全 文 ：重庆医科大学学报 2 0 0 3 年第 2 8 卷第 i 期 ( Jou r n a 一of e腼g q in g晚 d ica . 山 ive r s ity 2 00 3 . v o l . 2 8 NO 一 l )
文章编号 : 02 53 一 3 62 6 (2 00 3 )0 1一 0 084 一 03
H P L C 测定朱砂莲胶囊中马兜铃酸 A 的含量
陈 岂
(重庆医科大学临床学院药剂科 , 重庆 40 00 16)
【摘 要 1 目的 : 建立测定朱砂莲胶囊中马兜铃酸 A 的高效液相色谱法 。 方法 :采用高效液相色谱法 。 以十八烷基硅烷键合硅
胶 ( 250~ X 4 6~
,
5拌m )为色谱柱 ;流动相 : 甲醇 一 水 一 冰醋酸 (7 9 : 29 : 1 ) ;检测波长 : 3 15 ~ ;流速 : 1
.
o m lm/ in
。 结果 :马兜铃
酸 A 的加样回收率平均为 98 . 34 % , RDS 为 0
.
04 % (
n = 5 )
。 结论 :该方法准确 ,灵敏度高 ,重现性好 。
【关键词 1朱砂莲胶囊 ;马兜铃酸 A ;高效液相色谱法 。
【中国图书分类法分类号】咫 84 . 2 【文献标识码】A 【收稿日期】2002 一 01 一 07
D e t G rm in a t io n O f t h e C O n t e n t S O f a r is t o lO C h iC
a e id A in Z h u s h a lia n e a P s u le b y H P LC
C月五N oY 刀 g , e t a l
( eD加 r t m e n of hP a r m a 卿 , 肠11哪 t,f lC i n i ca l几e4( 2i c i n e , hC o n朋 i n g 左触才i ca l nU i二 .sr i t夕 )
【A b s t ar e t」Ol,j 二 21* : oT d e t e mr i n e th e con t e n t s o f ar is ot lco h i。 a e id A i n z h u s h a lia n c a p s u一e s
.八吸理人赫 : 。 xu m n hy p e r si l e l s ( 250~
只 4 . 6 n。 , s r。 ) M O b ile p ll a s e : 黝 lu t lon o f me t h ano l 一 w a t er 一 g lac ial ac e t ie ac id ( 7 9 二29 : 1 ) . 压 tec 、 ion w va e le n g t h : 3 15nm
.
F low
ar t e : 1
.
o m l俪 in . R 已 u l t 、 : rA is t o loc h i e a e id A was com p le t e ly s e p a ar t e d a n d no in t e r fe r e n e e wa s fou nd
.
T h e r e co
v e r y r a t e w a s 9 8
.
34 %
.
RDS w
a s o
.
0 4 % (
n = 5 )
. 肠 n e l u s i o 二 : T h is m e t ll ( x」 is s im p le , 、 e ns i t iv e , a e e u ar t e a n d r e liab le
【K e y 、 v o r ( 15 ] z h u s h a 一ia n 。 a p s u les ;舟i s r o loc h iC a e id A ;即cL
朱砂莲胶囊系由中药材朱砂莲经干燥 、粉碎 、填
充制成的单方中药制剂 ,具有清热解毒 、消肿止痛的
功能 。 临床用于热毒蕴结所致的牙痛 、 咽喉肿痛 、泻
痢腹痛 、痈疖肿痛 ; 民间 尚用于治疗迁延性肝炎 、肝
硬化等 。 马兜铃酸 A 是本品中主要有效特征成份 ,
具有一定的镇痛及抗炎作用 ,对其进行定量具有实
际意义 。 本实验采用 H P L C 测定朱砂莲胶囊中马
兜铃酸 A 的含量 , 以控制成药质量 ,效果 良好 ,定量
准确 ,快速 。
材料与方法
1
.
1 药品与试剂
样 品 : 朱砂莲胶 囊 ( 四川 松鹤 药业有 限公 司出品 ,
00 05 2 1 )
对照品 :马兜铃酸 A (中国药品生物制品检定所 , 746 一
9 () 02 )
。
作者介绍 : 陈 琶 ( 19 65 一 ) ,女 , 主管药师 ,
主要研究方向 : 药代动力学 。
试剂 : 乙醇 A R (成都科龙化工试剂厂 , 2 00 109 08 ) ; 甲醇
A R (沈阳化学试剂厂 , 2 00 10301 1 ) ; 冰醋酸 A R (重庆南方试
剂厂 , 1997 082 5 ) 。
1
.
2 仪器与色谱条件
仪器 :美国 P E 公司 235 C 一 25 0 高效液相色谱仪 ;梅特
勒 一 托利多 A E24 0 双量程电子天平 ;超声振荡器 。
色谱条件 : 十八烷基硅烷键合硅胶 2 50 ~ 只 4
.
6
~
,
5哪 (瑞士 KOP M A S IL产 ) ;流动相 : 甲醇 一水 一 冰醋酸 = 79
: 2 9 : z ( pH = 3
.
8 )
;检测波长 : 3 z s nr 〔l 〕;流速 : 1
.
om l俪 in ;柱
温 :室温 。 进样量 10川。
色谱条件选择 : 分别取对 照品溶 液及供试 品溶液各
10 闪 , 注人高效液相色谱仪中 ,按色谱条件进行试验 ,结果见
图 1。 结果表明 :样品基线分离良好。
1
.
3 供试品溶液及对照品溶液的制备
供试品溶液的制备 : 取朱砂莲胶囊内容物 , 精密称取
2 9
,研细 , 置索氏提取器中 , 加乙醇 80 ml , 置水浴加热 回流
Z h
, 浓缩至适量 , 放冷 , 滤过 , 用 乙醇分次洗涤容器 , 定容于
50 m l量瓶中 , 摇匀 , 即得 。
对照品溶液的制备 :精密称取马兜铃酸 A 对照品适量 ,
加乙醇使溶解 ,制成每 l m l含 0 . l mg 的溶液 , 即得 。
DOI : 10. 13406 /j . cnki . cyxb. 2003. 01. 027
重庆 医科大学学报 0 20 3 年第 8 2卷第 l期 (J or u n a lot e加 nq g in gM e d ie a l山 iv ers it yZo o3
.
v o一 25 吻 .1 )
共 尸溉一 缸 _
A
.空 白流动相图 ;B.马兜铃酸 A 对照 品 ;C.朱砂莲胶囊样品
图 1 色谱图
2方法学评价 作标准曲线 , 得回归方程 Y = 627 . 17 + 26 . 54 X , R 二
0
.
9 9 9 9 6
,结果表明马兜铃酸 A 在 0 . 2 一 1 . 0) 堪 范围
2
.
1 标准曲线 内与峰面积呈线性关系 。
取马兜铃酸 A 对照品溶液 2 、 4 、 6 、 8 、 10 浏 , 分别 2 . 2 稳定性试验
注入高效液相色谱仪中 , 得峰面积积分值分别为 取朱砂莲胶囊批号为 0 0 0 521 的供试品溶液保
5 9 6 2 7 7 8
、
1 13 9 4 3 2 0
、
1 6 8 3 1 8 8 1
、
2 2 3 19 1 5 0
、
2 7 5 5 3 9 1 8
, 留在容量瓶中 , 每小时测定 l 次 ( , , = 7 ) , 结果见表
以峰面积积分值 A 为纵坐标 , 进样量 m g 为横坐标 , 1 。 表明 ;马兜铃酸 A 在 6 h 内稳定 , R S D 为 0 . 59 % 。
表 1 稳定性试验
贮存条件
t j h
测得色谱峰面积积分值
Zh 3h
室 温 1102 58 93 11 136 15 1 1 10 67 869
2
.
3 精密度实验
取对照 品溶液 , 按 上述色谱条件进行分析 , 每
11 102 687 10 92 17 16 1100 1124 10 9 27 144
3O n 飞i n 进样 l 次 ( 、 = 6 ) , R SD 为 0
.
4 8 %
。
2
.
4 空白试验
本品为单方制剂 , 胶囊是原料未经提取直接填充
2
.
5 加样 回收率实验
取五批已知含量 的朱砂莲胶囊各 2 9 , 分别精密
加人对照品溶液 2川 ,按供试品溶液制备法同法制备 ,
定容于 5 0 m l 量瓶中依法测定 , 结果见表 2 。 表明平
均加样回收率 9 8 . 3 4 % , RDS 为 0 . 0 4 % 。
制成的 。 故本实验采用溶剂空白对照 ,无干扰 。
表 2 加样回收率实验
样品批号 进样量
(拜l )
平均峰面积 马兜铃酸 A 加人量
(产艰 )
马兜铃酸 A 回收量
( z
, g )
回收率
(
`殆 )
平均回收率
(
`殆 )
R S I )
(
`沁 )
00 05 2 1
98
.
3 1
0 10 7 27
9 8
.
36
0 10 804
98
.
34 ()
.
0 4
:
OC公Q产9
0 10 807
0 10 8 14
1 102 58 93
1654 40 70
1 164 67 68
168 3 1 647
1 14 5 14 4 0
1704 6 25 1
12 155 682
175 0 10 87
1112 1052
164 1 1606
0
0
.
20
0
0
.
2 0
0
0
.
2 0
0
0
.
2
0
0
.
2
0
.
39
0
.
58
0
.
4 1
0
.
60
()
.
4 ( )
0
.
59
0
.
43
0
,
6 2
()
.
38
0
,
57 98 2 8
重庆医科大学学报 2 0 03 年第 2 8卷第 l期 (如 r n a l ot e腼 g q in g决 d ie a l nu ive r s i ty Z o 03 . v o l. 2 8 N o l )
2
.
6 样品的含量测定
分别精密吸取对照品溶液与样品溶液 10 川 ,注
人高效液相色谱仪 ,依上述色谱条件 , 以外标法计算
含量 ,测定了 5 批样品 ( n = 2 ) , 结果见表 3 。
表 3 朱砂莲胶囊 5 个批次含量测定
序号 样品批号 马兜铃酸 A / r l l g 龟 R SD ( % )
4 讨 论
内J勺`nU,1
2
月咔
4
一、ùù卜à勺
:
,
八曰ln`lǎ日1.2801640 10 32 1
0 104 12
0 10 5 18
0 10 526
0 106 04
l
勺一,J夕斗ù、à
3 结 果
采用 11 1〕 L C 测定朱砂莲胶囊中马兜铃酸 A 的
含量 ,其样品及标准品基线分离良好 ;标准曲线线性
分析 R = 0 . 9 9 9 9 6 ;本测定方法在 6 h 内稳定 , R SD =
0
.
5 9% :精密度 实验 ( n = 6 ) R SD = 0 . 4 8% :平均加
样回收率 9 8 . 34 % , RDS 二 0 . 0 4 % 。 实验结果表明 ,
该方法准确 , 灵敏度高 ,重现性好 , 可作为朱砂莲胶
囊中马兜铃酸 A 含量的测定方法 。
用 H P L C 测朱砂莲胶囊中马兜铃酸 A 含量尚
未见报道 , 参考文献 〔1 , 2」对采用 H l〕 L C 测定朱砂
莲胶囊中马兜铃酸 A 的含量进行了系统实验研究 ,
其中样品的纯化沿用文献 〔2」中鉴别项下供试品制
备方法 ,结果本法提取较为完全 ,系统误差较小 。 在
色谱条件流动相选择上 ,对 甲醇 一水 一 冰醋酸的比
例进行了对比性选择实验 ,结果其比例为 79 : 29 : 1
时样品分离最好 。
除本文 H P L C 法外 , 尚有采用薄层扫描法测定
朱砂莲胶囊中马兜铃酸 A 的含量 ,通过两种方法对
比性实验表明 , H l〕 L C 法定量分析准确 , 灵敏度高 ,
重现性好 。 目前此法己被生产企业所采用 ,并作为
法定标准申报 。
参 考 文 献
〔1 ] 赵陆化 . 高效液相色谱法中药成分手册 〔M 〕. 北京 :科
学技术出版社 , 1992 ; 18 1 ·
[2 〕 卫生部药品标准 . 中药成方制剂第十五册【M 〕. 41 .
(上接第 83 页 )循环 ,往往能大大提高脑复苏成功率 ,
改善预后 。 我组资料显示 A 组患者自主心跳恢复
的 时间平 均 为 3 . 5 土 0 . 7m in , 而 B 组患 者 为 7 . 0
士 1 . 2m in , A 组 明显短于 B 组 (尸 < 0 . 05 ) ,这就提示
C P R 时经中心静脉通道给药能明显缩短 自主循环
恢复时间 ,为后期的脑复苏奠定 了很好的基础 。 因
此 ,推荐在有条件和技术的医院 ,心肺复苏时应尽可
能行横隔以上的中心静脉穿刺置管 , 尤其是锁骨下
静脉穿刺 ,这样不仅为复苏药物提供了最有效的给
药途径 ,而且也为快速输液 、输血和经静脉紧急起搏
提供了有效血管通道 。
参 考 文 献
仁1」 李春盛 . 应掌握现代复苏时药物应用的原则仁J〕. 中国
危重病急救医学 , 2 000 ; 12 ( 1 1 ) : 6 43 一 6 44 .
〔2 〕 dA v anc ed life su p l ) ) r t wor k in g g
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( )
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T h e l 9 98 E u r o l〕 ea n R es u s e it a t io n 肠 u n e il即 id e lin es fo r
a d u lt ad
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r t [ J〕. 13 r M e d J , 199 8 ; 3 16 : 18 63 -
186 9
.
[ 3 〕 K u h n GJ , w h it e BC , wS e t n am R E , e t a l . P e r ip h e ar l v s
e e n t ar l e icr u l a t io n t im es d u r i明 CP R : A p ilo t S t u dy 〔J ]
.
A n 1 E
-
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f 4乃 H ed g es JR ,巍sar n W B , D :犯 n L A , e t a l . C e n t ar l v e sr u s p e -
r ip h e ar l in tar v eno
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仁5」 E n lemar
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1988 ; 16 ( 11 )
: 1138 一 1 14 1
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