全 文 ： 收稿日期：2003-07-18
基金项目：广西自然科学基金(桂科自 0229017，桂科基 0009012)和广西“十百千人才工程”人选专项资金(2000229)资助
作者简介：卢塔山(1953-)，男，广西上林人，助理研究员，从事植物组织培养研究。

野生毛葡萄远缘杂交后代离体培养研究
卢塔山 1，彭宏祥 1，张 瑛 1，覃斯华 1，李容柏 2
（1.广西农业科学院 园艺研究所 广西 南宁 350007；2.广西农业科学院 重点实验室，广西 南宁 530007）

摘 要：以MS、1/2MS、GS三种培养基为基本培养基，以及在 1/2MS培养基上分别附加 6-BA 1.0mg/L + IAA
0.1mg/L和 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.1mg/L两组植物生长调节剂，对野生毛葡萄及其远缘杂交种后代 213、741、
196、296、B2 等 6个品种(种类)进行茎段腋芽萌发离体培养试验。结果表明：1/2MS培养基为基本培养基最
适宜茎段腋芽的诱导萌发；NAA对毛葡萄及其杂交种后代的萌芽生长影响明显，若单独使用，对绝大多数品
种的茎段腋芽萌发有明显的抑制作用，与 IAA交替使用，则对茎段腋芽萌发有促进作用。
关键词：毛葡萄；远缘杂交种；离体培养
中图分类号：S663.1; Q943.1 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2003)03-0047-03
In vitro culture of distant hybrid of wild Vitis quinquangularis
LU Ta-shan1, PENG Hong-xiang1, ZHANG Ying1, TAN Si-hua1, LI Rong-bai2
(1. Horticultural Institute of Guangxi Agricultural Academy, Nanning 530007, Guangxi China; 2. Key Laboratory of Guangxi
Agricultural Academy, Nanning 530007, Guangxi China)

Abstract: Stem callus cultures of wild Vitis quinquangularis and its distant hybrids 213, 741, 196,
296 and B2 were used to study the effects of various basal media (MS, 1/2MS and GS) supplemented
with different proportions of growth regulators (6-BA 1.0mg/L + IAA 0.1mg/L and 6-BA 1.0mg/L
+NAA 0.1mg/L) on germination of axillary buds. The results showed that 1/2MS was optimal for bud
induction. The bud germination of wild V. quinquangularis and its distant hybrids (except B2) were
inhibited when treated with NAA. The alternate treatment with NAA and IAA could promote the
germination of axillary buds.
Key words: Vitis quinquangularis; distant hybrids; in vitro culture

广西桂北和桂西的石山地区蕴藏着丰富的野生葡萄资源，此类野生资源属于东亚种群，其中毛葡
萄(Vitis quinquangularis)蕴藏量最大，分布最广。广西产区利用野生毛葡萄酿造的野生葡萄酒，以其独
特的山野味，畅销国内外市场[1]。但由于东亚种群野生葡萄多为雌雄异株，果穗和果粒较小，浆果含
酸量偏高，丰产稳产性较差，扦插繁殖育苗成活率较低，这些因素制约了野生葡萄资源的开发、优质
原料基地建设，以及创品牌和产业化的发展。因此，很有必要引进利用国外酿酒葡萄种质与本地野生
葡萄进行远缘杂交，从中筛选出适应本地栽培的优良野生葡萄杂种后代的新品种，并通过组织培养快
速繁殖优良种苗供生产应用。本研究对野生毛葡萄远缘杂交种采用不同种类的培养基附加不同的植物
生长调节剂进行茎段腋芽萌发组培试验，从中筛选出合适的培养基配方，为进一步对毛葡萄远缘杂交
种的筛选观察、遗传性鉴定、快速繁殖和种植推广奠定基础。

2003,32(3):47-49.
Subtropical Plant Science
第 32卷 ﹒48﹒
1 材料与方法
1.1 材料及处理
试验材料取自广西农业科学院园艺研究所葡萄杂交品种试种园。供试品种编号 196、213、741、296
（毛葡萄为母本，欧亚种酿酒品种为父本的远缘杂交后代）和 B2（毛葡萄为母本，美洲种酿酒葡萄品
种为父本的远缘杂交后代）；对照为广西野生毛葡萄。采用各供试品种的枝条顶部约 5～8cm、带 3～4
个节位芽的嫩枝，剪去枝条上的叶片，用无菌水冲洗后，在超净工作台内将材料放入 0.1%升汞液中消
毒 5min，然后用无菌水漂洗 5次，切成 1.5～2cm长带腋芽的茎段，接种于经高温消毒过的培养基上，
置于 2支 40W日光灯 (约 2 500 lx) 下、温度 25～30℃，光照 11±1h/d的培养室中培养。
1.2 培养基
采用MS、1/2MS、GS三种培养基，均加入蔗糖 3%、琼脂 0.4%，pH5.8，并分别附加两组植物生
长调节剂（6-BA 1.0 + IAA 0.1和 6-BA 1.0 + NAA 0.1，单位mg/L，下同）进行茎段腋芽诱导发芽试验。
2 结果与分析
2.1 不同培养基对茎段腋芽萌发的影响
以MS、1/2MS、GS为基本培养基，三种均加入相同浓度的 BA 1.0和 IAA 0.1，接种 6个参试品
种的无菌外植体茎段，进行腋芽萌发离体培养，结果表明，茎段腋芽萌发率存在差异(表 1)。从表 1可
见，各品种的腋芽萌发率在 1/2MS培养基均为最高，萌发率在 21.7%～66.7%之间；MS培养基次之，
萌发率在 18.2%～62.5%之间；GS培养基最低，萌发率在 15.0%～50.0%之间；此外，在MS和 1/2MS
培养基上萌发的嫩芽生长较为正常，而在 GS培养基上萌发的嫩芽，大多生长偏弱。
表 1 不同种类培养基上茎段腋芽萌发情况
MS培养基 1/2MS培养基 GS培养基 品种 接种数 萌发数 萌发率(%) 接种数 萌发数 萌发率(%) 接种数 萌发数 萌发率(%)
213 44 10 22.7 32 8 25.0 32 6 18.8
741 30 6 20.0 26 6 23.1 32 6 18.8
196 32 6 18.8 18 4 22.2 32 6 18.8
296 18 4 22.2 32 8 25.0 30 6 20.0
B2 16 10 62.5 12 8 66.7 12 6 50.0
对照 44 8 18.2 46 10 21.7 40 6 15.0
2.2 不同植物生长调节剂对茎段腋芽萌发的影响
不同品种茎段的无菌外植体，接种到附加 6-BA 1.0 + IAA 0.1和 6-BA 1.0 + NAA 0.1的 1/2MS培养
基上。结果（表 2）表明，附加 IAA的培养基上，所有供试品种茎段的腋芽均能萌发，萌发率在 21.7%～
66.7%之间；在附加 NAA的培养基上，213、741、196、296和对照（毛葡萄）5个品种在接种后一周
内均表现茎段外植体生长充实、
饱满，随后迅速膨大，并形成愈
伤组织块，无腋芽萌发，可见
NAA明显抑制茎段腋芽的萌发，
本结果与邹瑜等的结果 [2]相似；
但 B2 品种的外植体没有出现膨
胀和愈伤组织产生，接种 7d后，
茎段腋芽陆续萌发（萌发率高达
87.5%），且生长正常（表 2）。
表 2 不同植物生长调节剂组合(mg/L)对茎段腋芽萌发的影响
6-BA 1.0 + IAA 0.1 6-BA 1.0 + NAA 0.1
品种 接种数 萌发数 萌发率(%) 接种数 萌发数 萌发率(%)
213 32 8 25.0 24 0 0
741 26 6 23.1 32 0 0
196 18 4 22.2 28 0 0
296 32 8 25.0 30 0 0
B2 12 8 66.7 16 14 87.5
对照 46 10 21.7 38 0 0
第 3期 卢塔山,等：野生毛葡萄远缘杂交后代离体培养研究 ﹒49﹒
2.3 不同植物生长调节剂交替使用对茎段腋芽萌发的影响
杂交种 213、741、196、296及毛葡萄（对照）在附加 6-BA 1.0 + NAA 0.1的 1/2MS培养基上培养
7d，待外植体生长充实饱满后，转接到附加 6-BA 1.0 + IAA 0.1的 1/2MS培养基上继续培养。转接后
茎段腋芽萌发率比单独附加 6-BA 1.0 + IAA 0.1 培养基的明显提高，萌发率从 21.7%～25.0%提高到
31.3%～42.1%（表 3），且萌发时间提早 3～5d，外植体生长正常。表 3结果表明，野生毛葡萄及其远
缘杂交种后代的大多数品种，对 NAA较为敏感，若用量合适，方法恰当，对其茎段腋芽萌发和生长会
有促进作用。
表 3 不同植物生长调节剂交替使用对茎段腋芽萌发的影响
在 6-BA 1.0 + NAA 0.1培养 7d后转入 6-BA 1.0 + IAA 0.1 品种 6-BA 1.0 + IAA 0.1 萌发率（%）
6-BA 1.0 + NAA 0.1
萌发率（%） 接种数 萌发数 萌发率(%)
213 25.0 0 18 6 33.3
741 23.1 0 32 10 31.3
196 22.2 0 32 10 31.3
296 25.0 0 30 10 33.3
对照 21.7 0 38 16 42.1
3 讨 论
毛葡萄远缘杂交优良品种由于母株较少，采用扦插嫁接方法难于满足生产上对种苗的需求，因此，
进行组培快繁研究以提供充足的良种种苗，具有现实意义。
在本研究的对比试验中，参考了曹孜义[3]的葡萄离体组培技术。本研究结果表明，3种培养基中，
1/2MS培养基对茎段腋芽萌发生长效果最好,与陈祖玉报道[4]基本一致。所有参试品种在附加 6-BA 1.0 +
IAA 0.1的培养基上，茎段腋芽均能萌发，与前人的试验结果类似。在使用含 NAA的培养基时，参试
品种中，多数品种茎段腋芽萌发无效；而 B2品种却相反，其茎段腋芽萌发效果最佳。在两组配比的植
物生长调节剂交替使用时，对茎段腋芽萌发效果较好，萌发率明显提高。由此可见，NAA对野生毛葡
萄及其杂交种后代茎段腋芽萌发是有影响的，如何准确掌握 NAA用量和使用方法，有待于进一步探讨。
参考文献：
[1] 彭宏祥,等. 桂西岩溶山区野生葡萄资源与繁殖技术[J]. 西南农业学报, 1999,12(4): 101-105.
[2] 邹瑜,等. 野生毛葡萄茎段离体培养和生产应用研究[J]. 广西农业科学, 1998,(4): 196-199.
[3] 曹孜义,等. 实用植物组织培养技术教程[M]. 兰州: 甘肃科学技术出版社, 1999.
[4] 陈祖玉,等. 野生葡萄离体培养[J]. 中外葡萄与葡萄酒, 2000,(2): 22-25.
（上接第 41页）
综上所述，三清山是江西动植物资源的天然贮存库，在旅游开发过程中，为使生物多样性得到保
护，众多种质资源免遭干扰和破坏，为人类生存提供良好的资源与环境空间，应采用法律、行政和经
济等手段寻求最佳保护措施。
参考文献：
[1] 臧敏. 三清山旅游风景区蕨类植物区系研究[J]. 上饶师范专科学校学报, 1996,16(3): 62-66.
[2] 臧敏,等. 赣东北三清山蕨类植物区系[J]. 南昌大学学报(理科版), 1997,21(2): 137-142.
[3] 臧敏. 三清山蕨类植物名录[J]. 上饶师范专科学校学报, 1998,18(3): 62-65.
[4] 臧敏,等. 三清山被子植物区系及重点保护物种[J]. 上饶师范专科学校学报, 2002,20(6): 65-68.
[5] 刘鹏飞. 三清山[M]．杭州: 浙江大学出版社, 1992.
[6] 江西植物志编辑委员会. 江西植物志 (第 1卷) [M]. 南昌: 江西科学技术出版社, 1993.
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