称定;分别精密加入甲醇
10, 20, 25, 50 mL,各加入氨试液 0.5 mL;超声处理
1h;用甲醇补足减失的重量 ,以 HPLC法测定山莨
菪碱含量 。结果表明:甲醇用量选择 25 mL和氨试
液 0.5 mL,既节约溶剂又可以将目标成分提取完
全。有关提取时间的考察 ,笔者曾取同一样品 6份 ,
各 1g,精密称定 ,精密加入甲醇 25 mL和氨试液
0.5 mL,分别按下列方法测定山莨菪碱含量:①超
声提取0.5h;②超声提取 1 h;③放置 1 h后超声提
取1 h;④超声提取 1.5 h。结果表明 ,方法③提取率
高 ,且费时短。故选择其作为提取溶剂 。
笔者采用高效液相法测定华山参中山莨菪碱的
·34· 　　中医研究　 2010年 10月　第 23卷　第 10期　TCMRes.October2010 Vol.23No.10　　
含量 ,方法操作简便 ,重现性好 ,分析快速准确 。
参考文献:
[ 1]江苏新医学院.中药大辞典:上册 [ M] .2版.上海:上海
科学技术出版社 , 1988:297.
[ 2]李松武 , 赵云荣 , 庆伟霞 , 等.华山参的研究进展 [ J] .济
源职业技术学院学报 , 2005, 4(6):8.
[ 3]陈泽乃 , 畅行若.华山参化学成分的研究 [ J] .中草药 ,
1981, 12(7):1.
收稿日期:2010-07-22;修回日期:2010-08-10
(编辑　陶　珠)
文章编号:1001-6910(2010)10-0035-02 ·临床研究·
加味小青龙汤治疗老年慢性阻塞性肺疾病 20例
韩景波 ,陈远平 ,麦丽莎
(广西中医学院第一附属医院干部病区 ,广西 南宁 530023)
关键词:加味小青龙汤 /治疗应用　慢性阻塞性肺疾病 /中医
药疗法　肺功能
中图分类号:R563.5　　文献标志码:B
　 　慢性 阻 塞 性 肺疾 病 (chronicobstructive
pulmonarydisease, COPD)是一种常见的多发的具有
高致残率和高致死率的慢性呼吸系统疾病 ,以不完
全可逆的气流受限为特点。据研究 ,该病已排在当
前死亡原因的第 4位 ,预计至 2020年将成为世界疾
病经济负担的第 5位[ 1] 。 2008-06— 2010-04 ,笔
者采用加味小青龙汤治疗老年慢性阻塞性肺疾病
20例 ,疗效满意 ,总结报道如下 。
1　临床资料
选择本病区住院及门诊就诊的慢性阻塞性肺疾
病患者 40例 ,随机分为治疗组和对照组。治疗组
20例 , 男 15例 , 女 5例;年龄 60 ～ 85岁 , 平均
(66.5±13.1)岁;病程 5 ～ 52年 ,平均(40.9±8.5)
年 。对照组 20例 ,男 14例 ,女 6例;年龄 60 ～ 84
岁 ,平均 (67.1 ±11.3)岁;病程 5 ～ 52年 , 平均
(40.7±8.9)年 。所有患者病情均为中度 , 无心 、
肝 、肾疾患或恶性肿瘤病史 。两组患者一般资料对
比 ,差别无统计学意义(P>0.05),具有可比性 。
2　病例选择标准
2.1　西医诊断标准
按照《慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2007年修
订版)》[ 2]相关标准 。
2.2　中医诊断标准
按照《中医内科学 》[ 3]相关标准。
2.3　中医辨证标准
中医辨证为寒饮伏肺 、风寒束肺型。临床表现:
喘急 ,胸闷 ,咳嗽 ,痰多清稀 ,或伴有恶寒发热 、头痛
等症 ,舌苔薄白 ,脉浮紧 。
3　治疗方法
对照组给予沙美特罗替卡松粉吸入剂(由葛兰
素史克公司生产 ,批号 R441604, 50 pg/100g),每次
1吸 ,每日 2次。
治疗组给予加味小青龙汤 , 药物组成:麻黄
10 g,桂枝 10 g,细辛 5g,干姜 10 g,半夏 10 g,白芍
10 g,五味子 10 g,甘草 10 g,肉苁蓉 10 g,淫羊藿
10 g,射干 10 g。每日 1剂 , 加水 1 400 mL, 煎
40 min,取药汁 300 mL,分为等份两袋 ,密封包装 ,
早晚各服 l袋 。该药由本院煎药室统一煎煮 。
两组均以 2周为 1个疗程 ,疗程间隔 2 d,治疗
2个疗程。
4　观测指标
观测治疗前后两组患者的中医症候(主症 、次症),
咳 、痰 、喘 、满发作的时间 、次数 、程度 、持续时间 、诱发原
因 ,血压 、脉搏 、体温 、呼吸 、舌 、脉等相关体征 ,胸部 X
线片 、血常规 、肺功能检查及血气分析 ,肺通气功能指
标(用力肺活量变化 、第一秒呼气容积 、最大通气量),
动脉血氧分压和二氧化碳分压的变化。
5　疗效判定标准
按照 《中医内科学》[ 3]相关标准。显效:咳嗽 、
咳痰 、喘息等呼吸道异常症状消失 ,实验室检查明显
好转 。有效:咳嗽 、咳痰 、喘息等呼吸道异常症状有
所好转 ,实验室检查指标有所恢复 。无效:治疗前后
临床症状 、相关检查均无改善 。
6　统计学方法
采用 SPSS11.0统计分析软件处理。计量资料
数据以均数 ( x)±标准差 (s)表示 , 组间比较采用
t检验;计数资料采用 χ2检验;等级资料采用 Ridit
·35·　　中医研究　 2010年 10月　第 23卷　第 10期　TCMRes.October2010 Vol.23No.10