全 文 :第 34 卷 第 3 期 大 连 大 学 学 报 Vol.34 No.3
2013 年 6 月 JOURNAL OF DALIAN UNIVERSITY Jun. 2013
扁担杆乙酸乙酯部位镇痛作用
杨春光,高 松
(大连大学 医学院,辽宁 大连 116622)
摘 要:研究扁担杆乙酸乙酯部位的镇痛作用。采用化学方法制备扁担杆乙酸乙酯部位。采用热板法和醋酸致小鼠扭
体实验观察乙酸乙酯部位对小鼠的镇痛作用。结果发现低浓度扁担杆乙酸乙酯部位能能明显提高小鼠痛域值并减少
醋酸致小鼠扭体次数;中浓度乙酸乙酯部位可以减少醋酸致小鼠扭体次数,但对小鼠痛域值并没有影响。实验结果
提示扁担杆乙酸乙酯部位具有一定镇痛作用。
关键词:扁担杆;乙酸乙酯部位;镇痛
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1008-2395(2013)03-0085-03
收稿日期:2013-03-25
作者简介:杨春光(1971-),男,博士,讲师,研究方向:心血管药理、中药药理。
扁担杆 Grewia biloba. 属椴树科扁担杆属植物,
其根、茎、叶均可入药,性味甘、苦、温,归肝、脾、
胃经[1]。主要分布于江西、湖南和浙江,在大连地区
也有分布,中国《中药大辞典》中记载其全株和枝叶
能祛风除湿、理气消痞。在我国南方部分地区,扁担
杆属植物常被作为民间草药用来治疗皮肤脓胞疮等
细菌感染。对扁担杆正丁醇提取物的药理研究发现其
具有一定的抗炎镇痛作用[2]。本研究主要观察扁担杆
乙酸乙酯萃取部位的镇痛作用。
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器
扁担杆药材采自大连大黑山(由大连大学医学院
中药教研室高松鉴定);乙酸乙酯(上海禾丰药业有
限公司);盐酸曲马多(武汉华美华科技有限公司);
冰醋酸(北京试剂厂);Heidolph LABOROTA-4000
型旋转蒸发仪(国华电子有限公司);电子分析天平
BP211D(Startorius);YLS-6B 智能热板仪(淮北正
华生物仪器设备有限公司)
1.2 药材的提取与分离
扁担杆干燥枝 100 g,粉碎,75%乙醇在室温下
浸泡 12 h 后,用 10 倍 75%乙醇加热回流提取 3 次,
每次 1 h,合并滤液,减压浓缩得浸膏约 10 g。再以
石油醚萃取除色素、酯类后,经乙酸乙酯多次萃取,
萃液减压浓缩、冷冻干燥,得浸膏粉。把浸膏粉用
1%吐温-80 溶液溶解至 100 mL,制成 1g 生药/mL。
再分别取 25 mL、12.5 mL、5 mL 稀释至 100 mL 容
量瓶中,分别得高浓度(25%)、中浓度(12.5%)、低浓
度(5%)药液。
1.3 动物分组
选择痛域在 15~30 s,体重(20±2)g 的雌性小
鼠 50 只(由大连大学实验动物中心提供),随机分为
正常对照组、阳性药物对照组、低浓度给药组、中浓
度给药组和高浓度给药组,共 5 组,每组小鼠各 10
只。高、中、低浓度给药组分别 ig 高、中、低浓度
扁担杆乙酸乙酯溶液 0.2 mL/10 g,正常对照组 ig 同
体积生理盐水,以上各组连续给药 3 d,每天 1 次。
阳性对照组 ip 盐酸曲马多 0.15 mg/10g,实验前给药
1 次。
1.4 热板法测定小鼠痛域值
首次给药前将小鼠置于(55±0.5) ℃热板仪中,记
录小鼠舔后足时间作为该鼠痛阈值,凡 30 S 内不舔
后足或跳跃者弃之不用。将合格小鼠再测一次痛阈值
(2 次测试间隔不小于 15 min),2 次均值作为该鼠基
础痛阈值。末次给药后 15 min、30 min、60 min 使用
热板仪分别测各组小鼠痛阈值,跳跃 1 次(含)以上
者剔除,痛阈超过 60 s 者按 60 s 计,计算痛阈提高
百分率,痛阈提高率(%) = (给药后痛阈值-基础痛阈
值)/基础痛阈值×100%。
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1.5 醋酸致小鼠扭体实验
按文献[3]方法,选雄性小鼠 50 只(由大连大学
实验动物中心提供),雌雄各半,体重(20±2)g,小
鼠分组及给药方法同 1.3。最后一次给药 30 min 后,
ip0.8%醋酸 0.2 mL/10 g(醋酸溶液临用前配制),记
录各组 15 min 内扭体(即腹部内凹、躯干与后肢伸
张、臀部高起)次数。
1.6 统计分析
所有数据以 x ±s 表示,采用 SPSS11.0 统计软件
进行单因素方差分析和 t 检验,P < 0.05 认为有显著
性差异。
2 结果
2.1 对热板法所致小鼠疼痛的影响
低浓度组和曲马多组小鼠痛域提高百分率在给
药后 15 min、30 min 和 60 min 有明显增加(表 1)。
低浓度组给药后 15 min、30 min 和 60 min 痛域提高
值与对照组比有显著性差异(表 2)。
表 1 各组痛阈提高百分率
组别 动物数(只)
痛阈提高百分率(%)
15min 30min 60min
低浓度组 10 58.2 34.3 44.2
中浓度组 10 8.6 5.5 -1.3
高浓度组 10 6.0 10.8 12.9
曲马多组 10 56.7 41.3 53.3
对照组 10 5.3 7.5 8.5
表 2 给药后各组痛阈提高值
组别 动物数(只) 给药前痛阈值(s)
给药后不同时间痛阈提高值(s)
15min 30min 60min
低浓度组 10 13.5±3.3 9.6±4.9* 5.8±3.7* 7.8±4.7*
中浓度组 10 18.0±6.6 3.0±3.8 2.9±2.7 -2.3±5.1
高浓度组 10 14.2±3.2 1.0±2.5 3.3±4.2 2.7±3.1
曲马多组 10 16.6±4.9 9.4±6.2* 6.5±5.0* 8.2±5.2*
对照组 10 19.1±6.9 -1.3±2.9 3.4±2.9 3.5±4.9
注:与对照组比较*P<0.05
2.2 醋酸致小鼠扭体实验
实验结果显示,扁担杆乙酸乙酯部位低浓度组和
中浓度组对小鼠扭体次数有明显的抑制作用(表 3)。
表 3 扁担杆乙酸乙酯部位对小鼠扭体次数的影响
组别 剂量/10g 扭体次数
低浓度组 0.2 mL 10.7±3.7*
中浓度组 0.2 mL 9.8±6.3*
高浓度组 0.2 mL 15.4±4.7
曲马多组 0.15 g 11.0±3.6*
对照组 0.2 mL 17±3.9
注:与对照组比较*P<0.05
3 讨论
扁担杆为椴树科扁担杆属植物,全世界约有 150
种,为灌木或小乔木。据《中国植物志》[4]记载我国
有 27 种和 1 存疑种,主要分布于云南、广西、广东
和江西等省。目前对扁担杆不同提取部位的药理活性
研究还不多见。本研究采用热板法和醋酸致小鼠扭体
实验观察了扁担杆乙酸乙酯部位的镇痛作用。实验结
果发现,低浓度乙酸乙酯部位能明显提高小鼠痛域值
并可以减少醋酸致小鼠扭体次数。中浓度乙酸乙酯部
位可以减少醋酸致小鼠扭体次数,但对小鼠痛域值并
没有影响。实验结果提示,低浓度乙酸乙酯部位的镇
痛可能既通过中枢神经又通过外周神经产生作用,中
浓度乙酸乙酯部位的镇痛作用可能只通过外周神经
产生。扁担杆乙酸乙酯部位已经分离的主要化学成分
第 3 期 杨春光 等:扁担杆乙酸乙酯部位镇痛作用 87
有木栓酮、表木栓醇、二十一烷酸、β-谷甾醇、棕榈
酸丙酯、儿茶素等[5]。扁担杆乙酸乙酯部位中哪种成
分发挥镇痛作用以及镇痛作用的机制还需进一步探
讨。
参考文献:
[1] 高松. 辽宁中药志: 植物类[M]. 辽宁: 辽宁科学技术出版
社, 2010: 595.
[2] 杨春光, 高松, 欧阳檐秀. 扁担杆正丁醇提取物的抗炎镇
痛作用[J]. 大连大学学报, 2012(6): 86-88.
[3] 徐叔云, 卞如濂, 陈修. 药理实验方法学[M]. 北京: 人民
卫生出版社, 1992: 719.
[4] 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志: 第一分
册[M]. 北京: 科学出版社, 1989: 89.
[5] 刘建群, 吴继梅, 寇晓莉, 等. 扁担杆的化学成分研究[J].
中药材, 2008(10): 1505-1507.
Study on the Abirritation Effects of Ethyl Acetate Extract from Grewia Biloba in
Mice
YANG Chun-guang, GAO Song
(Medical College of Dalian University, Dalian 116622, China)
Abstract: To study the abirritation effects of the ethyl acetate extract from Grewia biloba. The ethyl acetate extract
from Grewia biloba was prepared. The hot-plate procedure test and acetic acid writhing method in mice were used for
the study of abirritation effect. Results showed the low concentration of acetyl acetate extracted extract from Grewia
biloba could relieve the pain caused by hot-plate and inhibit acid-induced mouse writhing response. The medium
concentration of acetyl acetate extract could inhibit acid-induced mouse writhing response, but could not increase the
mice pain threshold. The conclusion was that the ethyl acetate extract from Grewia biloba showed analgesic effects in
mice.
Key words: Grewia biloba; ethyl acetate extract; abirritation