全 文 :白网纹草组织培养快繁研究
收稿日期:2006-01-09.
作者简介:冯林剑(1967-), 男 ,河南中牟人 , 讲师 ,主要从事植物与植物生理的教学和科研工作。
冯林剑 ,梁明勤 ,申顺先
(河南农业职业学院植物科学系 ,河南 中牟 451450)
摘要:以白网纹草的带芽茎段为外植体 ,将其接种在附加不同浓度激素的 MS培养基上。试验结果表明:最佳启动
培养基为 MS+6-BA0.5 mg/L+IBA0.2 mg/L, 最佳增值培养基为 MS+6-BA0.2 mg/L+IBA0.1mg/L, 生根的适
宜培养基为 1/2MS+NAA0.2 mg/L, 同时还发现将生根培养基中的蔗糖换成白砂糖 ,对生根效果影响不大。
关键词:白网纹草;组织培养;快繁
中图分类号:S688.4 文献标识码:A 文章编号:1673-6060(2006)02-0036-03
StudyonSpeedingReproductionoftheTissueCulture
ofFitoniaVerchaffeltivar.Argyroneura
FENGLin-jian, etal.
(HenanAgriculturalVocationalColege, Zhongmou, Henan451450, China)
Abstract:Wetookthebud-growingtwigsectionsofFittoniaverchafeltiivar.argyroneuraasexplantstoplantintocul-
turemediawithvariousdensities.TheexperimentsshowedthattheoptimuminitiatingculturemediumwasMS+6-BA0.
5mg/l+IBA0.2mg/l, theoptimumincrementculturemediumwasMS+6-BA0.2mg/l+IBA0.1mg/l, andtheoptimum
culturemediumforradicationwasMS+6-BA0.5mg/l+IBA0.2mg/;meanwhile, wefoundthatifthecanesugarinthe
culturemediumwaschangedintowhitegranulatedsugar, theefectontherootagewasnotgreat.
Keywords:fitoniaverchaffeltivar, argyroneura, tissueculture, speedingreproduction.
白网纹草(Fitoniaverchafeltivar.argyroneura)
又名费通草 ,为爵床科网纹草属植物。原产于南美
秘鲁 ,多年生常绿草本植物 ,植株低矮 ,呈匍匐状蔓
生 ,高约 5 ~ 20cm,叶面密布红色或白色网脉 ,耐阴
性强 ,适合小盆栽或吊盆栽培 。由于白网纹草株型
小巧玲玫 ,姿态轻盈 ,叶脉清晰 ,叶色淡雅 ,纹理匀
称 ,深受人们喜爱 ,在观叶植物中属小型盆栽植物 ,
是目前欧美市场上十分流行的室内盆栽小品种 。 20
世纪 70年代才开始从国外引种 , 90年代进行小批
量生产 。现在我国南方已广泛栽培 ,在北方人们也
开始在室内栽培 。白网纹草主要是靠扦插或分株法
繁殖 ,在华南地区全年均能育苗 ,北方地区因冬季气
温低较不易发根 ,只能在春 、夏两季育苗。由于常规
方法繁殖速度太慢 ,不能满足市场需要 ,可以利用组
织培养技术对白网纹草进行快速大量繁殖。本文以
白网纹草带芽茎段为外植体进行离体快速繁殖研
究 ,旨在为大规模工厂化育苗提供技术参数 。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验材料 白网纹草幼嫩枝条 ,采自河南农
业职业学院花木中心。
1.1.2 培养基 以 MS为基本培养基 ,附加不同的
激素配比。培养基均加蔗糖 30g/L, 琼脂 7 g/L,
pH5.8。置高压灭菌锅中 ,在 121℃ ~ 126℃(1.1kg/
cm2条件下灭菌 20min[ 1] 。
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第 34卷 第 2期
Vol.34 No.2
河 南 科 技 学 院 学 报 (自然科学版)
JournalofHenanInstituteofScienceandTechnology
2006年 6月
Jun.2006
1.2 方法
1.2.1 启动培养 在晴天的下午从健壮无病虫害
的植株上取材料 。剪取当年新生的枝条作为外植
体 ,去掉叶片 。先用多菌灵 (1∶800)溶液消毒
10min,在流水下冲洗 30min,再在洗洁精水中浸泡
10min,并用软毛鞋刷轻轻刷洗表面 ,自来水冲洗干
净 。在无菌条件下用 70% ~ 75%酒精浸泡 25s,再
用 0.1%Hgcl2浸泡 8min,然后用无菌水冲洗 6遍 ,
及时剪去茎段两端与灭菌剂接触的部分 ,并剪成
1cm左右的单芽茎段 ,芽头向上接入培养基 A1 ~ A5
中 ,置于 25℃ ~ 28℃、光照强度 1500Lx~ 2000Lx、
光照时间 12h/d~ 15h/d的条件下培养。 30d后统
计萌发率和新芽高度 。
1.2.2 增值培养 将初代培养长势整齐一致的嫩
芽剪切成单芽茎段 ,接种到增值培养基 B1 ~ B12
中 , 25d后统计增值数 、高度和芽生长情况。培养条
件同上 。
1.2.3 生根培养 取 3 ~ 4cm高的白网纹草嫩芽
转入培养基 C1 ~C6中 , 25d后统计生根率 、根条数 、
长度和生长情况 。
2 结果与分析
2.1 初代培养
外植体接种 10d后腋芽开始萌动 , 30d后均长
出新芽 。但不同的培养基发芽率 、新芽高度有明显
差异(表 1)。培养基 A5是最佳处理 ,芽诱导率达
75.0%,平均新芽高度 3.1cm。
表 1 不同激素组合对白网纹草茎段芽分化的影响
培养基
代号
激素浓度(mg/L)
6-BA IBA
接种数
(个)
诱导数
(个)
诱导率
(%)
平均新芽
高(cm)
A1 0 0 40 12 30.0 1.2
A2 0.2 0.1 40 19 47.5 2.5
A3 0.2 0.2 40 17 42.5 2.1
A4 0.5 0.1 40 24 60.0 3.2
A5 0.5 0.2 40 30 75.0 3.1
2.2 不同激素组合对芽丛诱导的影响
细胞分裂素和生长素配合使用时 ,若生长素浓
度较高 ,则有利于细胞的增殖和根分化;若细胞分裂
素浓度相对较高 ,则促进芽的分化 [ 2] 。但随细胞分
裂素浓度的增加 ,在诱导芽丛的同时 ,会产生较多的
玻璃化苗[ 2] ,并且芽也较瘦弱(表 2)。从表 2看出 ,
培养基 B1的芽平均增值数为 3.5,平均苗高 3.6,且
生长粗壮 ,叶色浓绿 ,为最佳培养基。添加一定浓度
的 IBA对白网纹草增值效果优于 NAA。
表 2 不同浓度激素组合对白网纹草丛生芽诱导的影响
培养基
代号
6-BA
(mg/L)
IBA
(mg/L)
NAA
(mg/L)
玻璃化
(个)
平均芽增
值数(个)
平均高度
(cm)
芽生长
情况
B1 0.2 0.1 0 0 3.5 3.6 茎粗壮 ,叶色浓绿
B2 0.2 0.3 0 1 3.2 3.3 茎较壮 ,少量不定根
B3 0.2 0 0.1 0 3.1 3.5 较壮
B4 0.2 0 0.3 1 2.9 3.0 较壮 ,少量不定根
B5 0.5 0.1 0 2 3.2 3.5 一般
B6 0.5 0.3 0 2 3.0 3.4 一般
B7 0.5 0 0.1 3 3.6 3.7 一般
B8 0.5 0 0.3 1 3.1 3.3 一般
B9 1.0 0.5 0 6 3.4 3.2 茎细弱
B10 1.0 0.3 0 5 3.7 3.0 茎细弱
B
11 1.0 0 0.4 7 4.0 2.8 茎细弱
B
12 1.0 0 0.5 5 3.6 3.1 茎细弱
2.3 生根培养
降低培养基中无机盐的浓度有利于组培苗生
根[ 2] ,实验结果表明 ,在 1/2MS培养基中添加 NAA
0.2mg/L,生根率达 97.5%, 生根效果也最好 (表
3)。将该培养基中的蔗糖换成白砂糖 ,在相同条件
下培养 ,结果表明对白网纹草生根的影响不大(表
4)。
表 3 不同培养基对生根的影响
培养基
代号
基本培
养基
NAA
(mg/L)
生根率
(%)
平均根
数(个)
平均根
长(cm) 根生长情况
C1 MS 0 80.0 2.1 2.8 根形成较慢 ,数量少 ,细弱
C2 MS 0.1 93.8 3.4 3.6 根形成较快 ,较弱
C3 MS 0.3 96.3 3.7 4.0 根数量多 ,生长快 ,纤细
C4 1/2MS 0 88.8 2.9 3.1 根数量少 ,生长慢 ,粗壮
C5 1/2MS 0.1 95.0 4.1 4.7 根数量多 ,生长快 ,主根粗壮
C6 1/2MS 0.2 97.5 4.5 4.8 根数量多 ,生长快 ,粗壮
表 4 白砂糖对生根的影响
培养基 NAA(mg/L)
生根率
(%)
平均根
数(个)
平均根
长(cm) 根生长情况
1/2MS+蔗糖 30g/L 0.3 100 4.3 4.5 粗壮
1/2MS+白砂糖 30g/L 0.3 97.5 4.3 4.3 粗壮 ,生根稍迟
2.4 组培苗驯化移栽
组培苗是在无菌 、有营养供给 、适宜的光照 、恒
温和高湿环境中生长的 ,并有适宜的植物激素以调
节其生长代谢等生理需要 ,一旦出瓶移栽 ,环境发生
了不利于其生长的变化。要使组培苗大量移栽成
活 , 就应尽可能地创造适宜于它生存的环境条
件[ 3] 。当不定根长到 4 ~ 5cm后 ,移至温室内炼苗
5d,再去掉封口膜炼苗 3d。移栽时用镊子轻轻地将
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冯林剑等:白网纹草组织培养快繁研究 第 2期
组培苗取出 ,用清水洗净根部黏附的培养基 ,在
0.5%多菌灵水溶液中蘸一下 ,栽植在基质中 [ 4] 。
基质选择蛭石 、草炭(1∶1)混合 [ 5] ,用 0.03%高锰
酸钾水溶液消毒。移栽后注意保湿 、保温 、遮荫 ,两
天后浇一次营养液 ,以后每隔 5d浇一次营养液 ,并
喷 0.2%多菌灵防腐 。移栽 20d后 ,成活率在 95%
以上。
3 结论
在植物组织培养中 ,激素的种类和浓度及其配
比对试验结果有相当大的影响。试验结果表明:白
网纹草启动培养的最佳激素配比为 MS+6-BA0.5
mg/L+IBA0.2 mg/L,最佳增值培养基为 MS+6-
BA0.2 mg/L+IBA0.1 mg/L,生根的适宜培养基为
1 /2MS+NAA0.2mg/L。还可以将生根培养基中的
蔗糖换成白砂糖 ,这样可以降低工厂化生产的成本 。
在白网纹草驯化移栽过程中 ,只要加强管理 ,移栽成
活率可达 95%以上。
参考文献:
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2006年 河南科技学院学报(自然科学版)