全 文 ：戴梦璐，林夏珍，肖纬坤，等． 朝鲜婆婆纳组织培养与快速繁殖［J］． 江苏农业科学，2016，44(8) :86 － 88．
doi:10． 15889 / j． issn． 1002 － 1302． 2016． 08． 023
朝鲜婆婆纳组织培养与快速繁殖
戴梦璐，林夏珍，肖纬坤，彭安琪
(浙江农林大学，浙江临安 311300)
摘要:以朝鲜婆婆纳带腋叶茎为试验材料，建立以腋芽诱导途径为基础的植物组织培养快繁体系。结果表明:朝
鲜婆婆纳腋芽诱导的最适培养基为 MS + 1． 0 mg /L 6 － BA + 0． 3 mg /L NAA + 1． 0 mg /L GA3，接种 30 d后腋芽萌发率
可达 83． 33%;最适增殖培养基为MS + 1． 0 mg /L 6 － BA + 0． 1 mg /L NAA，培养 30 d后增殖系数可达 2． 87，幼苗生长健
壮;最佳生根培养基为 1/2MS +0． 5 mg/L IBA +0． 3 mg/L NAA，培养 30 d后平均生根数达 6． 85条，平均根长 4． 67 cm。
关键词:朝鲜婆婆纳;组织培养;增殖培养;生根培养
中图分类号:S682． 1 + 90． 4 + 3 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2016)08 － 0086 － 03
收稿日期:2015 － 07 － 11
作者简介:戴梦璐(1990—) ，女，浙江嵊州人，硕士研究生，从事植物
园林组织培养技术研究。E － mail:daimenglu@ qq． com。
通信作者:林夏珍，博士，教授，硕士生导师，从事园林植物栽培与管
理研究。E － mail:linxz100@ sohu． com。
我国婆婆纳属共有 69 种(包括亚种、变种)［1 － 3］，朝鲜婆
婆纳(Veronica rotunda)为玄参科婆婆纳属植物，是尚未被开
发应用的一种极具观赏价值的草本。朝鲜婆婆纳为多年生草
本，总状花序多单生，少复出，长穗状，花冠蓝色或蓝紫色，少
白色;花期为 6—8 月，果期为 8—11月;分布于中国的辽宁、山
西、河南(商城)、安徽(岳西)、浙江(临安) ，朝鲜也有分布;生
长在山坡草地［3］。目前，有关朝鲜婆婆纳的栽培繁殖报道较
少，尤其是组织培养繁殖技术尚鲜见报道。本研究可为朝鲜婆
婆纳的工厂化育苗和将来的遗传育种研究提供参考。
1 材料与方法
1． 1 材料
朝鲜婆婆纳植株于 2013 年 6 月在浙江省临安市清凉峰
附近采集。野外采集朝鲜婆婆纳后进行盆栽，选用第 2 年萌
发的朝鲜婆婆纳的优良单株，截取健壮的枝条作为试验材料。
1． 2 方法
1． 2． 1 无菌材料的获得 将带叶腋茎置于适量浓度洗洁精
溶液中浸泡 10 min，取出洗净后用流水冲洗 1． 5 h，并用无菌
水润洗 3 次，再于超净工作台中消毒。消毒方法:先用 75%
乙醇浸泡 15 s，随后用无菌水冲洗 2 次，再用 10%次氯酸钠溶
液浸泡 10 min(其间不断晃动) ，接着用无菌水冲洗 5 次，所
获得的材料即为无菌外植体。将带叶腋茎切成 1． 5 cm 左右
的小段，接种于腋芽诱导培养基中，进行腋芽诱导培养。
1． 2． 2 腋芽诱导 基本培养基选择刘帆等试验中最常用的
MS培养基［4］，选用 6 － BA 3 个浓度水平 (0． 5、1． 0、
2． 0 mg /L)、NAA 3个浓度水平(0． 1、0． 3、0． 5 mg /L)、GA3 2 个
浓度水平(0． 5、1． 0 mg /L)，以及不含任何激素的 MS 培养基，共
设计 9种处理(表 1)，每个处理 3次重复，加对照共 30个样。接
种 10 d后统计污染率与褐化率，30 d后统计腋芽萌发率。
表 1 不同激素配比对朝鲜婆婆纳腋芽诱导的处理设计
处理
植物生长调节剂质量浓度(mg /L)
6 － BA NAA GA3
A1 0． 5 0． 1 0
A2 0． 5 0． 3 0． 5
A3 0． 5 0． 5 1． 0
A4 1． 0 0． 1 0． 5
A5 1． 0 0． 3 1． 0
A6 1． 0 0． 5 0
A7 2． 0 0． 1 1． 0
A8 2． 0 0． 3 0
A9 2． 0 0． 5 0． 5
1． 2． 3 增殖培养 将诱导萌发的腋芽切下，接种于增殖培养
基中进行增殖培养。以 MS 作为基本培养基，选用 6 － BA 3
个浓度水平(0． 5、1． 0、2． 0 mg /L)、NAA 3 个浓度水平(0． 1、
0． 3、0． 5 mg /L) ，共 9 个处理(表 2) ，每个处理 3 次重复，加对
照共 30 个样。接种 30 d后统计增殖系数及生长情况。
表 2 不同激素配比对朝鲜婆婆纳增殖的处理设计
处理
植物生长调节剂质量浓度(mg /L)
6 － BA NAA
B1 0． 5 0． 1
B2 0． 5 0． 3
B3 0． 5 0． 5
B4 1． 0 0． 1
B5 1． 0 0． 3
B6 1． 0 0． 5
B7 2． 0 0． 1
B8 2． 0 0． 3
B9 2． 0 0． 5
1． 2． 4 生根培养 将增殖培养后高约 2． 0 cm 的幼苗切下，
接种于生根培养基中进行生根培养。采用 1 /2MS 培养基为
基本培养基，激素选用 NAA 3 个浓度水平(0． 1、0． 3、
0． 5 mg /L)、IBA 3 个浓度水平(0、0． 3、0． 5 mg /L) ，共 9 个处
理(表 3) ，每个处理 3 次重复，加对照共 30 个样。30 d 后统
计生根数及根长。
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表 3 不同激素配比对朝鲜婆婆纳生根的处理设计
处理
植物生长调节剂质量浓度(mg /L)
NAA IBA
C1 0． 1 0
C2 0． 3 0． 3
C3 0． 5 0． 5
C4 0． 1 0． 3
C5 0． 3 0． 5
C6 0． 5 0
C7 0． 1 0． 5
C8 0． 3 0
C9 0． 5 0． 3
1． 2． 5 移栽驯化 将根系发达、植株比较健壮的瓶苗开盖炼
苗 3 d，洗净植株根部附着的培养基，以多菌灵 800 倍液消毒，
栽种于以下混合配制的基质中: (1)蛭石 ∶ 珍珠岩 ∶ 泥炭 =
1 ∶ 1 ∶ 1;(2)蛭石 ∶ 珍珠岩 ∶ 泥炭 = 2 ∶ 1 ∶ 1; (3)蛭石 ∶ 珍
珠岩 ∶ 泥炭 = 1 ∶ 2 ∶ 1。根据天气情况定期浇水。每个处理 3
次重复，共 30 个样，30 d后统计成活率。
1． 2． 6 培养条件 除特殊说明外，基本培养基为 MS，添加蔗
糖 30 g /L、琼脂 7． 0 g /L，pH值为 5． 8，温度 (25 ± 2)℃，光照
时间 12 h /d，光照度 2 000 ～ 2 500 lx［5］。
1． 2． 7 数据分析 试验中的所有数据采用 Excel 2003 和
SPSS 19． 0 进行方差分析和多重比较［6］。诱导率 =诱导出腋
芽的外植体数 /外植体总数 × 100%;诱导系数 =诱导出的腋
芽数 /外植体总数;增殖系数 =产生的新苗数 /接种苗数;生根
率 =生根苗数 /接种苗数 × 100%;平均根数 =总根数 /接种苗
数;平均根长 =总根长度 /总根数;成活率 =移栽成活苗数 /移
栽苗总数 × 100%。
2 结果与分析
2． 1 不同激素配比对朝鲜婆婆纳腋芽诱导的影响
接种 7 d后，腋芽明显膨大(图 1) ，12 d后部分外植体基
部膨大成黄绿色愈伤组织(图 2)。30 d后统计结果(表 4)显
示，腋芽萌发率最低的培养基为 A8，仅为 25． 56%;4 种培养
基(A2、A3、A4、A5)的腋芽萌发率超过 60%，其中 A5 的腋芽
萌发率最高，达到 83． 33%，且茎段正常生长，叶片鲜绿色。
由表 4 可以看出，带叶腋茎接种到 3 种激素培养基上培
养 30 d后，诱导率差异显著，A5 诱导效果明显高于其他激素
搭配的诱导效果，所以腋芽诱导无菌苗最佳培养基为
1． 0 mg /L 6 － BA +0． 3 mg /L NAA +1． 0 mg /L GA3。
表 4 不同激素配比对朝鲜婆婆纳腋芽诱导的影响
处
理
6 － BA
(mg /L)
NAA
(mg /L)
GA3
(mg /L)
诱导率
(%) 诱导系数
A1 0． 5 0． 1 0 36． 67 ± 5． 09cdDE 0． 87 ± 0． 19abcABC
A2 0． 5 0． 3 0． 5 61． 11 ± 4． 84bBC 1． 18 ± 0． 40abABC
A3 0． 5 0． 5 1． 0 72． 22 ± 8． 01abAB 1． 44 ± 0． 18aA
A4 1． 0 0． 1 0． 5 75． 56 ± 2． 94aAB 1． 22 ± 0． 21abABC
A5 1． 0 0． 3 1． 0 83． 33 ± 1． 92aA 1． 41 ± 0． 14aAB
A6 1． 0 0． 5 0 33． 33 ± 1． 92dDE 0． 57 ± 0． 03cBC
A7 2． 0 0． 1 1． 0 47． 78 ± 4． 44cCD 0． 88 ± 0． 11abcABC
A8 2． 0 0． 3 0 25． 56 ± 2． 94dE 0． 49 ± 0． 08cC
A9 2． 0 0． 5 0． 5 33． 33 ± 1． 92dDE 0． 67 ± 0． 04bcABC
注:同列数据后不同小写、大写字母分别表示在 0． 05、0． 01 水平
上差异显著。下表同。
2． 2 朝鲜婆婆纳的增殖培养
增殖培养过程中，幼苗在叶基部产生腋芽，同时在基部切
口处分化出不定芽，或基部膨大形成愈伤组织，再从愈伤组织
分化不定芽(图 3)。由表 5 看出，9 种培养基对增殖效果影
响显著。综合比较增殖系数和平均株高，1． 0 mg /L 6 － BA +
0． 1 mg /L NAA 为朝鲜婆婆纳最佳增殖培养基，增殖系数为
2． 87，平均株高为 5． 0 cm，且幼苗生长健壮。
2． 3 朝鲜婆婆纳的生根培养
将朝鲜婆婆纳无菌苗接种到生根培养基后，培养 7 d，幼
苗逐渐从基部生出不定根，且切口膨大，慢慢形成凸起(图
4)。培养 30 d后统计生根率、平均根数和平均根长。结果表
明，不同生长素 NAA和 IBA浓度组合对朝鲜婆婆纳根的形成
有较大的影响(表 6)。
0． 3 mg /L NAA +0． 5 mg /L IBA的组合生根率最高，达到
96． 67%(表 6)。综合考虑生根率、平均根数和平均根长，最
佳生根培养基为 0． 3 mg /L NAA +0． 5 mg /L IBA。
—78—江苏农业科学 2016 年第 44 卷第 8 期
表 5 不同激素配比对朝鲜婆婆纳增殖的影响
处理 6 － BA NAA 增殖系数 株高(cm) 苗生长情况
B1 0． 5 0． 1 1． 31 ± 0． 03bcB 3． 33 ± 0． 32bcA 芽细弱
B2 0． 5 0． 3 0． 98 ± 0． 07cB 2． 97 ± 0． 38cA 母株差，新芽弱小
B3 0． 5 0． 5 1． 64 ± 0． 31bB 4． 43 ± 0． 50abA 芽较均匀，但多数细弱
B4 1． 0 0． 1 2． 87 ± 0． 10aA 5． 00 ± 0． 82aA 植株均匀、粗壮，可用于生根
B5 1． 0 0． 3 1． 68 ± 0． 28bB 4． 57 ± 0． 38abA 芽较均匀，粗壮度中上
B6 1． 0 0． 5 1． 44 ± 0． 12bcB 4． 90 ± 0． 38aA 芽较均匀，但多数细弱
B7 2． 0 0． 1 1． 48 ± 0． 20bcB 3． 13 ± 0． 27bcA 芽较均匀，但多数细弱
B8 2． 0 0． 3 1． 34 ± 0． 14bcB 4． 20 ± 0． 26abcA 芽细弱
B9 2． 0 0． 5 1． 12 ± 0． 18bcB 3． 57 ± 0． 38abcA 芽细弱
2． 4 朝鲜婆婆纳的移栽驯化
由表 7 可以看出，30 d 后朝鲜婆婆纳在蛭石 ∶ 珍珠
岩 ∶ 泥炭 = 1 ∶ 1 ∶ 1 的基质中成活率最高，为 96． 67%，因此
选择朝鲜婆婆纳在蛭石 ∶ 珍珠岩 ∶ 泥炭 = 1 ∶ 1 ∶ 1 基质中移
栽驯化。
3 讨论
本研究采用朝鲜婆婆纳的带叶腋茎作为外植体进行组织
培养研究。在腋芽诱导中，细胞分裂素与生长素的组合有利于
腋芽的生成。其中腋芽诱导无菌苗最佳培养基为 1． 0 mg /L
6 － BA +0． 3 mg /L NAA +1． 0 mg /L GA3。朝鲜婆婆纳在增殖
过程中，细胞分裂素与生长素的组合虽然能提高无菌苗的数
量，但是增殖系数并不十分理想，本研究中的最佳增殖培养基
增殖系数也仅为 2． 87，因此增殖培养基还有待进一步研究。
在移栽驯化过程中基质配比为蛭石 ∶ 珍珠岩 ∶ 泥炭 =
1 ∶ 1 ∶ 1，透气透水性最好，最利于朝鲜婆婆纳的生长，而泥炭
基质透气性差，水分不易流失导致根部腐烂，植株死亡。因
此，在组织培养试验中合适的培养基质和培养条件对植物的
生长起到重要作用［7 － 9］。
表 6 不同激素配比对朝鲜婆婆纳生根的影响
处理 NAA(mg /L) IBA(mg /L) 生根率(%) 平均根数(条) 平均根长(cm)
C1 0． 1 0 83． 33 ± 6． 94abAB 4． 92 ± 0． 41bB 2． 63 ± 0． 32bcBC
C2 0． 3 0． 3 77． 78 ± 2． 94bAB 4． 60 ± 0． 17bB 1． 70 ± 0． 12cdeCDE
C3 0． 5 0． 5 77． 78 ± 5． 88bAB 4． 60 ± 0． 35 bB 1． 03 ± 0． 12deDE
C4 0． 1 0． 3 74． 44 ± 4． 01bcAB 4． 40 ± 0． 24bcB 2． 33 ± 0． 43bcBCD
C5 0． 3 0． 5 96． 67 ± 1． 92aA 6． 85 ± 0． 14aA 4． 67 ± 0． 23aA
C6 0． 5 0 83． 33 ± 6． 94abAB 4． 92 ± 0． 41bB 3． 20 ± 0． 35bB
C7 0． 1 0． 5 61． 11 ± 2． 94cB 3． 61 ± 0． 17cB 0． 93 ± 0． 20e
C8 0． 3 0 71． 11 ± 2． 94bcB 4． 20 ± 0． 17bcB 1． 93 ± 0． 09cdBCDE
C9 0． 5 0． 3 77． 78 ± 6． 76bAB 4． 60 ± 0． 40bB 2． 60 ± 0． 53bcBC
表 7 朝鲜婆婆纳移栽驯化
处理 成活率(%)
蛭石 ∶ 珍珠岩 ∶ 泥炭 = 1 ∶ 1 ∶ 1 96． 67 ± 1． 93aA
蛭石 ∶ 珍珠岩 ∶ 泥炭 = 2 ∶ 1 ∶ 1 74． 44 ± 4． 84bA
蛭石 ∶ 珍珠岩 ∶ 泥炭 = 1 ∶ 2 ∶ 1 76． 67 ± 5． 77bA
本研究为朝鲜婆婆纳无性繁殖提供了一种高效的方法，
利用人工栽培有助于扩大朝鲜婆婆纳的数量，这种技术培养
的组培苗可用于野生资源的保护。
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