全 文 ：大半边莲中酚酸类成分与抑菌活性研究
袁胜浩1，2， 卞金辉1， 谢 珍2， 黄良永2， 董小萍1*
(1. 成都中医药大学药学院，四川 成都 611137;2. 湖北医药学院附属太和医院，湖北 十堰 442000)
收稿日期:2012-01-17
作者简介:袁胜浩 (1980—) ，男，博士生，讲师，研究方向:中药化学。Tel: (0719)8801103，E-mail:shyuan@ 126． com
* 通信作者:董小萍 (1957—) ，女，博士，研究员，研究方向:中药化学。E-mail:dongxp@ cdutcm． edu． cn
摘要:目的 对秋海棠科植物大半边莲的化学成分进行研究，并初步测定单体化合物的抑菌活性。方法 对大半边莲
干燥块根进行渗漉提取，采用硅胶、MCI和 Rp-8 等柱色谱方法对甲醇提取部位进行分离纯化，并根据理化性质和光
谱数据 (MS，UV，IR，1H-NMR，13C-NMR)鉴定结构。采用比浊法测定单体化合物的最小抑菌浓度 (MIC)。结果 从
大半边莲中分离得到 6 个酚酸类化合物，分别鉴定为水杨酸、间羟基苯甲酸、阿魏酸、绿原酸、没食子酸和原儿茶
酸。其中，水杨酸和原儿茶酸的抑菌谱最广，阿魏酸次之，间羟基苯甲酸最小;原儿茶酸的抑菌活性最强，间羟基苯
甲酸最弱。结论 6 个酚酸类成分均首次从大半边莲中分离得到，本研究对于阐明其物质基础具有一定的指导意义，
为大半边莲的资源开发提供了理论依据。
关键词:大半边莲;酚酸;分离;结构鉴定;抑菌活性
中图分类号:R285. 5 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2013)01-0170-03
大半边莲 (广州空军《常用中草药手册》) ，别名肉半
边莲《广西实用中草药新选》、红半边莲《广西药用植物
名录》、红叶子 (福建)等，系秋海棠科植物粗喙秋海棠
Begonia crassirostris Irmsch 的根茎或全草，主要分布于我国
南部的福建、湖南、广东、广西以及云南等地，生于海拔
300 m左右的林下湿处和岩石上。具有凉血解毒、消肿止
痛之功效［1］。为了探明大半边莲消肿止痛的物质基础，明
确药效物质，以更好地发挥其防病治病的功效，本实验对
大半边莲的次生代谢产物进行系统研究，并初步测定了单
体化合物的抑菌活性。
1 仪器及材料
1. 1 实验设备 VARIN XL—200 核磁共振光谱仪 (TMS
内标) ，ZAB—3F型 EI质谱仪 (THERMO QUEST公司) ，
AZB—HS型 FAB质谱仪 (VG 公司) ，旋转蒸发仪 RE—
52A (上海亚荣生化仪器厂) ，折光仪 (WZS—I842266 上
海阿贝) ，硅胶 G薄层层析板 (青岛海洋化工厂) ，柱色
谱硅胶 G (200 ～ 300 目，青岛高能达化工有限公司) ，96
微孔板，酶标仪，超净工作台，高压灭菌锅，恒温培
养箱。
1. 2 植物材料 大半边莲样品 2010 年 8 月采自广西桂林，
由桂林医学院药学院王晓华博士鉴定为秋海棠科植物粗喙
秋海棠 B． crassirostris Irmsch 的块根。
1. 3 实验菌株 金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、枯草芽孢杆
菌、白色念珠菌、大肠杆菌 (湖北医药学院基础医学院提
供)。
2 方法
2. 1 大半边莲的提取与分离 大半边莲粗粉 15 kg，用甲
醇渗漉提取，回收甲醇，得到甲醇提取物 795 g。将所得的
甲醇提取物加水悬浮，再加入等量乙酸乙酯萃取，静置分
层，在水和乙酸乙酯中间有一乳化层，收集乳化层，浓缩
得到浸膏 381 g。浸膏经硅胶柱层析 CHCl3-MeOH (7 ∶
3)洗脱粗分得到 A、B、C、D、E、F 共 6 段。Fr． C 经
MCI和 Rp-8 柱色谱交替柱层析，均以甲醇-水 (2 ∶ 8 ～ 9 ∶
1)梯度洗脱，分离得到化合物 1 (89 mg)和 2 (42 mg)。
Fr． D经硅胶柱层析 CHCl3-MeOH (75 ∶ 25)洗脱分为 D1
和 D2 两部分，Fr． D1 经 Rp-8 柱色谱，甲醇-水(2 ∶ 8 ～ 9 ∶
1)梯度洗脱，分离得到化合物 3 (20 mg) ;Fr． D2 在甲醇
中结晶，得到化合物 6 (10 mg)。Fr． E 经 Rp-8 柱色谱，甲
醇-水(3 ∶ 7 ～ 9 ∶ 1)梯度洗脱，分离得到化合物 4 (15 mg)。
Fr． F经 MCI 柱色谱，甲醇-水 (4 ∶ 6 ～ 9 ∶ 1)梯度洗脱，
分离得到化合物 5 (38 mg)。
2. 2 化合物最小抑菌浓度 (MIC 值)的测定［2］ 采用液
体培养基连续稀释法培养后检测每个化合物对供试菌株的
最小抑菌浓度 (MIC)。方法为:①配制质量浓度为 2. 00
mg /mL的药液 10 mL，用肉汤液体培养基将各试验药按倍
半稀释法稀释为 1，1 ∶ 2，1 ∶ 4，1 ∶ 8，1 ∶ 16，1 ∶ 32 和
1 ∶ 64，共 7 个浓度。②实验操作在 96 微孔板上进行，每
试验微孔用移液枪加入液体培养基 100 μL，试验菌液加 20
μL，药液 120 μL，混匀后置 37 ℃培养，培养 24 h后观察。
每个实验 3 个重复，并设立不加实验菌的本底对照 (120
μL药液 + 120 μL 液体培养基)和阳性对照 (盐酸小檗
碱)。③采用酶标仪检测微孔板实验菌的生长情况，检测
指标为微孔中培养液体系的光密度 (OD 值) ，检测波长
620 nm。实验微孔的 OD值减去同浓度的本底对照的 OD值
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第 35 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
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Vol． 35 No． 1
即为实验微孔的 OD净值。根据 OD净值判定药物对该实验
菌的 MIC值。
3 结果与分析
3. 1 结构鉴定
化合物 1:C7H6O3，白色无定形粉末，mp 158 ～ 159
℃，易溶于甲醇。EI-MS m/z (%) :139 ［M + H］+，121
(100)。13C-NMR［600MHz，CD3OD］δ:115. 5 (C-1) ，158. 7
(C-2) ，119. 5 (C-3) ，136. 3 (C-4) ，119. 9 (C-5) ，130. 5
(C-6) ，172. 6 (－ COOH) ;1H-NMR ［600MHz，CD3OD］ δ:
6. 95 (1H，d，J = 8. 8 Hz，H-3) ，7. 24 (2H，t，J = 8. 1，
7. 6 Hz，H-4，5) ，7. 30 (1H，d，J = 7. 2 Hz，H-6)。其波
谱数据与文献 ［3-4］报道水杨酸一致，故鉴定化合物 1 为
水杨酸 (salicylic acid)。
化合物 2:C7H6O3，白色无定形粉末，mp 202 ～ 204
℃，易溶于甲醇。ESI-MS m/z (%) :139 ［M + H］+。13 C-
NMR［600MHz，CD3OD］ δ:133. 3 (C-1) ，117. 2 (C-2) ，
158. 7 (C-3) ，120. 9 (C-4) ，130. 4 (C-5) ，121. 0 (C-6) ，
170. 0 (－ COOH) ;1H-NMR ［600MHz，CD3OD］ δ:7. 42
(1H，t，H-2) ，7. 48 (1H，d，J = 7. 7 Hz，H-4) ，7. 25
(1H，t，J = 7. 8 Hz，H-5) ，6. 99 (1H，d，J = 7. 4 Hz，
H-6)。其波谱数据与文献 ［5-6］ 报道间羟基苯甲酸一
致，故鉴定化合物 2 为间羟基苯甲酸 (M-hydroxybenzoic
acid)。
化合物 3:C10 H10 O4，白色无定形粉末，mp 172 ～ 174
℃，易溶于甲醇。EI-MS m/z (%) :195 ［M + H］+，121
(100)。1H-NMR［600MHz，CD3OD］δ:7. 19 (1H，brs，H-2) ，
6. 85 (1H，brd，J = 8. 1 Hz，H-5) ，7. 10 (1H，d，J = 8. 1
Hz，H-6) ，7. 65 (1H，d，J = 15. 2 Hz，H-7) ，6. 39 (1H，d，
J = 15. 2 Hz，H-8) ，3. 90 (3H， s， － OCH3) ;13C-NMR
［600MHz， CD3OD］ δ: 127. 6 (C-1) ，112. 8 (C-2) ，
149. 6 (C-3) ，148. 4 (C-4) ，115. 9 (C-5) ，116. 3 (C-6) ，
146. 5 (C-7)，123. 5 (C-8)，168. 5 (C-9)，57. 0 (－ OCH3)。
其波谱数据与文献 ［7-8］报道阿魏酸一致，故鉴定化合物
3 为阿魏酸 (ferulic acid)。
化合物 4:C16H18 O9，白色无定形粉末，mp 206 ～ 208
℃，易溶于甲醇。ESI-MS m/z:353 ［M-H］－。1H-NMR
［600MHz，CD3OD］δ:1. 98 (2H，m，H-2) ，4. 12 (1H，m，
H-5) ，3. 68 (1H，m，H-4) ，5. 29 (1H，m，H-3) ，2. 03
(4H，m，H-6) ，6. 98 (1H，d，J = 1． 9 Hz，H-2) ，6． 75
(1H，d，J = 8. 0 Hz，H-5) ，6． 92 (1H，dd，J = 8. 0，
1. 9 Hz，H-6) ，7． 50 (1H，d，J = 16. 2 Hz，H-7) ，6． 19
(1H，d，J = 16. 2 Hz，H-8)。13C-NMR［600MHz，CD3OD］
δ:75. 2 (C-1) ，38. 5 (C-2) ，72. 0 (C-3) ，70. 9 (C-4) ，
68. 5 (C-5) ，38. 0 (C-6) ，177. 0 (C-7) ，125. 5 (C-1) ，
116. 1 (C-2) ，147. 2 (C-3) ，148. 3 (C-4) ，115. 4 (C-
5) ，122. 7 (C-6) ，145. 2 (C-7) ，116. 0 (C-8) ，165. 9
(C-9)。其波谱数据与文献 ［7-9］报道绿原酸一致，故鉴
定化合物 4 为绿原酸 (chlorogenic acid)。
化合物 5:C7H6O5，白色晶体，mp 235 ～ 238 ℃，易溶
于甲醇。ESI-MS m/z (%) :171 ［M + H］+。1 H-NMR
［600MHz，CD3OD］ δ:7. 02 (2H，s，H-2，6)。
13 C-NMR
［600MHz，CD3OD］ δ:121. 5 (C-1) ，110. 8 (C-2，6) ，
146. 2 (C-3，5) ，139. 5 (C-4) ，168. 5 (－ COOH)。其波谱
数据与文献 ［10-11］报道没食子酸一致，故鉴定化合物 5
为没食子酸 (gallic acid)。
化合物 6:C7H6O4，白色晶体，mp 198 ～ 200 ℃，易溶
于 甲 醇。ESI-MS m/z (%) :155 ［M + H］+。1H-NMR
［600MHz，CD3OD］δ:7. 53 (1H，s，H-2) ，6. 80 (1H，d，J =
8. 5 Hz，H-5) ，7. 46 (1H，d，J =8. 5，2. 0 Hz，H-6)。13C-NMR
［600MHz，CD3OD］ δ:123. 2 (C-1) ，117. 5 (C-2) ，146. 1
(C-3) ，151. 5 (C-4) ，116. 0 (C-5) ，124. 2 (C-6) ， 169. 8
(－ COOH)。其波谱数据与文献 ［5，12］报道原儿茶酸一
致，故鉴定化合物 6为原儿茶酸 (Protocatechuic acid)。
3. 2 抑菌活性 结果见表 1。
表 1 化合物 1 ～ 6 对 5 种菌株的最低抑菌质量浓度
菌株
水杨酸 /
(mg·mL －1)
间羟基苯甲酸 /
(mg·mL －1)
阿魏酸 /
(mg·mL －1)
绿原酸 /
(mg·mL －1)
没食子酸 /
(mg·mL －1)
原儿茶酸 /
(mg·mL －1)
盐酸小檗碱 /
(mg·mL －1)
金黄色葡萄球菌 0. 50 － 0. 50 1. 00 0. 50 0. 50 0. 25
绿脓杆菌 ＞ 1. 00 － 0. 75 － － 0. 75 0. 50
枯草芽孢杆菌 0. 50 － 1. 00 0. 75 0. 50 0. 50 0. 25
白色念珠菌 ＞ 1. 00 ＞ 1. 00 － 1. 00 － 1. 00 1. 00
大肠杆菌 0. 75 － 0. 50 － 0. 75 0. 50 0. 50
从大半边莲中分离得到的 6 个酚酸类单体化合物对金
黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和
大肠杆菌等 5 种常见敏感菌的抑菌活性 (阳性对照为盐酸
小檗碱)测定结果见表 1，6 个酚酸类单体对 5 种敏感菌均
有一定的抑制作用，但是抗菌谱和抗菌能力有较大的差异。
在抗菌谱方面，水杨酸和原儿茶酸的抑菌谱最广，阿魏酸
次之，间羟基苯甲酸最小;而在抗菌活性方面，原儿茶酸
的抑菌活性最强，间羟基苯甲酸最弱。
4 讨论
本课题首次对大半边莲进行化学成分研究，分离得到
了 6 个酚酸类化合物，体外抗菌实验表明它们均有一定的
体外抑菌活性。大半边莲的化学研究是其资源规模化开发
利用和药理药效等各项研究工作的前提和基础，对化学成
分的系统研究将有助于我们探明其药效物质基础，促进指
纹图谱的建立和质量标准的制定，为进一步开发利用大半
边莲药用植物资源提供科学依据。
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Chinese Traditional Patent Medicine
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醇提蛋黄油对小鼠烫伤愈合作用的机理研究
谢欣梅， 庞晓斌* ， 丛 悦
(河南大学药物研究所，河南 开封 475004)
收稿日期:2012-01-16
基金项目:河南省教育厅自然科学研究项目 (2009B350001)
作者简介:谢欣梅 (1973—) ，女，讲师，硕士，研究方向:药物评价。Tel: (0378)3880680，E-mail:xxm0475@ 163． com
* 通信作者:庞晓斌，副教授，博士，研究方向:药物筛选、微生物药物。Tel: (0378)3880680，E-mail:hndxpxb@ 163． com
摘要:目的 探讨醇提蛋黄油对烫伤小鼠愈合作用的相关机理。方法 建立小鼠背部Ⅱ度烫伤模型，设立模型组、
湿润烧伤膏阳性对照组、醇提蛋黄油实验组，观察造模后 7、14、21 d药物对烫伤创面的愈合效果影响;于实验第
3 天，第 5 天，第 7 天，第 14 天切除创面肉芽组织，测定其中羟脯氨酸 (HOP)量、超氧化物歧化酶 (SOD)活
性、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)活性。结果 醇提蛋黄油明显促进疮面结痂，缩短愈合时间，缩小疤痕面积，
小鼠创面愈合率高于模型组 (P ＜ 0. 01)和阳性对照组 (P ＜ 0. 05) ;与模型组相比，醇提蛋黄油显著提高烫伤肉芽
组织中羟脯氨酸沉积 (P ＜ 0. 01)和 SOD、GSH-Px活性 (P ＜ 0. 01，P ＜ 0. 01)。结论 醇提蛋黄油具有明显促进实
验动物烫伤创面愈合的作用，其主要机理为促进创面成纤维细胞生长，抑制脂质过氧化反应，上调创面抗氧化
能力。
关键词:醇提蛋黄油;烫伤;动物模型;胶原沉积;抗氧化
中图分类号:R285. 5 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2013)01-0172-04
烧烫伤是生活中常见的意外伤害，沸水、滚粥、热油、
热蒸气的烧烫是常会发生的事。对某些烧烫伤，如果处理
不及时，就可能导致并发症，如长期残疾，住院时间延长，
身体四肢的损失甚至死亡。目前临床烧烫伤创面用药已有
多种，以应用京万红、湿润烧伤膏多见，但目前临床已用
的创面用药不同程度地存在着创面感染控制不理想、疼痛
加重、瘢痕增生等副作用。
蛋黄油 (又称蛋黄脂质)是雉科动物家鸡的鲜卵经分
离提取而得到的提取物，含卵磷脂、脂肪酸、铁、锌等多
种药用和营养成分。蛋黄油是传统中药，具有清热解毒消
肿、滋阴养血润燥、敛疮生肌长肉之功效。外用蛋黄油治
病的方法在北周《集验方》、《日华子本草》、《本草纲目》、
《医林纂要》、《本草品汇精要》等历代专著中均有记载［1］。
蛋黄油制备方法有多种，传统方法包括干馏法、烘烤
法，近年来人们致力于溶剂提取、酶提取、超临界 CO2 萃
取等研究。关于蛋黄油的有关研究多见于临床疗效，且所
用制品均为干馏法制品，疗效确切、显著［2］，但其他方法
制品疗效鲜有报道。由于蛋黄油的成分较多，不同的提取
方法对成分的量变化又有一定的影响，所以关于蛋黄油的
药理学研究难度相对较大。
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