全 文 ：第 23卷第 1期
2001年 3月
大 连 医 科 大 学 学 报
Journal of Dalian Medical University
Vol.23 , No.1 Mar.2001
文章编号:1000-5676 (2001)01-0061-02
反相高效液相色谱法测定
桅子中京尼平甙和京尼平的含量
曹晶萍1 , 王艳蕾2 , 贾玉杰2 , 姜妙娜2
(1.大连医科大学分析测试中心 , 辽宁大连 116027;2.大连医科大学病理生理学教研室)
摘要:应用高效液相色谱法同时测定了栀子中京尼平甙和京尼平的含量 。采用 YWG-C18柱 ,
0.05 mol/L磷酸氢二钠—甲醇 (72∶28), 用磷酸调节 pH6.80为流动相 , 于 240 nm 波长处检测 ,
京尼平甙和京尼平的平均加样回收率分别为 99.10%, 98.28%, RSD分别为 1.05%, 1.21%(n
=5)。本法简单 、准确 、重现性好。
关键词:高效液相色谱;京尼平甙;京尼平;栀子
中图分类号:R-331 文献标识码:B
1 前言
栀子为茜草科植物 (Gardenia jasminoides Eills)
的果实 , 是传统中药 , 具有泻火除烦 , 清热利尿 ,
凉血散瘀的功效 , 被用于治疗热病心烦 、 火毒疮
疡 、 外治扭挫伤痛等症 , 在中医处方中应用甚广 。
栀子含有多种化学成分 , 药理实验表明 , 以京尼平
甙为代表的烯醚萜类成分为栀子的主要活性成分 。
本文建立了反相高效液相色谱法同时测定栀子中京
尼平甙和京尼平的含量 , 为药材质量评价及其制剂
分析提供了较为先进的测定方法。
2 实验部分
2.1 仪器和试剂
岛津 LC -4A 高效液相色谱仪 , 岛津 SPD -
2AS 紫外检测器 , 岛津 C-R3A数据处理机。对照
品:京尼平甙 , 京尼平 (大连医科所提供)。甲醇 、
磷酸氢二钠 、磷酸均为分析纯 。
2.2 色谱条件
色谱柱:YWG -C18 、 250×4.6 nm (10 μm)
(大连依利特科学仪器有限公司)。流动相:0.05
mol/L 磷酸氢二钠—甲醇 (72∶28), 用磷酸调节
pH6.80。流速 1.0 ml/min。检测波长 240 nm , 灵敏
度0.01 AUFS 。柱温 35 ℃。进样量 10μ1。
2.3 样品处理
精密称取生药粉末 2.0 g 置烧瓶中 , 加甲醇—
水 (1∶1)30 ml , 85 ℃水浴上加热回流 , 提取 3
次 , 每次 30 min , 离心 3000 r/min 10 min , 倾取上
清液 , 合并在 100 ml 容量瓶中 , 加溶剂至刻度 ,
取 2 ml至 10 ml容量瓶中 , 用甲醇 —水 (1∶1)稀
释至刻度 , 作为样品液 。
3 实验结果
3.1 线性关系
精密称取京尼平甙和京尼平各 1 mg , 分别置
于50 ml 容量瓶中 , 加甲醇 —水 (1∶1)溶解并稀
释至刻度 , 精确取每毫升含 1.25 、 2.5 、 5.0 、
10.0 、 20.0 μg的对照品溶液 10 μl进行测定 。以峰
面积 (Y)对含量 (X)作回归计算 , 结果表明:
在 1.25 ～ 20.0 μg/ml范围内 , 京尼平甙和京尼平均
有良好的线性关系 , 回归方程分别为京尼平甙 y=
3928171x+32361 , r=0.9998 , 京尼平 y =2406476x
+33582 , r=0.9998。
3.2 精密度实验
同一样品溶液连续进样 5次 (每次 10 μl), 测
定并计算 , RSD分别为京尼平甙 1.05%, 京尼平
为 1.21%。
3.3 回收率实验
在已知含量的样品溶液中分别加入不同量的京
尼平甙和京尼平对照品 , 配制成加样样品液 , 将样
品液 、 加样样品液分别按上述色谱条件测定其含
量 , 并计算加样回收率 , 京尼平甙 、京尼平的平均
回收率分别为 99.10%、 98.28%。
3.4 流动相的选择
栀子样品的成分复杂 , 尤其是京尼平甙和京尼
平附近峰很多。当溶剂极性较强和流速过大时 , 出
峰时间太短 , 样品中的杂质峰和京尼平甙 、 京尼平
难以分离 , 为此我们对流动相的极性及流速大小进
行了多次调整 , 确定在0.05 mol/L 磷酸氢二纳—甲
醇 (72∶28), 用磷酸调节 pH 6.80的条件下可达到
最佳分离效果 , 京尼平甙和京尼平的保留时间分别
是6.33 min 、 9.49 min (见图 1)。
t/min t/min
A B
图 1 色谱图
A 标样色谱图 B 样品色谱图
1 京尼平甙 2 京尼平
3.5 样品测定结果
分别精密吸取对照品溶液和样品溶液进样 10
μl , 依上述色谱条件测定 5个批号样品 , 用外标峰
面积法计算栀子中京尼平甙和京尼平的含量。结果
见表1 。
表 1 样品的测定结果 (%)
样品号 京尼平甙 京尼平
1 3.60 0.0056
2 3.85 0.0078
3 3.72 0.0062
4 4.01 0.0089
5 4.12 0.0101
4 结论
本文建立的反相高效液相色谱法 , 不仅可以同
时测定栀子中京尼平甙和京尼平的含量 , 也可以同
时测定栀子制剂中所含的该类物质成分 , 结果表
明 , 方法准确可靠 , 适用于药材质量评价 。
参考文献:
[ 1]童玉懿 ,章观德 ,相乐和彦 ,等.栀子及其制剂中栀子甙的高压液
相色谱分析[ J] .中国中药杂志 , 1989 , 14(4);228—230.
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甙的含量[ J] .中药材 ,1997 , 20(11):569—570.
Simultaneous Determination of Geniposide and Genipin in
Gardenia Jasminoides Eills by High Performance Liquid Chromatography
CAO Jing-ping1 , WANG Yan-lei2 , JIA Yu-jie2
(1.Central Research Lab.of Dalian Medical University , Dalian , 116027 China;
2.Department of pathopgysiology , Dalian Medical University)
Abstract:A new method for the simultaneous determination of genooposide and genipin in Gardenia jasminoides Eills by
reversed-phase high perfomance liquid chromatography was studied.The method used a YWG-C18 column , 0.05
mol/L di-sodium hydrogen phosphate-methanol (72∶28)as the mobile phase at a flow rate of 1.0 ml/min with de-
tection wavelengty at 240 nm.Retention times and recovery rates for geniposide and genipin were 6.33 , 9.49 min , and
99.10%, 98.28%, respectively.The RSD of the results was 1.05% for geniposide , 1.21% for genipin.The
method was proved to be simple and reliable.
Key words:reversed-phase high performance liquid chromatography;gardenia jasminoides Eill;geniposide;genopin
(收稿日期:2000-12-22 修回日期:2001-01-15)
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