全 文 ：·研究简报·
红千层的组织培养与快速繁殖
龚　伟 , 宫渊波 , 胡庭兴 , 张　健 , 辜云杰 , 麻泽龙
(四川农业大学 林学园艺学院 , 四川 雅安　625014)
摘要:以红千层带腋芽茎段为外植体 , 进行快速繁殖技术研究 ,其启动率30 d 可达 86.9%,繁殖系数 40 d 可达 30 ～
50倍 , 生根率 30 d 可达 95.3%。启动培养基为 MS+BA 2.0 mg/ L+NAA 0.01 mg/ L , 继代增殖以 MS +BA 1.0
mg/ L+NAA 0.1 mg/ L 最佳 ,生根培养以 1/2 MS 无激素效果最好。丛生苗在 5 ℃时可保存 160 d。
关键词:红千层;组织培养;快速繁殖;材料保存
中图分类号:Q943.1　　文献标识码:A　　文章编号:1000-2650(2003)04-0359-02
　　红千层系桃金娘科红千层属 ,是一种优良的园
林及盆栽观赏植物。树冠茂密 ,树形美丽 ,花密集聚
生 ,形同瓶子刷 ,雄蕊伸出 ,红艳夺目 ,十分美丽奇
特[ 1 ,2] 。目前 ,红千层主要依靠种子繁殖和扦插繁
殖 ,但其繁殖系数较低 ,难以满足规模生产和园林绿
地的需要 ,因而红千层组织培养是获得优质整齐苗
木的有效途径之一。本实验旨在通过组织培养进行
红千层的快速繁殖技术研究 ,为红千层的组培工厂
化生产奠定技术基础 。
1　材料与方法
供试材料为四川农业大学林木遗传育种实验场
盆栽红千层 ,选取生长健壮 、洁净且无病虫害植株的
当年生的直径为 0.2 ～ 0.4 cm 的半木质化枝条。将
枝条在室内去除叶片 ,自来水冲洗数次 。用 1%的
洗衣粉水浸泡 10 min后用毛笔刷清洗外植体表面 ,
再用流水冲洗 30 min。在无菌条件下 ,用 75%酒精
消毒 0.5 min ,再用 0.1%升汞(HgCl2)处理 6 ～ 8
min ,无菌水冲洗 5 ～ 6次后 ,切割成 1 ～ 2 cm 的带腋
芽茎段作为接种外植体接种于启动培养基上 ,接种
后先暗培养 1 周再转入光照培养 。初代培养 30 d
后剪取诱导出的芽接种于继代培养基上 ,观察其增
殖情况。把部分增殖后的丛生苗置于 5 ℃的冰箱中
进行低温培养 , 160 d后观察其生长情况 。将继代培
养所获丛苗切割成 4 ～ 7个芽一簇 ,在 NAA浓度为
0.01 mg/L 的培养基上壮苗培养[ 3] , 20 d 后接种于
生根培养基上进行根诱导 ,30 d时统计生根情况。
启动培养 、继代培养和壮苗培养以 MS 为基本
培养基 ,生根诱导以 1/2 MS 为基本培养基 。生长
调节剂采用 6 -BA 和 NAA , 每种培养基均加入
0.7%的琼脂和 3%的蔗糖(其中生根培养基为
1.5%),pH 5.8 ～ 6.0。培养条件:培养室温度为
(25±2)℃,光照强度 1500 ～ 2000 lx ,光照 12 h/d。
2　结果与分析
2.1　外植体的萌动与生长
将外植体接种于启动培养基上培养 , 9 d后腋芽
开始萌发 , 30 d后腋芽可生长到 0.5 ～ 1 cm 且叶色
浓绿生长正常 。不同浓度的 6-BA 对红千层启动
率的影响结果见表1 。从表 1中可以看出 6-BA浓
度为 2.0 mg/L 时外植体的启动率明显的高于 6-
BA浓度为 1.0 mg/L 和 3.0 mg/L ,说明 6-BA 浓
度为 2.0 mg/L 时有利于腋芽的诱导。
表 1　6-BA浓度对红千层启动率的影响
Table 1　Effect of 6-BA concentration on the induction
rate of Callistemon rigidus
激素浓度(mg/ L) 外植体数(个) 启动外植体数(个) 启动率(%)
6-BA 1.0+NAA 0.01 90 35 44.3
6-BA 2.0+NAA 0.01 90 73 86.9
6-BA 3.0+NAA 0.01 90 52 62.7
　　注:启动率=启动外植体数/(接种外植数-污染外植体数)。
2.2　丛生芽的诱导与增殖
将在启动培养中诱导出的腋芽接种于增殖培养
基上培养 ,12 d后外植体基部开始膨大 ,并逐渐产生
愈伤组织 。经两次继代培养后 ,愈伤组织便逐渐分
化出小丛芽。将分化出的丛生芽切割成 3 ～ 5个芽
苗 1簇 ,继续进行继代培养 。切割后的丛芽生长 、分
化较快 ,40 d可继代 1次 ,其结果见表 2 。
表 2　不同 BA 浓度对丛生芽继代增殖的影响
Table 2　Shoo t multiplication w as affected by 6-BA
concentra tion in micropropagation
激素浓度(mg/ L) 接种芽苗数(株) 增殖倍数(株) 芽苗高度(cm)
BA 0.5+NAA 0.1 60 8 ～ 15 0.8～ 1.2
BA 1.0+NAA 0.1 60 30 ～ 50 0.5～ 1.0
BA 1.5+NAA 0.1 60 40 ～ 60 0.4～ 0.7
BA 2.0+NAA 0.1 60 40 ～ 60 0.2～ 0.5
第 21 卷　第 4 期
2003年 12 月 　　　　　　　　 　
四川农业大学学报
Journal of Sichuan Ag ricultural University
　　　　　　　　 　Vol.21 No.4
Dec.2003
收稿日期:2003-05-20
DOI :10.16036/j.issn.1000-2650.2003.04.020
从表 2中可看出随着 BA 浓度的增加其增殖倍
数随之增加 ,但其丛生芽的高生长却随之下降 ,说明
高浓度的 6-BA有利于愈伤组织的诱导与分化 ,同
时对丛生苗的高生长有一定的抑制作用。结果表
明:BA浓度为 1.0 mg/ L 时较有利于愈伤组织的诱
导与分化 ,而且丛生芽较多 ,高 、径生长适中。
2.3　继代材料的保存
在一般培养温度条件下 ,继代培养 40 d后其愈
伤组织生长与分化便开始减缓 ,60 d后几乎停止 ,同
时高 、径生长较缓慢 。超过 80 d后部分分化出的小
苗将逐渐枯黄死去 , 160 d后有 2/3以上的丛生苗死
去且愈伤组织基部培养基变黄 。将经过继代培养后
的丛生苗在 5 ℃的冰箱中进行冷藏保存培养 160 d
后丛生苗无生长不良反应 ,再将丛生苗切割进行继
代培养 ,其生长与分化与一般培养条件下直接进行
继代培养相比无显著差异 。
2.4　壮苗培养与不定根的诱导
继代培养所获芽苗矮小 、纤弱不能直接进行生
根诱导 ,因此将其切割后进行壮苗培养。20 d 后芽
苗可长到 1.5 ～ 2.5 cm 长 ,径能明显增粗 。然后将
壮苗培养所获生长健壮的无根单苗 ,接种到生根培
养基上进行生根诱导 , 8 d后芽苗下切口处微有膨
大 ,12 d后膨大的愈伤组织表面有白色突起 ,分化出
根的生长点 , 15 d 后长成白色小根。1个月后其结
果见表 3。
从表 3中可以看出 ,当 NAA浓度为 0 时 ,无根
单苗生根整齐 、均匀且根的质量较好。
2.5　试管苗的移栽
将经生根诱导所获的生根瓶苗在室温散射光下
培养 3 d ,打开封口膜于温室大棚预培养 2 d ,洗去根
部培养基 ,移栽到珍珠岩∶蛭石=1∶1的育苗基质中
或栽植于营养袋中。保持 85%左右的湿度 10 d , 30
d后成活率可达 85.7%。
表 3　NAA浓度对生根诱导的影响
Table 3　Effect of NAA concentration on roo ting
NAA浓度(mg/ L)
接种芽苗数(株)
生根率
(%)
平均根数(条)
平均根长(cm) 生根状况
　0 90 95.3 5.6 1.1 根多且均匀而长
0.01 90 87.1 4.1 0.7 根多且生根整齐
0.05 90 85.3 3.5 0.6 生根不整齐
0.1 90 73.5 2.8 0.4 根短且生根不整齐
3　结论与讨论
本试验采用红千层的带腋芽茎段为外植体诱导
愈伤组织分化出丛生苗 ,启动培养 9 d 后侧芽开始
萌动 ,30 d后腋芽可生长到 0.5 ～ 1 cm;继代培养中
切割后的芽苗生长 、分化迅速 ,40 d可继代 1次 ,其
增殖倍数可达 30 ～ 50倍 ,经壮苗培养后芽苗生长健
壮 、高度适中;生根培养中 ,出根快 、整齐 、生根率高 ,
根系发育良好 。生根苗移栽成活率高 ,生长正常。
符合组培快繁的要求。
在一般培养条件下继代培养可推迟到 80 d左
右进行。但如果需再次推迟继代培养的 ,可将经过
继代培养的丛生苗在 5 ℃的冰箱中进行冷藏保存培
养 ,这样可将继代培养推迟 160 d 进行。经过继代
培养后的丛生苗在 5 ℃的培养条件下保存 ,其保存
时间能否再延长有待于进一步的观察和研究。
参考文献:
[ 1] 　陈俊愉 , 程诸珂.中国花经[ M] .上海:上海文化出版社 ,
1990.442-443.
[ 2] 　楼炉焕.观赏树木学[ M ] .北京:中国农业出版社 , 2000.
457.
[ 3] 　龚　伟 , 王米力 , 石大兴.二色茉莉组织培养技术体系研究
[ J] .四川农业大学学报 , 2003 , 21(1):78-81.
[ 4] 　谭文澄 , 戴策刚.观赏植物组织培养技术[ M ] .北京:中国林
业出版社 , 1991.
Tissue Culture and Rapid Propagation of Callistemon rigidus
GONG Wei , GONG Y uan-bo , HU T ing-xing , ZHANG J ian , GU Yun-j ie , MA Ze-long
(College o f Forestry and Ho rticulture , Sichuan Agricultural University , Yaan 625014 , Sichuan , China)
Abstract:The micropropagation technique of Callistemon rigidus is developed by using section of stem w ith
buds for explants in this study .The induction rate is 86.9%in 30 days;the multiplication coefficient is 30 ～ 50
times in 40 days;the root ing rate is 95.3% in 30 days.The initiation medium is M S+BA 2.0 mg/L+NAA
0.01 mg/L;the best subculture medium is MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;the ideal root ing medium is
1/2 MS w ithout phy tohormones.The shoots can be preserved for 160 days at 5 ℃.
Key words:Callistemon rigidus;tissue culture;rapid propagation;material preservation
(本文审稿熊庆娥)
360　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　四川农业大学学报　　　　　　　　　　　　　　　　　　第 21 卷