全 文 ：延边大学医学学报 ２０１３年６月 第３６卷 第２期
［参 考 文 献］
［１］ Ｍｉｃｈａｅｌ ＲＢ，Ｇａｒｙ ＪＣ，Ｌｅｓｔｅｒ ＡＤ，ｅｔ ａｌ．．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ｏｆ ｐｈｅｎｙｌｉｓｏｘａｚｏｌｉｎｅｓ ａｓ ｎｏｖｅｌ ａｎｄ ｖｉａｂｌｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ
ａｇｅｎｔｓ ａｃｔｉｖｅ ａｇａｉｎｓｔ ｇｒａｍ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ［Ｊ］．
Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ，２００３，４６（２）：２８４．
［２］ Ｗａｋｉｔａ Ｔ，Ｋｉｎｏｓｈｉｔａ Ｋ，Ｙａｍａｄａ Ｅ，ｅｔ ａｌ．．Ｔｈｅ ｄｉｓｃｏｖ－
ｅｒｙ ｏｆ ｄｉｎｏｔｅｆｕｒａｎ：ａ ｎｏｖｅｌ ｎｅｏｎｉｃｏｔｉｎｏｉｄ［Ｊ］．Ｐｅｓｔ Ｍａｎ－
ａｇ Ｓｃｉ，２００３，５９：１０１６．
［３］ Ｂｕｒｃｈ ＨＡ，Ｗｈｉｔｅ ＲＥ，Ｗｒｉｇｈｔ ＧＣ，ｅｔ ａｌ．．Ｐｈｅｎｙｌ－
ｆｕｒａｎｓⅣ：Ｓｐａｓｍｏｌｙｔｉｃ ３－ｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ－２，２－（ｄｉｍｅｔｈｙｌ）
ｐｒｏｐｙｌ ｅｓｔｅｒｓ ｏｆ ５－ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ ｐｈｅｎｙｌ－２－ｆｕｒａｎｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ
ａｃｉｄｓ［Ｊ］．Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ，１９８０，６９：１０７．
［４］ Ｐｅｌｏｓｉ ＳＳ．５－Ｐｈｅｎｙｌ－２－ｆｕｒａｍｉｄｏｘｉｍｅｓ［Ｊ］．ＵＳ Ｐａｔｅｎｔ，
１９７６，３９４６０４９．
［５］ Ｃｈｅｎ ＺＨ，Ｚｈｅｎｇ ＣＪ，Ｓｕｎ ＬＰ，ｅｔ ａｌ．．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｎｅｗ
ｃｈａｌｃｏｎｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ａ ｒｈｏｄａｎｉｎｅ－３－ａｃｅｔｉｃ
ａｃｉｄ ｍｏｉｅｔｙ ｗｉｔｈ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｎｔｉ－ｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．
Ｅｕｒ Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ，２０１０，４５：５７３９．
［６］ Ｓｕｎ ＬＰ，Ｓｈｅｎ Ｑ，Ｐｉａｏ ＨＨ，ｅｔ ａｌ．．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｂｉｏ－
ｌｏｇｉｃａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ （±）－３－（２－（２－ｆｌｕｏｒｏｂｅｎｚｙｌｏｘｙ）
ｎａｐｈｔｈａｌｅｎ－６－ｙｌ）－２－ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｏｉｃ ａｃｉｄ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ａｓ
ｎｏｖｅｌ ＰＴＰ１Ｂｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｅｕｒ Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ，２０１１，
４６：３６３０．
［７］ 袁勇，周成合，刘嫱，等．新型合成抗菌药物研究新进展
［Ｊ］．中国新药杂志，２００７，１６（５）：３４３．
欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍
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［收稿日期］ ２０１２－１０－２９
［作者简介］ 金慧颖（１９８９—），女（朝鲜族），硕士研究生，研
究方向为民族药质量标准．
［通信作者］ 姜英子，Ｅｍａｉｌ：ｙｚｊｉａｎｇ＠ｙｂｕ．ｅｄｕ．ｃｎ．
万年蒿细粉与水煎剂的急性毒性
金慧颖１，朴光春１，耿聪２，徐影３，姜英子１
（１．延边大学药学院，吉林 延吉１３３００２；２．吉林大学药学院，吉林 长春１３００２１；３．北京星昊医药股份有限公司，北京１００１７６）
［摘要］ ［目的］评价万年蒿细粉及水煎剂对小鼠的急性毒性．［方法］采用最大给药量法测定万年蒿
细粉的最大给药量；采用改良寇氏法测定万年蒿水煎剂的ＬＤ５０．［结果］小鼠对万年蒿细粉的最大给药
量为生药１５ｇ／ｋｇ，相当于人日常用药的６０倍；万年蒿水煎剂的小鼠急性经口ＬＤ５０为１０４．４０ｇ／ｋｇ，９５％
可信限为９５．４６～１１４．１８ｇ／ｋｇ．［结论］在本实验条件下，万年蒿细粉无明显急性毒性反应；万年蒿水煎
剂为实际无毒级．
［关键词］ 万年蒿；急性毒性；小鼠
［中图分类号］ Ｒ ２８５．１ ［文献标志码］ Ａ ［文章编号］ １０００－１８２４（２０１３）０２－０１０９－０３
Ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｆｉｎｅ ｐｏｗｄｅｒ ａｎｄ ｗａｔｅｒ ａｐｏｚｅｍ ｏｆ ｔｈｅ Ａｒｔｅｍｉｓｉａ
ｓａｃｒｏｒｕｍＬｅｄｅｂ ｆｏｒ ｍｉｃｅ
ＪＩＮ Ｈｕｉ－ｙｉｎｇ１，ＰＩＡＯ Ｇｕａｎｇ－ｃｈｕｎ１，ＧＥＮＧ Ｃｏｎｇ２，ＸＵ Ｙｉｎｇ３，ＪＩＡＮＧ Ｙｉｎｇ－ｚｉ １
（１．Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｙａｎｊｉ １３３００２，Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ；２．Ｊｉｌｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，
Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３００２１，Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ；３．Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｘｉｎｇｈａｏ Ｃｏｍｐａｎｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ＆Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １００１７６，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥＴｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｆｉｎｅ ｐｏｗｄｅｒ ａｎｄ ｗａｔｅｒ ａｐｏｚｅｍ ｏｆ ｔｈｅ Ａｒｔｅｍｉｓｉａ
ｓａｃｒｏｒｕｍ Ｌｅｄｅｂ（Ａ．ｓａｃｒｏｒｕｍ）ｆｏｒ ｍｉｃｅ．ＭＥＴＨＯＤＳＴｈｅ ｆｉｎｅ ｐｏｗｄｅｒ ｏｆ Ａ．ｓａｃｒｏｒｕｍ ｗａｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ
ｗｉｔｈ ｍａｘｉｍｕｍ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｄｏｓａｇｅ，ａｎｄ ｍｅｄｉａｎ ｌｅｔｈａｌ ｄｏｓｅ（ＬＤ５０）ｏｆ ｔｈｅ ｗａｔｅｒ ａｐｏｚｅｍ ｏｆ Ａ．ｓａｃｒｏｒｕｍ
ｉｎ ｍｉｃｅ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｋａｂｅｒ ｍｅｔｈｏｄ．ＲＥＳＵＬＴＳＴｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｄｏｓａｇｅ ｗａｓ １５
ｇ／ｋｇ ｏｆ ｆｉｎｅ ｐｏｗｄｅｒ ｏｆ Ａ．ｓａｃｒｏｒｕｍｉｎ ｍｉｃｅ，ｔｈａｔ ｗａｓ ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ｔｏ ｍａｎ’ｓ ｄａｉｌｙ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｄｏｓａｇｅ ｂｙ
６０ｔｉｍｅｓ，ａｎｄ ＬＤ５０ｏｆ ｗａｔｅｒ ａｐｏｚｅｍ ｏｆ Ａ．ｓａｃｒｏｒｕｍ ｗａｓ １０４．４０ｇ／ｋｇ，９５％ｏｆ ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅ ｉｎｔｅｒｖａｌ ｗａｓ
９５．４６～１１４．１８ｇ／ｋｇ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ Ｔｈｅ ｇａｓｔｒｉｃ
ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｆｉｎｅ ｐｏｗｄｅｒ ｏｆ Ａ．ｓａｃｒｏｒｕｍ
ｈａｓ ｎｏ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｍｉｃｅ，ａｎｄ ｔｈｅ
ｗａｔｅｒ ａｐｏｚｅｍ ｏｆ Ａ．ｓａｃｒｏｒｕｍ ｈａｓ ｎｏ ｒｅａｌｉｓｔｉｃａｌｙ
ｔｏｘｉｃ ｇｒａｄｅ ｉｎ ｔｈｉｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．
·９０１·
DOI:10.16068/j.1000-1824.2013.02.003
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｊｕｎ．２０１３ Ｖｏｌ．３６ Ｎｏ．２
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｓａｃｒｏｒｕｍ ｌｅｄｅｂ；ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ；ｍｉｃｅ
万年蒿系菊科植物万年蒿（Ａｒｔｅｍｉｓｉｉａ ｓａｃｒｏ－
ｒｕｍ Ｌｅｄｅｂ．）的干燥地上部分．万年蒿作为朝鲜族
民间习用传统朝药材，在《东医宝鉴》、《增补方药合
编》、《朝医学》、《朝鲜药典》、《实用东药学》、《朝药
志》［１］等民族药古书籍文献中均有记载．它的基源清
楚，长白山区域蕴藏量丰富，已于１９７７年收入到《吉
林省药品标准》，属于第一批纳入国家三级标准的延
边地产药材［２－３］．目前，国内外对万年蒿的研究多限
于化学成分、利胆与保肝等药理活性方面［４－５］，因而
限制了传统朝药材万年蒿的进一步深层开发利用．
本实验观察了万年蒿的急性毒性，旨在为万年蒿的
临床用药安全性提供科学依据．
１ 材料与方法
１．１ 材料 实验动物取昆明种小鼠，由延边大学实
验动物中心提供，体质量为２０～２２ｇ，雌雄各半．于
恒温２５℃，湿度５０％适应性饲养，饲养方式采用立
体笼式饲养，给予标准饲料，自由饮水．实验前小鼠
饲养７ｄ，并观察健康状况．所选小鼠应健康，营养状
况良好．所用万年蒿采集自吉林省龙井市铜佛寺镇
（２０１０年４月），由延边大学药学院生药学教研部朴
光春副教授鉴定为Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｓａｃｒｏｒｕｍ Ｌｅｄｅｂ．的
地上部分，样本保存在延边大学药学院生药学实验
室．所用水煎剂浸膏：１ｇ浸膏相当于４．０６ｇ生药．
仪器有电子分析天平．取万年蒿细粉用吐温－８０调
和，使之溶解于其中，再加入生理盐水调配成最大质
量浓度溶液．
１．２ 方法
１．２．１ 预实验 取体质量为１８～２２ｇ的实验小鼠
３０只（雌雄各半），禁食不禁水１２ｈ，随机分为空白
对照组、万年蒿细粉组及万年蒿水煎剂３个组，每组
各为１０只．１ｄ内每只小鼠灌胃给予１５ｇ生药／ｋｇ，
连续观察７２ｈ，此期间发现小鼠的生命状况良好，无
死亡现象，所以预测实验无法测定半数致死量
（ＬＤ５０），故改做最大给药剂量实验．
１．２．２ 万年蒿细粉的经口急性毒性实验 取健康
昆明种小鼠３０只，雌雄各半，随机分为３个组，每组
各为１０只，分别为空白对照组、万年蒿细粉组及溶
剂对照组．小鼠给药前禁食不禁水１２ｈ．万年蒿细粉
组小鼠以最大容积０．０４ｍＬ／ｇ和最大质量浓度
５ ０００ｍｇ／ｋｇ，１ｄ内早、中、晚３次灌胃给予万年蒿
细粉；空白对照组给予等剂量的生理盐水；溶剂对照
组给予等剂量的生理盐水和吐温－８０混合溶液．观
察各组小鼠的外观、行为、活动、精神活动、食欲、大
小便及其颜色、皮毛、呼吸、鼻、眼、口腔有无异常分
泌物、体质量变化以及死亡情况．
１．２．３ 万年蒿水煎剂的经口急性毒性实验 取健
康昆明种小鼠７０只，雌雄各半，随机分为７个组，每
组各为１０只．小鼠给药前禁食不禁水１２ｈ．万年蒿
细粉组的剂量以全致死量（Ｄｍ）为最高剂量，组间剂
量比为１∶０．８５，按照０．０４ｍＬ／ｇ剂量灌胃给予受
试物．观察各组小鼠死亡情况，并观察小鼠的采食、
饮水、精神、死亡、被毛和自主活动等情况，连续观察
１４ｄ．给药当天，连续观察４ｈ，详细记录小鼠出现毒
性反应的时间、持续时间、恢复及死亡时间、死亡情
况、中毒症状等．对死亡及濒临死亡小鼠及时进行解
剖，记录病变情况，并在实验结束时将所有存活小鼠
称取体质量并进行解剖，观察腹腔内液体状况和实
质性器官的病理变化及肾脏指数与脾脏指数．
１．２．４ 统计学分析 采用 ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ｐｒｏ－
ｇｒａｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＵＳＡ）进行
数据分析．实验结果以均数±标准偏差（珚ｘ±ＳＤ）表
示，多组间比较进行单因素方差分析，以Ｐ＜０．０５
为差异有统计学意义．
２ 结果
２．１ 万年蒿细粉经口急性毒性实验
２．１．１ 一般状态变化 万年蒿细粉组给药后１４ｄ
观察结果见，小鼠活动自如，无惊厥、运动失调、流
涎、流泪、流鼻涕、呼吸困难、腹泻、便秘、肠胀气等症
状发生，皮毛光泽，给药后１４ｄ内无死亡动物．第
１４ｄ时脱颈椎处死小鼠，进行尸体检验，肉眼观察未
发现肝脏、肾脏、脾脏等脏器组织部位有肿胀、萎缩、
出血、颜色异常、黏连及硬化等异常改变．
２．１．２ 体质量变化 给予万年蒿细粉后第１０ｄ
时，万年蒿细粉组小鼠体质量明显低于空白对照组
·０１１·
延边大学医学学报 ２０１３年６月 第３６卷 第２期
及溶剂对照组，相比较差异具有统计学意义（Ｐ＜
０．０１，Ｐ＜０．０５），可能与万年蒿抑制小鼠的采食、饮
水及影响对饲料的利用有关，见表１．
表１ 各组小鼠体质量变化（珚ｘ±ＳＤ）
组别
给药前
体质量／ｍｇ
给药３ｄ后
体质量／ｍｇ
给药７ｄ后
体质量／ｍｇ
给药１０ｄ后
体质量／ｍｇ
给药１４ｄ后
体质量／ｍｇ
体质量增长
百分率／％
空白对照组 ２５．５２ ２７．７２±２．２１ ３１．００±１．９０ ３３．０８±１．８１ ３５．３９±２．４７ ７２．１
溶剂对照组 ２５．４８ ２７．７９±０．７０ ３１．０１±１．５１ ３２．８６±１．２１ ３５．７８±１．２１ ７１．２
万年蒿细粉组 ２２．８９ ２５．７９±１．９３ ２９．２３±２．６３ ２９．９２±２．９４＃＊＊ ３２．７２±３．３３＃ ７０．０
注：＃ 与溶剂对照组比较，Ｐ＜０．０５；＊ 与空白对照组比较，Ｐ＜０．０１．
２．１．３ 脏器指数变化 小鼠给予万年蒿细粉后，给
药组小鼠的脏器指数与空白对照组及溶剂对照组比
较，无显著性差异（Ｐ＞０．０５），结果见表２．
表２ 各组小鼠脏器指数变化（ｇ，珚ｘ±ＳＤ）
组别 肝脏指数 肾脏指数 脾脏指数
空白对照组 ０．０５９ ３±０．００９ ５ ０．０１３ ３±０．０００ ８ ０．００４ ９±０．００１ ６
溶剂对照组 ０．０５５ ９±０．００４ ３ ０．０１４ １±０．００１ ６ ０．００７ ５±０．００６ ２
万年蒿细粉组 ０．０５６ ９±０．０１２ ０ ０．０１３ ３±０．０００ ９ ０．００５ １±０．００１ ７
２．２ 万年蒿水煎剂经口急性毒性实验
２．２．１ 万年蒿水煎剂ＬＤ５０的测定 给药后观察发
现，大剂量给药后小鼠在３０ｍｉｎ内出现精神沉郁、
双目紧闭、喜卧、不愿自主活动，最后在安静状态下
死亡．根据改良寇氏法计算得出 ＬＤ５０为１０４．４０
ｇ／ｋｇ，ＬＤ５０的９５％可信限为９５．４６～１１４．１８ｇ／ｋｇ，
见表３．
表３ 万年蒿水煎剂对小鼠的毒性测定
组别
剂量
（ｇ／ｋｇ）
动物数
／只
死亡数
／只
死亡率
（Ｐ）
ＬＤ５０
／（ｇ／ｋｇ）
ＬＤ５０的
９５％可信限
／（ｇ／ｋｇ）
１ １７０．００ １０ １０ １．０
２ １４４．５０ １０ １０ １．０
３ １２２．８３ １０ ７ ０．７
４ １０４．４０ １０ ５ ０．５ １０４．４０ ９５．４６～１１４．１８
５ ８８．７４ １０ １ ０．１
６ ７５．４３ １０ ２ ０．２
７ ６４．１２ １０ ０ ０．０
２．２．２ 尸体解剖检验 给予万年蒿水煎剂第１４ｄ
的将小鼠全部脱颈椎处死，行尸体检验，结果未发现
肝脏、肾脏、脾脏等脏器组织部位有肿胀、萎缩、出
血、颜色异常、黏连及硬化等异常改变．
３ 讨论
本实验采用最大给药量法研究万年蒿细粉急性
毒性，１２ｈ内给药３次，最大给药剂量为１５ｇ／ｋｇ，实
验小鼠未死亡，脏器指数变化差异无统计学意义，所
以万年蒿细粉的最大给药剂量为１５ｇ生药／ｋｇ，相
当于万年蒿成人（体重以６０ｋｇ计）日口服剂量以
１９７７年版的《吉林省药品标准》规定１０～３０ｇ计算，
小鼠的最大耐受量是人日用剂量的１０２～１５３倍，据
此可认为万年蒿在常用剂量范围内是安全的．小鼠
给予万年蒿水煎剂后，小鼠ＬＤ５０为１０４．４０ｇ／ｋｇ，
９５％可信限为９５．４６～１１４．１８ｇ／ｋｇ，根据药理毒理
学分级，万年蒿水煎剂为实际无毒药物，可安全地应
用于临床．
［参 考 文 献］
［１］ 延边民族医药研究所．朝药志［Ｍ］．延吉：延边人民出
版社，１９９５：８－９．
［２］ 吉林省卫生局．吉林省药品标准［Ｓ］．１９７７：４１５．
［３］ 严仲铠，李万林．中国长白山药用植物彩色图谱［Ｍ］．
北京：人民卫生出版社，１９９７：９１５．
［４］ 范丽颍，张淑华，李景梅，等．万年蒿的化学成分及药理
活性研究进展［Ｊ］．时珍国医国药，２００７，１８（７）：１７７９－
１７８０．
［５］ 戴小军，刘延庆，梅全喜．蒿属药用植物药理活性研究
进展［Ｊ］．中药材，２００５，２８（３）：２４３－２４７．?
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