全 文 ：W 叨 · 研究论文
不同产地山合欢皮 指纹图谱的研究
干国平 朱红 师磊 史克莉 刘众文 湖北中医学院“中药资源与中药复方”省部共建教育部重点实验室 武汉
摘 要 目的 建立山合欢皮正丁醇部位的指纹图谱 。方法 采用 法 , 色谱柱 , 卜 流
动相 甲醇一乙猜刁 磷酸溶液 ,梯度洗脱 流速 · 一 柱温 ℃ 检测波长 参照物 。结果 确定
了 个共有峰 ,得到了以淫羊蓉次普 为参照物的保留时间和相对峰面积 ,并利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统 》计
算相似度。结论 采用 指纹图谱技术 ,可作为山合欢皮药材的质量控制。
关键词 山合欢皮 高效液相色谱 指纹图谱
中图分类号 文献标识码 文章编号 城科 刀 一
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山合欢皮为豆科植物山合欢 碗 肋
的树皮 ,在我国北京 、山西 、河北 、河南 、江苏 、江西 、湖
南 、四川等地区混作合欢皮药用川 。合欢皮具有镇静 、增强
免疫以及抗生育的作用 。由于合欢皮的生长年限较长 ,而市
场需求量较大 ,导致合欢皮的资源日益匾乏 ,有必要找寻其
代用品 。现代研究表明山合欢皮与合欢皮的药理作用基本
相同 ,山合欢具有资源丰富 、毒性小等优势 。前期药理试验
研究表明 ,山合欢皮的正丁醇部位为其镇静安神有效部位 。
为了开发利用该药用资源 ,本文通过对不同产地的山合欢皮
正丁醇部位指纹图谱进行了研究。
仪器与试药
高效液相色谱仪 , 一 紫外检测器 淫
羊霍次昔 对照品 自制 ,含量为 。
批不同产地的山合欢皮 ,经本院鉴定教研室鉴定 。
方法与结果
色谱条件
色谱柱 , 卜 ,流动相
甲醇一乙睛习 磷酸溶液 ,梯度洗脱 ,见表 ,流速 卜
而 一 柱温 ℃ 检测波长 。
对照品溶液的制备
精密称取淫羊蕾次昔 适量 ,加甲醇制成 一的
溶液 ,即得 。
表 梯度洗脱程序
时间 乙睛 甲醇 磷酸
供试品溶液的制备
取样品适量 ,粉碎 ,过 号筛 ,取约 ,精密称定 ,置具塞
锥形瓶中 ,精密加人 乙醇 耐 ,称定重量 ,浸泡 后 ,
超声提取 ,放冷至室温 ,用 乙醇补足减失重量 ,摇
匀 ,滤过 ,精密吸取续滤液 ,水浴蒸干 ,残渣加水
溶解后 ,用乙酸乙醋萃取 次 ,每次 耐 ,弃去乙酸乙醋液 ,
水液再用水饱和的正丁醇萃取 次 ,每次 ,合并正丁醇
液 ,水浴蒸干 ,残渣加甲醇溶解并定容至 量瓶中 ,作为供
试品溶液。
精密吸取供试品溶液 闪 , 注入液相色谱仪 , 记录
色谱图 ,以参照物 的色谱峰 的保留时
间和峰面积为 ,计算各峰相对保留时间和相对峰面积 。
稳定性试验
以 号药材样品提取所得供试品溶液为考察对象 ,分别
在制备当日 , , , , , 进行测定 ,记录各共有峰保
基金项目 侧 年湖北省教育厅 自然科学类重点科研项目 】卫
作者简介 干国平 ,男 ,副教授 ,研究方向 中药分析及新药开发 。 一 叩 。。
通讯作者 刘众文 ,教授 ,博导 。
尤尹
中国药师 年第 卷第 期 。外 , 。
留时间和峰面积 , 以参照峰的保留时间和峰面积为参照 ,换 比值 。结果 ,各共有峰相对保留时间和相对峰面积的
算出各共有峰的相对保留时间和峰面积比值 。结果 ,各共有 均小于 ,表明供试品重复性较好 。
峰相对保留时间的尺 小于 ,各共有峰相对峰面积的 批药材指纹图谱的测定
小于 ,表明供试品溶液在 内稳定。 共有峰的标定 根据 批药材指纹图谱有关数据
精密度试验 的计算结果 ,共有峰平均相对保留时间 峰号 依次为
以 号样品提取所得供试品溶液为测定对象 ,连续进样 , , , , ,
次 ,记录各共有峰保留时间和峰面积 ,结果 ,各共有峰相对 , , , , ,
保留时间和相对峰面积的尺刀均小于 ,表明仪器精密 , , , , ,
度良好 。 , , , ,
重复性试验 , , , , 抖 , ,以 〕
取 号样品 份 ,按上述方法制备供试品溶液并进行测 。以此作为供试品指纹峰标定的依据 ,允许尺 ,
定 ,记录各共有峰保留时间和峰面积 ,以参照峰的保留时间 各批指纹图谱的相关数据见表 ,表 。
和峰面积为参照 ,换算出各共有峰的相对保留时间和峰面积
表 批药材指纹图谱共有峰的相对保留时间
编号 弘 平均值
八︻飞门,︸的仓住。
《
,
,
以刃 口以 洲洲
如
【刃 《 以刃
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洲洲
石
《 旧
巧
《 刃
二巧
注 由于峰面积太小 ,无法积分
表 , 批药材指纹图谱共有峰的相对峰面积
共有峰 弘 防 即
《
《沁 水
名尸
W W w · 研究抢文
续表
共有峰
《
《 洲 《刃
,
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中落
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《刃
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科
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刃 〕以
注 由于峰面积太小 ,无法积分
共有指纹峰相对保留时间和峰面积比值结果分析
批药材指纹图谱中 ,共有峰的相对保留时间的人 ,
显示各样品的 教 性较好 。 批药材指纹图谱中共有峰面
积占总峰面积均大于 ,各非共有峰面积占总峰面积均小
于 ,符合 《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求 暂
行 》中要求。
色谱峰的归属 取 一呱吮酸 、 一 一丁香树脂酚
, “ 一一一葡萄糖昔 、 一 一丁香树脂酚礴一一一一葡萄糖
昔 、淫羊蕾次昔 对照品溶液 ,按上述色谱条件 ,进样分析 ,
结果 , 号峰为 一呱陡酸 , 号峰为 一
一丁香树脂酚 , “ 一一一葡萄糖昔 。二 , 号
峰为 一 一丁香树脂酚 一一一一葡萄糖昔 。二
而 , 号峰 为淫羊蕾次昔 。
不同批号样品指纹图谱相似度的计算 利用中药
色谱指纹图谱相似度评价系统 以科 版 〕 国家药典委员
会 ,采用平均矢量法 ,以指纹向量间的相关系数 ,考察不
同批号样品指纹图谱相似性 。经计算 ,各批号样品的相似度
分别为 , , , , , , ,
, , 。
标准指纹图谱的建立 根据 批药材 图谱
所给出的相关参数 ,按前述制备方法进行测定 ,所得的主要
色谱峰在 内出现 , 供试溶液色谱峰表明 , 而
后未出现色谱峰 , 比较各批样品的色谱图 ,有 个色谱峰是
共有的 ,由此建立标准指纹图谱 ,见图 、图 。
讨论
本文曾对测定波长进行了考察 ,结果在 处检测 ,
色谱峰数最多 ,故选择 波长作为测定波长。
」 日一一性
一 派陡酸 一 一丁香树脂酚 , “ 一一一葡萄糖昔
一 一丁香树脂酚 一一一一葡萄糖昔 淫羊霍次昔
图 参照物色谱图
中药材的质量受多种因素的影响 ,采用指纹图谱方法可
以从整体上对中药材的质量进行综合评价和控制 。本试验
采用 法对山合欢皮的正丁醇部位进行指纹图谱研究 ,
测定方法的精密度 、稳定性 、重复性均良好 ,所得图谱能较全
面地反应山合欢皮正丁醇部位主要成分的分布特征 。各批
号样品的相似度均在 一 ,表明各产地的山合欢皮药材
在化学组成方面具有显著的相似性 ,可以作为山合欢皮药材
质量控制和品质评价的方法 。同时 ,不同产地药材各共有峰
面积比值 尺 较大 ,表明化学成分的含量差异较大 ,这是否
与产地及生长年限有关 ,还有待进一步研究 。
参 考 文 献
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卫生部药政管理局 ,中国药品生物制品检定所 中药材手册 〔 〕北京 人
民卫生出版社 , 一
国家药典委员会 , 中药色谱指纹 图谙相似度评价 系统的操作规范 【
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山合欢皮的标准指纹图谱
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