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八角枫化学成分的系统定性研究



全 文 :八角枫化学成分的系统定性研究
翟科峰1,2,王青遥2,叶竹青2,韩 松2,杨文兵2
(1.宿州学院特色种植业苗种生产工程技术研究中心,安徽 宿州 234000;
2.宿州学院化学与生命科学学院,安徽 宿州 234000)
摘要:目的 对八角枫有效成分进行初步研究。方法 采用乙醇提取法、水提取法、酸水提取液对八角枫中含有的化学成
分进行系统定性检测。结果 初步判断八角枫中含有糖及其苷类、氨基酸、酚类和鞣质、皂苷、甾体、三萜、强心苷、蒽醌及
其苷类、生物碱、有机酸。结论 八角枫有效成分可能为酚苷、蒽醌及其苷、生物碱类。
关键词:八角枫; 乙醇提取; 水提取; 酸水提取; 化学成分
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 02. 017
中图分类号:R151. 3;R284. 2 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)02-0295-01
中药八角枫属八角枫科八角枫属植物,别名华瓜木,枢木等,
是落叶乔木,高达 15 m,胸径 40 cm,常成灌木状,分布于辽宁、河
北、山西、安徽、浙江、江西、福建、台湾、河南、湖北、湖南、四川、贵
州、云南等省[1]。《简易草药》《南宁市药物志》等古今药学典故
均有记录。八角枫的根有祛风,通络,散瘀,镇痛,并有麻醉及松
弛肌肉作用,主治风湿疼痛,麻木瘫痪,心力衰竭,劳伤腰痛,跌打
损伤的疗效;其叶能用于跌打瘀肿,骨折,疮肿,乳痈,乳头皲裂,
漆疮,疥癣,刀伤出血等病症。目前已有从八角枫的根、茎、枝条
中分离得到喜树次碱(venoterpine)和消旋毒黎碱(dl - anabasine)
两种生物碱[2],并用于肌肉松弛、镇痛、心脏、血压及呼吸影响的
研究,还有采用气相色谱 /质谱联用技术对黔产八角枫茎叶精油
成分含量进行检测的研究[3],但都欠深入、系统。八角枫传统的
功能主治为祛风除湿、舒筋活络、活血散瘀,且疗效确切,但至今
还没有明确的化学物质或有效部位的报道。本实验将采用化学
系统预试法对八角枫中的化学成分进行定性检测,为其进一步开
展祛风除湿、舒筋活络、活血散瘀的药理活性研究提供物质基础。
1 材料与仪器
1. 1 药材 从亳州药材市场购置八角枫药材,用手提式粉碎机粉
碎处理,保存,待用。
1. 2 试剂 乙醇、浓盐酸、浓硫酸、硼酸、氨水、氯仿、甲醇、镁粉、
五水硫酸铜、α -萘酚、茚三酮、三氯化铝、乙酸酐、3,5 -二硝基
苯甲酸、氢氧化钾、氢氧化钠、碘、碘化钾、冰乙酸、三氯化铁、醋酸
镁、苦味酸、磷钼酸、pH试纸、硅钨酸、碘化铋钾等,均为分析纯。
1. 3 仪器与设备 FA2004 电子天平、RE - 85A旋转蒸发仪、ZF
- 2 型三用紫外仪、电热恒温水浴锅、回流装置(自制)。
2 方法与结果
2. 1 供试样品的制备
2. 1. 1 乙醇提取液(预试液 1)称取八角枫粉末 20. 580 9 g 置
于 1 000 ml圆底烧瓶,加 75%乙醇 600 ml,在酒精灯上加热回流
120 min后,过滤得到乙醇提取液。乙醇提取液用旋转蒸发仪浓
缩至原来体积的一半[4]。
2. 1. 2 水提取液 称取八角枫粉末 10. 081 9 g放入烧瓶中,加入
蒸馏水 200 ml浸泡过夜,过滤得 100 ml冷水提取液(预试液 2)。
将剩余的八角枫残渣及滤液放入 55℃水浴中加热 1 h,过滤的热
水提取液(预试液 3)[5]。
2. 1. 3 酸水提取液(预试液 4)称取八角枫粉末 10. 675 1 g 放
入 250 ml 圆底烧瓶中,加 60%乙醇 150 ml,酒精灯上回流 60
min,放冷过滤,加稀盐酸酸化滤液,过滤,向过滤后的滤液加适量
氯仿,分层,除去氯仿层,得到酸水提取液[6]。
2. 2 所需试剂的配制 碱性硫酸铜试剂:10% NaOH(10 ml)+
5% CuSO4(10 ml) ;α -萘酚试剂:α -萘酚(1 g)+乙醇(10 ml) ;
茚三酮试剂:茚三酮(0. 2 g)+乙醇(100 ml) ;双缩脲试剂:10%
NaOH(10 ml) + 1%硫酸铜(10 ml) ;1%三氯化铁乙醇试剂:三
氯化铁(0. 5 g)+乙醇(50 ml) ;2%铁氰化钾试剂:铁氰化钾(1
g)+蒸馏水(50 ml) ;乙酸酐 -浓硫酸(19 ∶ 1)试剂:乙酸酐(1
ml)+浓硫酸(19 ml) ;溴甲酚绿试剂:溴甲酚绿(0. 1 g)+ 70%乙
醇(100 ml) ;1%三氯化铝乙醇试剂:三氯化铝(1 g)+乙醇(100
ml) ;碘化铋钾试剂:碘化铋钾(2 g)+冰乙酸(20 ml)+蒸馏水
(50 ml) ;硅钨酸试剂:取 5 g 硅钨酸,溶于 10 ml 水中,用盐酸调
至 pH 2;I2 - KI试剂:碘(1 g)+碘化钾(10 g)+蒸馏水(100 ml)
+醋酸(2 ml) ;7%盐酸羟胺醇试剂:盐酸羟胺(0. 7 g)+ 乙醇
(100 ml) ;1%醋酸镁甲醇试剂:醋酸镁(1 g)+甲醇(100 ml)。
2. 3 化学成分预实验 八角枫化学成分化学预试实验如为阳性
反应用“+”表示,阴性反应用“-”表示,若每种化合物的所有检
测反应均呈阳性时,初步认为含有该化合物。若部分反应为阳性
时,认为可能含有该化合物。若反应均为阴性时,初步认为不含
有该化合物。其实验现象、结果与结论见表 1。
收稿日期:2011-03-21; 修订日期:2011-09-31
基金项目:安徽省教育厅自然科学研究项目(No. KJ2011B182) ;宿州学院特色种植业苗种生产工程技术研究中心开放课题(No. 2011YKF19) ;宿州学
院大学生科研立项重点项目(No. KYLXLKZD04)
作者简介:翟科峰(1981-) ,男(汉族) ,安徽无为人,现任宿州学院化学与生命科学学院讲师,硕士学位,主要从事有效成分的研究工作.
表 1 八角枫中化学成分的定性检测结果
检测项目 预试液 检测方法 反应现象 结果 结论
糖及其苷类 3 碱性硫酸铜试验 少量红色沉淀产生 + 含有
萘酚试验 紫红色环 +
氨基酸、蛋白质 2 茚三酮试验 冷却呈蓝紫色 + 含有氨基酸
沉淀试验 加热或加酸未见沉淀 - 未能检测出蛋白质
双缩脲试验 试液未见紫红色出现 -
酚类和鞣质 3 三氯化铁试验 试液呈蓝色 + 含有
层析试验 出现蓝色斑点 +
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 2 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 2 期
续表 1
检测项目 预试液 检测方法 反应现象 结果 结论
皂苷 3 泡沫试验 大量持续性泡沫且加热不消失 + 含有
乙酸酐 -浓硫酸试验 呈紫红色,并在溶液上层逐渐变绿 +
有机酸 1 pH试纸试验 pH在 5 ~ 6 之间 + 含有
溴甲酚绿试验 出现蓝色斑点 +
内酯、香豆素 1 荧光试验 未见强荧光 - 未检出
异羟肟酸铁试验 试液未变红或紫色 -
内酯开环 -闭环反应 试液浑浊,加热后未必澄清 -
甾体、三萜 1 乙酸酐 - 浓硫酸试验 迅速变墨绿色 + 含有
氯仿 - 浓硫酸反应 上层呈黄红色,下层有绿色荧光 +
蒽醌类 1 碱性试验 试液呈红色 + 含有
浓硫酸试验 试液呈红色 +
乙酸镁反应 淡橙色沉淀 +
生物碱 4 碘化铋钾试验 大量棕黄色沉淀 + 含有
硅钨酸试验 大量淡黄色沉淀 +
碘 -碘化钾反应 大量褐色沉淀 +
强心苷 1 3,5 -二硝基苯甲酸反应 试液呈红色 + 含有
乙酸酐 -浓硫酸试验 界面有紫色环 +
Keller - Kiliani试验 b 上层变蓝色,界面呈棕色 +
黄酮类 1 硼酸试验 滤纸上未出现黄色斑点 - 未检出
盐酸 -镁粉反应 试液未变红 -
氨熏试验 滤纸上未出现黄色斑点 -
三氯化铝试验 滤纸上未出现黄色斑点 -
3 讨论
八角枫化学成分的系统定性研究检测结果表明,八角枫中含
有糖及其苷类、氨基酸、酚类和鞣质、皂苷、甾体、三萜、强心苷、蒽
醌及其苷类、生物碱、有机酸,不含有黄酮类、内酯香豆素。可能
由于蛋白质的含量低,导致蛋白质的双缩脲反应和沉淀反应试验
的现象不明显,未能检测出蛋白质。实验过程中还发现无论是水
提取液还是乙醇提取液遇碱均会变红,且乙醇提取液遇碱还会有
大量红色沉淀产生,这对其他需要先碱化提取液才能检测到的化
合物有很大的干扰,如:蛋白质的双缩脲反应、强心苷的 3,5 -二
硝基苯甲酸(Kedde)试验等,后查阅相关资料[6],可能是由于蒽
醌类的含量较高所导致的影响。
目前对八角枫中化学成分的研究偏重于生物碱类和精油等。
而对八角枫主治的祛风除湿、舒筋活络、活血散瘀等的化学成分
至今未深入研究,此项预实验结果将为八角枫化学成分的全面研
究提供实验依据,今后工作主要集中在对八角枫中化学成分的分
离、提纯等方面研究,有望能充分利用八角枫这一中药材。
参考文献:
[1] 孙建云,李吉宁,陈银花,等.八角枫孢子发生和雌配子发育[J].西
北植物学报,2000,20(3) :472.
[2] 吴一飞,巩 江,赵 婷,等.八角枫药学研究概况[J].安徽农业科
学,2010,38(20) :10676.
[3] 宋培浪,韩 伟,程 力,等.黔产八角枫茎叶精油成分研究[J].贵
州化工,2006,31(6) :20.
[4] 宫玉婷,阿不都拉·阿巴斯.梓树果实有效成分的初步研究[J].食
品科学,2008,29(5) :205.
[5] 张培成.黄酮化学[M].北京:化学工业出版社,2009:227.
[6] 徐仁生,叶 阳,赵维民.天然产物化学导论[M]. 北京:科学出版
社,2007:63.
收稿日期:2011-04-27; 修订日期:2011-08-29
基金项目:宁夏自然科学基金(No.[2007]0784)
作者简介:陈晓霞(1971-) ,女(汉族) ,山西平遥人,现任山东省青岛卫生学校副教授,硕士学位,主要从事神经电生理研究工作.
* 通讯作者简介:白 洁(1958-) ,女(满族) ,吉林白城人,现任宁夏医科大学基础医学院教授,学士学位,主要从事神经生理研究和心血管生理研究工
作.
槐定碱对大鼠学习记忆的影响及其 ERK信号转导机制
陈晓霞1,白 洁2*
(1.山东省青岛卫生学校,山东 青岛 266071; 2.宁夏医科大学基础医学院,宁夏 银川 750004)
摘要:目的 观察槐定碱(sophoridine,SRI)对大鼠学习记忆和海马神经元 p - ERK1 /2 表达的影响。方法 成年 SD 大鼠
24 只随机分为生理盐水对照组、槐定碱组、PD98059 ﹢槐定碱组,腹腔注射大剂量槐定碱(47. 83mg /kg)后,,观察各组大
鼠行为学改变,Morris水迷宫检测大鼠的学习和记忆,免疫组化测定海马组织内 p - ERK1 /2 阳性细胞数。结果 与生理
盐水对照组相比,槐定碱组大鼠逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数明显减少(P < 0. 05) ;海马组织内 p - ERK1 /2 阳性
细胞数明显增加(P < 0. 05)。经 PD98059 干预后,槐定碱致痫大鼠逃避潜伏期显著减小,穿越平台次数明显增多(P <
0. 05) ;海马组织内 p - ERK1 /2 阳性细胞数明显降低(P < 0. 05)。结论 槐定碱可能通过 ERK 信号通路损伤海马神经
元,从而影响大鼠的空间学习记忆能力。
关键词:槐定碱; p - ERK1 /2; 学习记忆
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 02. 018
中图分类号:R962 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2012)02-0296-03
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 2 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 2