全 文 ：京大戟中萜类含量测定
贾云云，罗士香
（淮安市食品药品检验所，江苏 淮安２２３３００）
摘 要：目的：考察京大戟醋制前后总萜类成分的含量变化，为京大戟醋制减毒机理的研究提供参考。
方法：以香草醛－冰醋酸为显色剂，大戟二烯醇为对照品，运用比色法测定京大戟中总萜类成分的含量。
结果：京大戟中总萜类成分经过醋制后略有降低，即生品＞醋制品。结论：京大戟醋制后，总萜类成分含
量有所降低，为研究京大戟醋制减毒机理提供了科学依据。
关键词：京大戟；毒性；醋制京大戟；含量变化
中图分类号：Ｒ２８４．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３－２１９７（２０１５）１０－００３８－０４
ＤＯＩ：１０．１１９５４／ｙｔｃｔｙｙ．２０１５１００１６
收稿日期：２０１５－０１－０７
作者简介：贾云云（１９８８－），女，江苏省淮安市食品药品检验所药师，研究方向为药品不良反应监测。
Ｔｈｅ Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｏｔａｌ Ｔｅｒｐｅｎｅ ｉｎ Ｒａｄｉｘ Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ Ｐｅｋｉｎｅｎｓｉｓ
Ｊｉａ Ｙｕｎｙｕｎ，Ｌｕｏ Ｓｈｉｘｉａｎｇ
（Ｈｕａｉａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｈｕａｉａｎ ２２３３００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｃｏｍｐａｒｅ ｔｈｅ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔｅｌ ｔｅｒｐｅｎｅ ｉｎ Ｒａｄｉｘ Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ Ｐｅｋｉｎｅｎｓｉｓ ｂｅｆｏｒｅ ａｎｄ ａｆｔｅｒ ｂｅ－
ｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ．Ｉｔ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ｃｅｒｔａｉｎ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒｅｄｕｃｅ ｏｆ Ｒａｄｉｘ Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ Ｐｅｋｉｎｅｎｓｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｗｉｔｈ ｖａｎｉｌｉｎ－ｇｌａｃｉａｌ ａｃｅｔｉｃ
ａｃｉｄ ａｓ ｓｈｏｗ ｃｏｌｏｒ ａｇｅｎｔ，ｗｉｔｈ ｅｕｐｈｏｌ ａｓ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ．Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｔｅｒｐｅｎｅ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ ｃｏｌｏｒ－
ｉｍｅｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ａｆｔｅｒ ｂｅｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ，ｔｈｅ ｔｏｔｅｌ ｔｅｒｐｅｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｃｌｉｎｅｄ ｉｎ ａ ｗｈｏｌｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ａｃｃｕｒａｔｅ，ｒｅｌｉａｂｌｅ
ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｕｐｈｏｌ ｉｎ Ｒａｄｉｘ Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ Ｐｅｋｉｎｅｎｓｉｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｒａｄｉｘ Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ Ｐｅｋｉｎｅｎｓｉｓ；Ｔｏｘｉｃｉｔｙ；Ｖｉｎｅｇａｒ－ｐｒｅｐａｒｉｎｇ Ｒａｄｉｘ Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ Ｐｅｋｉｎｅｎｓｉｓ；Ｃｏｎｔｅｎｔ ｃｈａｎｇｅ
京大戟为大戟科多年生草本植物大戟Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ ｐｅ－
ｋｉｎｅｎｓｉｓ Ｒｕｐｒ．的根，是我国传统中药，收载于历次版本的
《中华人民共和国药典》，性味苦、寒，有毒，归肺、脾、肾经，
具有泻水逐饮、消肿散结的功效，用于水肿胀满、胸腹积水、
痰饮积聚、气逆喘咳、二便不利等证的治疗［１］。京大戟主产
于江苏南京、扬州、邳州等地，此外，四川、福建、江西、湖南、
湖北等地亦产［２］。京大戟为有毒中药，其毒性严重制约着
中医临床用药的安全。安全有效是药物的基本属性，药品能
否被社会接受不仅取决于其有效性的强弱，还在于其毒性
的高低。而京大戟对消化系统、肝肾功能等有强烈的刺激
性和致炎、促发致癌的毒性，严重制约着临床用药的安全，
也为新药创制带来了困难［３－４］。本文考察京大戟醋制前后总
萜类成分的含量变化，为京大戟醋制减毒机理的研究提供
一定的参考。
１ 仪器与试药
１．１ 仪器与试剂
九阳牌电磁炉、高速万能磨粉机（天津泰斯特）、电子天
平、电热鼓风式干燥箱、ＵＶ２４０１可见紫外分光光度仪（日本
岛津公司）、ＨＨ－Ｓ恒温水浴锅（江苏国胜实验仪器厂）、电炉
（天津泰斯特）、电热鼓风式干燥箱、甲醇（色谱纯）、冰醋酸
（分析纯）、高氯酸（优质纯）、香草醛（分析纯）。
１．２ 试药
京大戟药材购自安徽省毫州市药材总公司，产地为河
北（批号：１０１２０６），经南京中医药大学巢建国教授鉴定为大
戟科植物大戟（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ ｐｅｋｉｎｅｎｓｉｓ Ｒｕｐｒ．）的干燥块根。
２ 方法
供试品制备：京大戟生品（ＪＤＪ－１）：取生京大戟，大小分
档，除去杂质，于４０℃烘箱干燥，过四号筛。京大戟醋制品
（ＪＤＪ－２）：取净京大戟，大小分档，加入食醋拌匀，另加入纯净
水（京大戟∶食醋∶水为１０∶３∶４０），拌匀，浸润２ｈ，文火煮
沸，煮至醋被吸尽。取出，室温凉至六七成干，４０℃烘箱干
燥，打粉，过四号筛。
２．１ 总萜显色条件考察
２．１．１ 显色剂用量考察 ①香草醛－冰醋酸溶液的用
量：精密称取大戟二烯醇６．０６ｍｇ，至５０ｍＬ容量瓶中，加甲
醇至刻度，摇匀，制成大戟二烯醇标准品溶液。精密量取上
—８３—
述溶液１ｍＬ分别置于５个具塞试管中，水浴挥干溶剂，分别
加入新配制的５％香草醛－冰醋酸溶液０．１、０．２、０．５、１．０、
１．５ｍＬ，高氯酸０．８ｍＬ，摇匀。于７０℃水浴加热３０ｍｉｎ，取
出，流水冷却２ｍｉｎ，精密加入冰醋酸５ｍＬ，摇匀。分别以相
应的试剂作为空白，按照分光光度法（《中国药典》２０１０年版
一部附录ⅤＡ分光光度法）于４００～８００ｎｍ进行全波长测
定。结果见表１，见图１（Ａ）。
表１ 香草醛－冰醋酸溶液用量考察
序号 显色剂用量（ｍＬ）最大吸收波长（ｎｍ） 吸收度Ａ 颜色
１ ０．１ ５５０．５０ ０．４３３ ２ 紫色
２ ０．２ ５４４．５０ ０．４６４ ６ 紫色
３ ０．５ ５３５．００ ０．６２０ ３ 紫色
４ １．０ ５３３．５０ ０．４８４ ３ 紫红色
５ １．５ ５４０．５０ ０．２４０ ４ 紫红色
结果表明：随着香草醛－冰醋酸溶液用量的增加，吸收
度也相应增加。当加入５％香草醛－冰醋酸的量为０．５ｍＬ
时吸收度最大，表明反应已近完全，所以选择加入０．５ｍＬ
５％香草醛－冰醋酸溶液。
②高氯酸用量：精密量取大戟二烯醇一次稀释液溶液
１ｍＬ分别置于５个具塞试管中，水浴挥干溶剂，分别加入新
配制的５％香草醛－冰醋酸溶液０．５ｍＬ，高氯酸０．４、０．６、
０．８、１．０、１．２ｍＬ，摇匀。于７０℃水浴加热３０ｍｉｎ，取出，流
水冷却２ｍｉｎ，精密加入冰醋酸５ｍＬ，摇匀。分别以相应的试
剂为空白，采用分光光度法于４００～８００ｎｍ进行全波长测
定。结果见表２，见图１（Ｂ）。
表２ 高氯酸用量考察
序号 显色剂用量（ｍＬ）最大吸收波长（ｎｍ） 吸收度Ａ 颜色
１ ０．４ ５６２．００ ０．６４２ ３ 深紫色
２ ０．６ ５４７．５０ ０．６９１ ６ 紫色
３ ０．８ ５４９．５０ ０．４４０ １ 浅紫色
４ １．０ ５９３．５０ ０．２８９ ４ 浅紫色
５ １．２ ４０４．５０ ０．２６３ ２ 墨绿色
结果表明：随着高氯酸溶液用量的增加，吸收度增加。
当加入量为０．６ｍＬ时吸收度最大，表明此时溶液反应已近
完全，故选择加入０．６ｍＬ高氯酸溶液。
２．１．２ 加热温度考察 精密量取大戟二烯醇标准品溶液
１ｍＬ置于５个具塞试管中，水浴挥干溶剂，分别加入新配制
的５％香草醛－冰醋酸溶液０．５ｍＬ，高氯酸０．６ｍＬ，摇匀。
于６０℃、７０℃、８０℃、９０℃，沸水浴加热３０ｍｉｎ，取出，流水冷
却２ｍｉｎ，精密加入冰醋酸５ｍＬ，摇匀。分别以相应的试剂为
空白，采用分光光度法于４００～８００ｎｍ进行全波长测定。结
果见表３，见图１（Ｃ）。
表３ 加热温度考察
序号 温度（℃） 最大吸收波长（ｎｍ） 吸收度Ａ 颜色
１ ６０ ５５８．５０ ０．４９３ ９ 蓝紫色
２ ７０ ５５０．００ ０．６４１ ５ 紫色
３ ８０ ５５０．００ ０．７０４ ０ 深紫色
４ ９０ ５５２．５０ ０．９８８ ７ 紫红色
５ 沸水浴 ５５５．００ １．１９６ ２ 紫红色
结果表明：随着温度的升高，溶液的吸收度增加，说明
反应仍在进行中，沸水浴时吸收度最大，故选择加热温度为
１００℃。
２．１．３ 加热时间考察 精密量取大戟二烯醇标准品溶液
０．５ｍＬ置于５个具塞试管中，水浴挥干溶剂，分别加入新配
制的５％香草醛－冰醋酸溶液０．５ｍＬ，高氯酸０．６ｍＬ，摇
匀。于７０℃水浴加热１５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、４５ｍｉｎ、６０ｍｉｎ，取出，
流水冷却２ｍｉｎ，精密加入冰醋酸５ｍＬ，摇匀。分别以相应的
试剂为空白，采用分光光度法于４００～８００ｎｍ进行全波长测
定。结果见表４，见图１（Ｄ）。
表４ 加热时间考察
序号 时间（ｍｉｎ） 最大吸收波长（ｎｍ） 吸收度Ａ 颜色
１ １５ ５５６．５０ ０．４９１ ８ 蓝紫色
２ ３０ ５５０．５０ ０．５８２ ９ 紫色
３ ４５ ５４９．５０ ０．６５６ １ 紫色
４ ６０ ５４９．５０ ０．８４１ ８ 深紫色
结果表明：随着加热时间的延长，溶液的吸收度不断增
加。故综上精密量取大戟二烯醇标准品溶液０．５ｍＬ分别置
于５个具塞试管中，水浴挥干溶剂，分别加入新配制的５％
香草醛－冰醋酸溶液０．５ｍＬ，高氯酸０．６ｍＬ，摇匀。于
１００℃水浴加热１５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、４５ｍｉｎ、６０ｍｉｎ、９０ｍｉｎ取出，流
水冷却２ｍｉｎ，精密加入冰醋酸５ｍＬ，摇匀。分别以相应的试
剂为空白，采用分光光度法于４００～８００ｎｍ进行全波长测
定。结果见表５，见图１（Ｅ）。
表５ 沸水浴加热时间考察
序号 时间（ｍｉｎ） 最大吸收波长（ｎｍ） 吸收度Ａ 颜色
１ １５ ５５６．５０ ０．４５１ ３ 紫红色
２ ３０ ５６３．５０ ０．５９７ １ 紫红色
３ ４５ ５６３．００ ０．６６０ ８ 紫红色
４ ６０ ５６２．００ ０．６３９ ９ 紫红色
５ ９０ ５３２．５０ ０．５４６ ４ 紫红色
结果表明：随着加热时间的增长，溶液的吸收度不断增
加，在沸水浴中当加热时间为４５ｍｉｎ时吸收度最大，表明当
加热到４５ｍｉｎ时反应已近完全，但紫外扫描图谱出现相邻
的两个峰，而当反应达到３０ｍｉｎ时只出现一个最大吸收峰，
所以选择的反应时间为３０ｍｉｎ。综上，显色条件为：精密量
取大戟二烯醇标准品溶液０．５ｍＬ置于具塞试管中，水浴挥
干溶剂，分别加入新配制的５％香草醛－冰醋酸溶液
０．５ｍＬ，高氯酸０．６ｍＬ，摇匀，于沸水浴加热３０ｍｉｎ，取出，流
水冷却２ｍｉｎ，精密加入冰醋酸５ｍＬ，混匀。
２．２ 京大戟及其炮制品总萜类含量测定
２．２．１ 供试品溶液制备 分别取两种京大戟供试品粉末
（过６５目筛）０．２ｇ，精密称定，置５０ｍＬ具塞锥形瓶中，精密
加入甲醇２０ｍＬ称重，超声（功率２５０Ｗ，频率５０ｋＨｚ）处理
３０ｍｉｎ后再称重，以甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，即得。
２．２．２ 吸收波长确定 取对照品０．５ｍＬ和供试品０．１ｍＬ
置于具塞试管中，水浴挥干溶剂，分别加入新配制的５％香
草醛－冰醋酸溶液０．５ｍＬ，高氯酸０．６ｍＬ，摇匀。于１００℃
水浴加热３０ｍｉｎ，取出，流水冷却２ｍｉｎ，精密加入冰醋酸
５ｍＬ，摇匀。分别以相应的试剂为空白，于４００～８００ｎｍ处
扫描，由扫描结果确定测定波长为５７０ｎｍ，结果见图２、图３、
图４。
—９３—
图１ 京大戟总萜显色条件考察
图２ 大戟二烯醇显色后可见光谱
图３ 京大戟生品显色后可见光谱
图４ 京大戟醋制品显色后可见光谱
２．２．３ 线性关系考察 精密量取大戟二烯醇标准品溶液
０．１、０．２、０．４、０．６、０．８ｍＬ置于具塞试管中，水浴挥干溶剂，
分别加入新配制的５％香草醛－冰醋酸溶液０．５ｍＬ，高氯酸
０．６ｍＬ，摇匀。于１００℃水浴加热３０ｍｉｎ，取出，流水冷却
２ｍｉｎ，精密加入冰醋酸５ｍＬ，摇匀。分别以相应的试剂为空
白，照分光光度法（《中国药典》２０１０年版一部附录Ⅴ分光光
度法）于５７０ｎｍ处测定吸收度。以吸收度为纵坐标（Ｙ），对
照品的量（ｍｇ）为横坐标（Ｘ），绘制标准曲线，得回归方程：ｙ
＝９．９４９ ８ｘ－０．０５４ ９（ｒ＝０．９９９ １）。大戟二烯醇在１２．１２～
９６．９６μｇ之间与峰面积呈现良好的线性关系。结果见表６，
线性关系见图５。
２．２．４ 精密度实验 取０．５ｍＬ对照品显色后溶液，连续
测定６次，测定结果见表７，结果ＲＳＤ为０．１７％。表明该方
法精密度良好。
—０４—
表６ 大戟二烯醇标准曲线
序号 取样量（ｍＬ） 大戟二烯醇量（ｍｇ） 吸收度
１ ０．１ ０．０１２ １２ ０．０５３
２ ０．２ ０．０２４ ２４ ０．１９９
３ ０．４ ０．０４８ ４８ ０．４４０
４ ０．６ ０．０７２ ７２ ０．６５０
５ ０．８ ０．０９６ ９６ ０．９１６
图５ 大戟二烯醇标准曲线
表７ 大戟二烯醇精密度考察试验结果
序号 吸收度Ａ 平均吸收度Ａ ＲＳＤ（％）
１ ０．６７０
２ ０．６６９
３ ０．６７０
０．６６９ ０．１７４ ０．６６９
５ ０．６６８
６ ０．６６７
２．２．５ 稳定性实验 以ＪＤＪ－１供试品显色后溶液为考察
对象，间隔若干时间测一次，共测７次，测定结果见表８，ＲＳＤ
为０．３１％，结果表明供试品当中总萜类成分在２ｈ内稳定。
表８ 稳定性考察结果
序号 测定时间（ｍｉｎ） 吸收度Ａ 平均吸收度 ＲＳＤ（％）
１ ０ ０．４１８
２ ２０ ０．４１７
３ ３０ ０．４１９
４ ４５ ０．４１７ ０．４１８ ０．３１
５ ６０ ０．４１８
６ ９０ ０．４２０
７ １２０ ０．４２０
２．２．６ 重复性实验 依法处理ＪＤＪ－１供试品６份，依上法
测定。重复性结果总萜类的平均含量为５５．７５１ｍｇ·ｇ－１，
ＲＳＤ为２．７％，结果表明该试验重复性较好，结果见表９。
表９ 总萜类成分重复性试验结果
序号 称重（ｇ）
吸收度
Ａ
总萜类的含量
（ｍｇ·ｇ－１）
平均含量
（ｍｇ·ｇ－１）
ＲＳＤ（％）
１ ０．１９９ ４ ０．４９３ ５５．２３２
２ ０．２０１ ３ ０．４９８ ５５．２１０
３ ０．２００ ９ ０．５１３ ５６．８２１
５５．７５１ ２．７４ ０．２０１ ８ ０．４７９ ５３．１８１
５ ０．２０２ ５ ０．５２０ ５７．０６７
６ ０．２０３ １ ０．５２１ ５６．９９７
２．２．７ 加样回收率实验 精密称取ＪＤＪ－１供试品６份，
每份０．１ｇ，依上法制得供试品溶液，取０．１ｍＬ置于具塞试
管中，并向其中加入０．２ｍＬ（０．１２１ ２ｍｇ·ｍＬ－１）大戟二烯醇
标准品溶液。依法测定，并计算平均回收率以及ＲＳＤ，结果
见表１０。
表１０ 总萜类成分加样回收率试验结果
序号 称样量（ｇ） 吸收度Ａ 测得量（ｍｇ） 样品量（ｍｇ） 加入量（ｍｇ） 回收率（％） 平均回收率（％） ＲＳＤ（％）
１ ０．０９９ ７ ０．４５７ ０．０５１ ４５ ０．０２７ ７９ ０．０２４ ２４ ９７．６１
２ ０．１０１ ２ ０．４５５ ０．０５１ ２５ ０．０２８ ２１ ０．０２４ ２４ ９５．０５
３ ０．１００ ２ ０．４５３ ０．０５１ ０５ ０．０２７ ９３ ０．０２４ ２４ ９５．３８
９７．２９ ２．５６４ ０．１００ ５ ０．４５９ ０．０５１ ６５ ０．０２８ ０１ ０．０２４ ２４ ９７．５２
５ ０．１０１ ２ ０．４５８ ０．０５１ ５５ ０．０２８ ２１ ０．０２４ ２４ ９６．２９
６ ０．０９９ ９ ０．４６８ ０．０５２ ５５ ０．０２７ ８５ ０．０２４ ２４ １０１．９０
２．２．８ 样品含量测定 取２份供试品，如法测定。样品 测定结果见表１１。
表１１ 京大戟不同炮制品含量测定结果
序号 称样量（ｇ） 吸收度Ａ 测得量（ｍｇ） 样品量（ｍｇ） 加入量（ｍｇ） 回收率（％） 平均回收率（％） ＲＳＤ（％）
１ ０．０９９ ７ ０．４５７ ０．０５１ ４５ ０．０２７ ７９ ０．０２４ ２４ ９７．６１
２ ０．１０１ ２ ０．４５５ ０．０５１ ２５ ０．０２８ ２１ ０．０２４ ２４ ９５．０５
３ ０．１００ ２ ０．４５３ ０．０５１ ０５ ０．０２７ ９３ ０．０２４ ２４ ９５．３８
９７．２９ ２．５６４ ０．１００ ５ ０．４５９ ０．０５１ ６５ ０．０２８ ０１ ０．０２４ ２４ ９７．５２
５ ０．１０１ ２ ０．４５８ ０．０５１ ５５ ０．０２８ ２１ ０．０２４ ２４ ９６．２９
６ ０．０９９ ９ ０．４６８ ０．０５２ ５５ ０．０２７ ８５ ０．０２４ ２４ １０１．９０
３ 结果与讨论
在考察显色条件时，经过多次对照试验，最终确定加入
５％香草醛－冰醋酸０．５ｍＬ和高氯酸０．６ｍＬ，并放入沸水
浴加热３０ｍｉｎ反应基本完全，尤其在进行沸水浴加热时间
考察时，当加热４５ｍｉｎ紫外扫描就会出现两个尖峰，对后续
测定造成干扰，因此最终确定加热时间为３０ｍｉｎ。
该实验结果表明，京大戟中总萜成分含量在醋制后比
生品含量略低，即含量高低为：京大戟生品＞京大戟醋制
品，说明醋煮对京大戟中总萜含量有一定的降低作用，该实
验结果也可以推测京大戟醋制后总萜类成分含量的降低可
能与京大戟醋制减毒有一定的相关性。
参考文献：
［１］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典［Ｍ］．北京：中国医药
科技出版社，２０１０：２０９－２１０．
［２］ 国家中医药管理局．《中华本草》蒙药卷［Ｍ］．上海：上海科学
技术出版社，２００４：２６１－２６２．
［３］ 张乐林，孙立立．京大戟现代研究概述［Ｊ］．中华中医药学刊，
２０１１，２９（３）：５７７－５７９．
［４］ 张乐林，葛秀允，孙立立．醋制对京大戟毒性和药效的影响
［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１３，１９（１９）：２７６－２７９．
（责任编辑：尹晨茹）
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