全 文 ：中国药房 2016年第27卷第27期 China Pharmacy 2016 Vol. 27 No. 27
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（收稿日期：2015-12-19 修回日期：2016-07-16）
（编辑：刘 柳）
＊副主任药师。研究方向：药物分析。电话：0851-86807025。
E-mail：qiyoo_king@sina.com
# 通信作者：主任药师。研究方向：药物分析。电话：0851-
86808035。E-mail：499929857@qq.com
HPLC法测定八角枫药材不同药用部位中L（-）-八角枫碱的含量
王其勇＊，许亚玲 #（贵州省食品药品检验所，贵阳 550004）
中图分类号 R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2016）27-3877-03
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.27.45
摘 要 目的：建立测定八角枫药材不同药用部位（茎、根茎、须根及支根）中L（-）-八角枫碱含量的方法，为八角枫药材的开发利
用提供参考。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Thermo C18，流动相为甲醇-磷酸缓冲液（22 ∶78，V/V），流速为1.0 ml/min，检测
波长为259 nm，柱温为30℃，进样量为10 μl。结果：L（-）-八角枫碱的进样量线性范围为0.020 62～0.257 80 μg（r＝0.999 9）；定量
限为1.7 ng，检测限为0.5 ng；精密度、稳定性、重复性试验的RSD＜2％；加样回收率为97.38％～98.86％（RSD＝0.6％，n＝6）。不
同药用部位中L（-）-八角枫碱含量，须根＞支根＞根茎＞茎。结论：该方法操作简便、结果准确、重复性好、专属性强，适用于测定
八角枫药材不同药用部位（茎、根茎、须根及支根）中L（-）-八角枫碱的含量。
关键词 高效液相色谱法；八角枫；L（-）-八角枫碱；不同药用部位
Content Determination of L（-）-Anabasine in Different Medicinal Parts of Alangium chinense by HPLC
WANG Qiyong，XU Yaling（Guizhou Institute for Food and Drug Control，Guiyang 550004，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a method for the content determination of L（-）-Anabasine in different medicinal parts
（stem，rhizome，fibrous root，rootlet）of Alangium chinense，and provide reference for its development and utilization. METH-
ODS：HPLC was performed on the column of Thermo C18 with mobile phase of methanol-phosphate buffer solution（22 ∶ 78，V/V）at
a flow rate of 1.0 ml/min，the detection wavelength was 259 nm，column temperature was 30 ℃；the injection volume was 10 μl.
RESULTS：The linear range of L（-）-Anabasine was 0.020 62-0.257 80 μg（r＝0. 999 9）；the limit of quantitation was 1.7 ng，limit
of detection was 0.5 ng；RSDs of precision，stability and reproducibility tests were lower than 2％；recovery was 97.38％-98.86％
（RSD＝0.6％，n＝6）. The content of L（-）-Anabasine in different medicinal parts was the fibrous root＞the rootlet＞the rhizome＞
the stem. CONCLUSIONS：The method is simple，accurate，reproducible and specific，and suitable for the content determination
of L（-）-Anabasine in different medicinal parts（stem，rhizome，fibrous root，rootlet）of A. Chinense.
KEYWORDS HPLC；Alangium chinense；L（-）-Anabasine；Different medicinal parts
􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎􀤎
八角枫收载于 2003年版《贵州省中药材及民族药材质量
标准》，为八角枫科植物八角枫 Alangium chinense（Lour.）
Harms及瓜木 Alangium platani f olium（Sieb. Et Zucc.）Harms
的干燥细须根（白龙须）或干燥支根（白金条）[1]，而 2015年版
《中国药典》未收载该药材。八角枫药材生于280～1 800 m的
山地或疏林中，喜温暖潮湿气候，分布于河南、陕西、甘肃、西
藏南部、云南、四川、湖南、湖北、广西、广东、江西、江苏、浙江、
福建、台湾、贵州等省区，全年均可采挖[2]。其在贵州全省均有
分布，为贵州省少数民族用药，具有祛风通络、散瘀镇痛、麻醉
及松弛肌肉等功效[3-5]，可用于治疗风湿疼痛、麻木瘫痪、心力衰
竭、劳损腰痛、跌打损伤等证。其须根含生物碱（即八角枫碱），
是松弛肌肉的主要活性成分，也是其毒性的主要来源[6-8]。八角
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枫药材传统以须根入药，其他部位（支根、根茎、茎等）几乎不
用，这对其资源造成了极大的浪费。如果其他部位也含有八
角枫碱，那么这些部位就能和须根一样入药使用，从而提高八
角枫药材的使用率。笔者查阅相关文献[9-14]，发现除须根外，均
未有其他部位的分析研究以及有效成分测定的报道。因此，
笔者采用高效液相色谱法（HPLC）对八角枫药材不同药用部
位进行测定，以期为八角枫药材的开发利用提供参考。
1 材料
1.1 仪器
UltiMate 3000型HPLC仪，配有四元梯度泵、在线脱气装
置、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、变色龙色谱处理
系统（美国Thermo Fisher Scientific公司）；240型十万分之一电
子天平（瑞士Mettler-Toledo公司）。
1.2 试剂
L（-）-八角枫碱对照品[阿法埃莎（天津）化学有限公司，批
号：10110058，纯度：94.0％]；甲醇（美国Tedia公司）为色谱纯，
三氯甲烷（国药集团化学试剂有限公司）、庚烷磺酸钠（上海阿
拉丁生化科技股份有限公司）、冰乙酸（天津市富宇精细化工
有限公司）、磷酸二氢钾（天津市致远化学试剂有限公司）为分
析纯，水为自制超纯水。
1.3 药材
本试验共收集到10批样品（样品信息见表1），均产于贵州
省毕节地区织金县，并由贵阳中医学院陈德媛研究员鉴定为
八角枫Alangium chinense（Lour.）Harms的干燥细须根、支根、
根茎、茎。
表1 八角枫药材10批样品信息
Tab 1 Information of 10 batches of samples of A. chinense
样品批号
20100607
20120601
20110126
20110818
20111228
药材部位
须根
支根
根茎
根茎
根茎
样品批号
20111123
20111014
20120502
20120426
20120313
药材部位
根茎
根茎
根茎
茎
茎
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Thermo C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲
醇-磷酸缓冲液（0.2 g庚烷磺酸钠、2.0 g磷酸二氢钾、0.3 ml磷
酸置于1 000 ml量瓶中，加水定容，摇匀）（22 ∶ 78，V/V）；流速：
1.0 ml/min；检测波长：259 nm；柱温：30℃；进样量：10 μl。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液 精密称取 L（-）-八角枫碱对照品 10.97
mg，置于100 ml量瓶中，加甲醇溶解并定容，摇匀，即得对照品
贮备液。精密量取上述贮备液 5 ml，置于 50 ml量瓶中，加
甲醇溶解并定容，摇匀，即得质量浓度为 10.31 μg/ml的对照
品溶液。
2.2.2 供试品溶液 取样品粉末（过四号筛）适量，约0.5 g，精
密称定，置于 100 ml锥形瓶中，精密量取酸性甲醇溶液（取甲
醇30 ml，用5％乙酸溶液稀释至100 ml）25 ml，称定质量，置水
浴上回流提取30 min，放冷，用酸性甲醇溶液补足减失的质量，
经0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2.2.3 阴性对照溶液 取“2.2.2”项下酸性甲醇溶液作为阴性
对照溶液。
2.3 系统适用性与专属性试验
精密量取“2.2”项下对照品溶液、供试品溶液和阴性对照
溶液各10 μl，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱，详见
图 1。由图 1可知，在该色谱条件下，各成分均能达到基线分
离，分离度＞1.5；理论板数以L（-）-八角枫碱峰计为6 500；保留
时间为13.32 min。结果表明，其他成分对测定无干扰。
2.4 线性关系考察
分别精密量取“2.2.1”项下对照品溶液2、5、10、15、20、25 μl，
按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以进样量（x，μg）为
横坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性回归，得L（-）-八角枫碱
的回归方程为y＝966 993.714 6x+544.252 9（r＝0.999 9）。结果
表明，L（-）-八角枫碱的进样量线性范围为 0.020 62～0.257 80
μg。
2.5 定量限与检测限考察
取“2.2.1”项下对照品溶液适量，等倍逐步稀释，按“2.1”项
下色谱条件连续进样测定6次，记录峰面积。当信噪比为10 ∶1
时，得定量限为1.7 ng；当信噪比为3 ∶1时，得检测限为0.5 ng。
2.6 精密度试验
精密吸取“2.2.1”项下对照品溶液适量，按“2.1”项下色谱
条件进样测定，记录峰面积。结果，L（-）-八角枫碱峰面积的
RSD＝0.4％（n＝6），表明仪器精密度良好。
2.7 稳定性试验
取同一供试品溶液（批号：20120601）适量，分别于室温下
放置0、2、4、6、8、10、12 h时按“2.1”项下色谱条件进样测定，记
录峰面积。结果，L（-）-八角枫碱峰面积的RSD＝0.2％（n＝
7），表明供试品溶液在室温下12 h内稳定性良好。
2.8 重复性试验
取样品（批号：20120601）粉末适量，按“2.2.2”项下方法制
6.00
4.00
2.00
0.00
－1.00
mA
U
0 4 8 12 16 20 24 28
t，min
A
1
6.00
4.00
2.00
0.00
－1.00
mA
U
1
0 5 10 15 20 25 30
t，min
B
4.00
3.00
2.00
1.00
0.00
－1.00
mA
U
0 4 8 12 16 20 24 28
t，min
C
图1 高效液相色谱图
A.对照品；B.供试品；C.阴性对照；1.L（-）-八角枫碱
Fig 1 HPLC chromatograms
A.reference substance；B.test sample；C.negative control；1.L（-）-Anaba-
sine
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备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积
并计算平均含量。结果，L（-）-八角枫碱的平均含量为1.254 4
mg/g，RSD＝1.2％（n＝6），表明本方法重复性良好。
2.9 加样回收率试验
取样品（批号：20120601）粉末适量，共6份，每份约0.25 g，
精密称定，置于100 ml锥形瓶中，精密加入一定质量的L（-）-八
角枫碱对照品，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”
项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收率，结果
详见表2。
表2 加样回收率试验结果（n＝6）
Tab 2 Results of recovery test（n＝6）
取样量，g
0.250 3
0.250 8
0.250 0
0.250 9
0.250 4
0.250 5
样品含量，mg
0.314 0
0.314 6
0.313 6
0.314 7
0.314 1
0.314 2
加入量，mg
0.309 4
0.309 4
0.309 4
0.309 4
0.309 4
0.309 4
测得量，mg
0.615 6
0.616 4
0.614 9
0.618 1
0.618 6
0.620 1
加样回收率，％
97.49
97.57
97.38
98.07
98.43
98.86
平均加样回收率，％
98.0
RSD，％
0.6
2.10 样品含量测定
分别取 10批样品各适量，按“2.2.2”项下方法制备供试品
溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算
L（-）-八角枫碱的含量，结果详见表3。
表3 样品含量测定结果（n＝2，％）
Tab 3 Results of content determination of sample（n＝2，％）
样品批号
20100607
20120601
20110126
20110818
20111228
20111123
20111014
20120502
20120426
20120313
药用部位
须根
支根
根茎
根茎
根茎
根茎
根茎
根茎
茎
茎
L（-）-八角枫碱含量
0.95
0.13
0.034
0.040
0.030
0.032
0.037
0.033
0.016
0.018
RSD
0.
1.2
1.4
0.
0.
1.6
0.
0.
3.2
0.
3 讨论
3.1 提取溶剂的选择
取甲醇、三氯甲烷以及酸性甲醇溶液各适量，分别按
“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进
样测定。结果，酸性甲醇溶液作为提取溶剂时，色谱峰峰形较
好，主峰与相邻峰的分离度＞1.5，且L（-）-八角枫碱的含量最
高。因此，本试验选择酸性甲醇溶液为提取溶剂。
3.2 各部位八角枫碱的含量比较
八角枫药材所含生物碱以L（-）-八角枫碱为主，通过本试
验表明该药材各部位均含有L（-）-八角枫碱，含量依次为须根
＞支根＞根茎＞茎，其中须根为0.95％，支根为0.13％，根茎为
0.030％～0.040％，茎为0.016％～0.018％。但是，须根是毒性
最大的部位，会引起中毒情况，因此可降低须根的使用量，而
增加支根和根茎的用量，这既可保证疗效，又可减少使用该药
材而导致的中毒情况[15]。
3.3 合理的开发利用
目前，对八角枫药材须根的研究报道较多，比如对水杨
苷、生物碱的含量测定，毒理以及临床应用等，但是对其他部
位（支根、根茎、茎等）的研究报道较少，这与八角枫药材的传
统用药方式有关。该药材主要以野生为主，传统以须根入药，
其余部位几乎很少使用。近年来，八角枫药材在贵州省中成
药中的应用逐渐增多，随着使用量的增加，其野生资源也越来
越少，而单用其他部位入药又达不到相应的疗效，造成其他部
位药材使用率较低，形成资源浪费。因此，打破用药常规，合
理的利用支根、根茎等药用部位，将各部位配合使用以缓解须
根资源不足很有必要。八角枫药材在贵州以野生为主，四季
均可采挖，不同产区及采收期收集的药材其质量会有不同，由
于本试验收集的样品有限，给出的试验数据未能全面反映该
药材的质量情况，因此进一步对生长环境、采收季节、产地加
工等影响药材质量的因素进行考察很有必要。
综上所述，本方法操作简便、结果准确、重复性好、专属性
强，适用于测定八角枫药材不同药用部位（茎、根茎、须根及支
根）中 L（-）-八角枫碱的含量。
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（编辑：刘 柳）
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