全 文 ：2013.4
粉团蔷薇是多花蔷薇的一个变种，其与切花月
季亲和性较好，别名多花蔷薇、野蔷薇，为蔷薇科蔷
薇属落叶攀援灌木，其色、香、形俱佳，有很高的观赏
价值和园林应用潜力。原产于我国中部及南方各省，
在我国有悠久的栽培历史，且分布广泛。目前，对于
蔷薇的繁殖多采用扦插技术，且是粉团蔷薇不耐根
癌病，限制了其在园林上的广泛应用。传统的繁殖方
法，如扦插、嫁接等，由于植物生存环境的改变而难
以成活或成活率极低，但组织培养可以提供适宜的
温度、湿度、光照和植物所需的激素及碳水化合物，
故可进行大量繁殖。在此，研究粉团蔷薇的组织培养
技术可以快速大量繁殖新品种，加速品种更新换代，
促进蔷薇产业的发展，从而为我国的园林事业做出
贡献。
一、材料与方法
（一）材料
植物材料：粉团蔷薇茎段，采集于云南省农业科
学院高山经济植物。
研究所基地蔷薇资源圃内多年生粉团蔷薇。其他
材料:MS培养基,6-BA,NAA等。所用仪器为超净工作
台、高压灭菌锅、消毒器。
（二）方法
将蔷薇截去叶片、叶柄。选取顶端含侧芽的3个
茎段作为外植体。外植体经过相应的预处理后，用
75％乙醇浸泡 30 秒，0.1%的升汞消毒 5 分钟、8 分
钟、10分钟、12分钟，无菌水冲洗4次～6次。灭菌过
程中材料需完全侵入溶液中，用无菌滤纸把灭菌后外
植体表面多余的水分吸干,接种到MS+6-BA2.0毫克/
升+NAA0.1毫克/升（蔗糖30克/升，琼脂4克/升，
pH5.8～6.0）培养基中。培养温度21摄氏度～25摄氏
度，光照强度45勒克斯～1275勒克斯，光照时数10
小时～12小时。每种消毒时间接种20个茎段(即20
瓶)，重复2次。培养3周，3周后观察污染情况。
1、6-BA浓度的筛选
将无菌芽转接到分化培养基上，以MS为培养附
加6-BA与NAA作为不定芽诱导培养基。
(1)MS+NAA0.1毫克/升+6-BA0.5毫克/升
(2)MS+NAA0.1毫克/升+6-BA1.0毫克/升
(3)MS+NAA0.1毫克/升+6-BA1.5毫克/升
(4)MS+NAA0.1毫克/升+6-BA2.0毫克/升
蔗糖30克/升，琼脂4克/升，pH5.8～6.0。培养
温度21摄氏度～25摄氏度，光照强度45勒克斯～
1275勒克斯，光照时数10小时～12小时。重复2次。
培养3周，3周后观察不定芽诱导情况。
2、光照强度对蔷薇不定芽生长的影响
将分化出的不定芽在不同光照强度下培养，培养
基为MS+NAA0.1毫克/升+6-BA1.0毫克/升，蔗糖
30克/升，琼脂4克/升，pH5.8-6.0。
a.光照强度:994～1275勒克斯
b.光照强度:48～109勒克斯
蔗糖30克/升，琼脂4克/升，pH5.8～6.0。培养
温度21摄氏度～25摄氏度，光照时数10小时～12
小时。培养3周，3周后观察不定芽生长情况。
二、结果与分析
（二）外植体最佳消毒方法
粉团蔷薇组织培养技术研究
李剑宁
科 技 教 育38
2013.4
表1 灭菌时间不同的灭菌效果
较外植体灭菌效果见表1。试验结果反映：4个时
间梯度中的 0.1％升汞消毒时间 10 分钟污染率为
40.0%,是4个处理中污染率最低的，灭菌效果最好。
因此灭菌方法 75%乙醇浸泡 30 秒→0.1%升汞消毒
10分钟→无菌水冲洗4次～6次是本次蔷薇茎段外
植体灭菌试验最适合的方法。根据实验结果表明
0.1％升汞消毒时间10分钟污染率最低，但和前人的
研究结果有不一致。原因分析：试验材料长期暴露室
外，灭菌不彻底；人为的操作失误造成；培养的环境不
清洁。
（二）不同6-BA浓度诱导不定芽的情况
表2 6-BA表2 不同浓度诱导芽效果
不同6-BA浓度诱导不定芽效果见表2。试验结
果表明，处理（2）即1.0毫克/升浓度的6-BA生长效
果较好，诱导率为 31.57%，不定芽高度较高。即
MS+NAA0.1毫克/升+6-BA1.0毫克/升能够很好地
诱导蔷薇茎段不定芽。1.0毫克/升6-BA诱导不定芽
的生长效果与其它浓度有明显的差异。处理（1）不定
芽高度平均水平较低，超过5厘米以上的不定芽有1
个，3厘米～4厘米名为2个，有效侧芽数3个；处理
（2）不定芽高度平均水平较高，超过5厘米以上的不
定芽有3 个，3厘米～4厘米有3个，有效侧芽数 6
个。原因分析：当6-BA浓度较低时蔷薇幼芽的生长
受影响；当6-BA浓度越高对月季幼芽的抑制作用越
明显。
（三）光照强度对不定芽生长的影响
表3 光照强度对月季不定芽生长的影响
蔷薇组织培养过程中，在自然散射光（994 勒克
斯～1275勒克斯）照射下，月季幼芽的芽较绿；照强
度较低（45勒克斯～109l勒克斯）的环境下培养，蔷
薇的幼芽幼芽偏白，萌动晚（表3）。由表3的试验结
果可以看出，处理a的幼芽长得快，长得高，侧芽多，
并且长得健壮；而处理b的幼芽长势较弱。通过比较
可以看出，蔷薇不定芽生长需要光照。原因分析：自然
光照下（2000勒克斯），蔷薇幼芽可以正常的进行光
合作用，自然光照有利于幼芽的转绿。其原因和机理
有待于深入研究。
三、小结与讨论
众所周知，植物激素是植物新陈代谢中产生的天
然化合物，它能以极微小的量影响到植物的生理生化
活动。生长素的作用主要是促进细胞伸长，诱导受伤
的组织表面一至数层细胞恢复分裂能力，形成愈伤组
织，促进生根等。细胞分裂素有诱导芽的分化，这时细
胞分裂素起主导作用。国内外对蔷薇属植物的再生有
许多的报道, 但目前未见粉团蔷薇组织培养方面的
报道。通过本试验结果表明蔷薇的最佳灭菌方法为为
70%乙醇浸泡30秒→0.1%升汞消毒 10分钟→无菌
水冲洗 4 次～6 次。茎段在 MS+NAA0.1 毫克 / 升
+6-BA1.0毫克/升的培养基中不定芽诱导率较高，达
到31.57%，诱导出不定芽生长效果好，高度较高。蔷
薇不定芽在光照条件下生长状况较好。本试验只是对
蔷薇一个品种进行研究，但用于其它品种的蔷薇快繁
时，就不可盲目套用，仅供参考。
0.1％升汞消
毒时间(分钟)
接种茎段数
(个)
污染茎段数
(个)
污染率(%)
5 40 19 47.5%
8 40 23 57.5%
10 40 16 40.0%
12 40 19 47.5%
光照
处理
总芽数
(个)
芽高超过3
厘米个数(个)
有效侧芽
数(个)
生长情况
a 50 10 14
芽较绿长
势旺，幼叶
微微展开
b 52 1 5
幼芽偏白
侧芽萌动
晚,生长慢
分化培
养基
接种
茎段
数(个)
不定芽高度（个）
有效侧
芽数(个)
诱导率5厘米
以上
3厘米～4
厘米
（1） 17 1 2 3 17.64%
（2） 19 3 3 6 31.57%
（3） 13 0 2 2 15.38%
（4） 17 0 1 1 5.88%
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