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连续稀释法研究淡红忍冬体外抑菌作用



全 文 :连续稀释法研究淡红忍冬体外抑菌作用 中医中药
蔡宏亚 1 王泽平 2 何宁先 2 苟占平 1
(1广东医学院 广东 东莞 523808;2甘肃医药集团公司临夏分公司 甘肃 临夏 731100)
【摘要】 目的 探讨淡红忍冬的体外抑菌作用。方法 采用连续稀释法测定不同浓度淡红忍冬水煎
剂对金黄色葡萄球菌 、溶血性链球菌 、肺炎球菌 、卡他球菌 、表皮葡萄球菌 、大肠杆菌 、福氏志贺菌 、鼠伤
寒沙门菌的抑制作用 。结果 淡红忍冬水煎剂对除溶血性链球菌和肺炎球菌外的其他 6种致病菌的
抑制作用都较强 。结论 淡红忍冬在体外对多种致病菌有明显的抑制作用 。
【关键词】 淡红忍冬 体外抑菌
Invitrogrowthinhibitioneffectsofflosloniceraehypoglaucaeonbacteriawithserialdilutionmethod.CAIHong-ya1 , HENing-xian2 ,
WANGZe-ping2 , etal.1GuangdongmedicalColege, DongguanGuangdong, 523808China;2LinxiaBranchofGansuMedicineGroup, Linxia
Gansu, 731100China.
【Abstract】 Objective ToinvestigatetheantibacterialactivityofFlosLoniceraeHypoglaucae.Methods Serialdilutionmethodwasused.Re-
sults FlosLoniceraeHypoglaucaehadsignificantantibacterialactivityforseveralpathogenicbacteria.Conclusion Theseresultsmayprovide
scientificreferencefortheclinicaluseofFlosLoniceraeHypoglaucae.
【Keywords】 FlosLoniceraeHypoglaucae;Antibacterialactivity
  作者在进行川渝金银花商品调研时在成都荷花池中药材市
场发现有一种药材 , 药商称之 “米子银花” ,其性状明显不同于正
品金银花 LonicerajaponicaThunb。经产地追踪 、标本查阅 、原植
物鉴定 , 确定其来源于忍冬科忍冬属淡红忍冬 L.acuminata
Wal.的干燥成熟花蕾。为了客观评价其品质 , 我们测定了其主
要有效成分绿原酸的含量 [ 1] , 本文报道其体外抑菌作用 , 结果为
其临床用药和深入研究提供科学的参考。
1 实验材料
1.1 药物 实验材料购自四川沐川 , 经作者鉴定为淡红忍冬
LoniceraacuminataWal.的干燥成熟花蕾。
1.2 菌种 金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、溶血性链
球菌(Staphylococcushaemolyticus)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、
福氏志贺菌(Shigelaflexneri)、鼠伤寒沙门菌(Salmonelatyphi-
murium)、肺炎球菌(pneumonococcus)由四川卫生干部学院微生
物教研室提供;卡他球菌(Branhamelacatarrhlis)、表皮葡萄球菌
(Staphylococcusepidermidis)由成都中医药大学微生物教研室提
供。
1.3 试剂 琼脂粉和蛋白胨(购自广州海洋生物有限公司)、牛
肉浸出粉(购自灵武市泰运生化制品有限公司)、脱纤维兔血(自
制)、分析纯氯化钠等。
2 实验方法
2.1 培养基的制备
2.1.1 营养肉汤培养基 [ 2]  取蛋白胨 、牛肉浸出粉 、氯化钠 、蒸
馏水 , 按《中国药典》规定比例混合 ,微温溶解后 , 调节 pH为弱碱
性 , 煮沸 ,滤清 , 调节 pH值使灭菌后为 7.2±0.2, 在 115℃灭菌
30 min。
2.1.2 营养琼脂培养基 [ 2]  照上述营养肉汤培养基的处方及
制法 , 按《中国药典》规定比例加入适量琼脂 , 调节 pH值使灭菌
后为 7.2±0.2,在 115℃灭菌 30 min。
2.1.3 血琼脂培养基 [ 3]  将营养琼脂培养基加热溶化 , 待冷至
50℃左右 , 以无菌操作加入 10%无菌脱纤维兔血 , 摇匀 , 置冰箱
备用。
2.2 菌液的制备 于实验前将上述保存菌种于相应的琼脂平板
上划线 ,于 37℃培养箱内培养 48 h, 取出 , 用白金环挑起典型菌
落接种营养肉汤管中 ,为了溶血性链球菌 、肺炎球菌的生长 ,后二
者需要在血琼脂培养基中培养 ,经过 37℃下培养 24 h, 将菌液稀
释成 1×107 cfu/ml,供实验备用。
2.3 供试液的制备 称取米子银花药材 5 g, 加蒸馏水适量 ,煎
煮 3次 , 第一次 40 min,后两次各 30 min, 合并水煎液 , 浓缩至 6
ml, 定容于消过毒的 10 ml容量瓶中 , 得 500 mg/ml的供试液 ,冰
箱中保存备用。
2.4 抑菌试验 将营养琼脂培养基和血琼脂培养基加热融化 ,
加入相应药液 ,混匀 , 倾注无菌培养皿内 , 做成含不同浓度药物
(1/5、1/10、1/20、1/40、1/80、1/160、 1/320、 1/640)营养琼脂平板
和血琼脂平板 ,用接种环取上述菌液 , 将溶血性链球菌 、肺炎球菌
接种于血琼脂平板 ,将其他菌种接种于营养琼脂平板 , 放置 37℃
培养箱内培养 18 ~ 24h,观察结果(见表 1)。
表 1 抑菌试验结果
药物浓度
(mg/mL)
金黄色
葡萄球菌
溶血性
链球菌
肺炎
球菌
卡他
球菌
表皮葡
萄球菌
大肠
杆菌
福氏
志贺菌
鼠伤寒
沙门菌
100 - + + - - - - -
50 - + + - - - - -
25 - + + - - - - -
12.5 - + + - - - - -
6.25 - + + - - - - -
3.125 - + + - - - - -
1.562 - + + - - + - +
0.781 + + + + + + + +
  注:“ +”表示长菌;“ -”表示未长菌。
3 小结
淡红忍冬水煎剂对除溶血性链球菌和肺炎球菌外的其他 6
种致病菌的抑制作用都较强 , 其中对病原性球菌金黄色葡萄球
菌 、卡他球菌和表皮葡萄球菌及肠道杆菌福氏志贺菌的最低抑菌
质量浓度(MIC)只有 1.562 mg/ml,对肠道杆菌大肠杆菌和鼠伤
154 JournalofClinicalandExperimentalMedicineVol.6, No.9 Sep.2007
脉络宁并用骨痹汤加味治疗骨质增生疗效分析 中医中药
马世明(青海省藏医院 青海 西宁 810007)
【摘要】 目的 探讨中药脉络宁注射液并用骨痹汤加味治疗骨质增生病的疗效。方法  对 2004 ~ 2006年骨质增生
患者进行静脉点滴脉络宁注射液 ,同时内服骨痹汤加味汤剂。结果  治愈 35例 , 好转 86例 , 无效 7例。总有效率为
94.4%。结论 经清热养阴 ,活血化瘀 ,温经通络 , 使骨质增生得意缓解 ,甚至可以达到治愈的目的 ,可以在临床上广泛
应用。
【关键词】 骨质增生 脉络宁 骨痹汤加味
  颈椎病是指颈椎间盘退行性改变及其继发性椎间关节退行
性变所致邻近组织(脊髓 ,神经根 , 椎动脉 , 交感神经)受累而引
起的一组复杂的症候群 , 故又称颈椎综合征。临床上常表现为
颈 , 肩臂 ,肩胛上背及胸前区疼痛不适 , 手麻木 ,肌肉萎缩 ,下肢软
弱无力 , 甚至瘫痪;有人表现为头运 , 眩晕 , 猝倒。 有人表现为窦
性心动过缓等。该病多见于 40岁以上的中老年人。为了便于诊
断 , 临床上分为神经根型 ,交感神经型 , 椎动脉型 , 脊髓型 ,混合型
等。本病属祖国医学 “痹证”, “痿证”, “眩晕”等病的范畴。
1 临床资料
128例骨质增生病例均来自我院 2004 ~ 2006年的门诊病
人。其中男性 98例 ,女性 30例。年龄 42 ~ 78岁 ,平均年龄为 60
岁。病程 0.5 ~ 10.0年不等。
2 临床表现
颈椎增生 75例 ,以头痛头晕 , 颈肩背疼痛 ,上肢麻木 , 胸闷气
短为主要症状。 X线片有相应改变 ,心电图(ECG)显示窦性心动
过缓。胸腰椎增生 48例 ,以腰腹部以及骶髂关节处疼痛 、麻木 ,
可放射至大腿内外侧 , 以至沿坐骨神经疼痛 、麻木。 X线片 、CT
片均有阳性改变。跟骨骨刺 5例 ,以足踝部及跟部疼痛为主 , 不
能用力或行走。
3  治疗方法
用 5%葡萄糖氯化钠溶液 250 ml+脉络宁 20ml每日一次静
脉滴注。骨痹汤加味 , 每剂每天用温水浸泡 20min, 文火煎熬 20
~ 30分钟 , 熬两次 ,将两次药汁和匀后分两次早晚饮服。一般 14
d为一疗程 , 休息 3 ~ 5 d再行第二个疗程。脉络宁注射液(牛
膝 、玄参 、石斛 、金银花)。骨痹汤 [ 1] (桂枝 12g、白芍 30 ~ 50g、生
甘草 10g、木瓜 10 g、威灵仙 15 ~ 30 g)。随证加味:颈椎增生加
葛根 12 ~ 20g、姜黄 10g、川芎 12g。气虚加生黄芪 15 ~ 20g。疼
痛剧烈者加桃仁红花各 10g、路路通 15 ~ 30 g。痰瘀交阻者加半
夏 10g、苍术 10g、胆南星 10 g。 腰椎增生加川续断 30 g、桑寄生
30 g。足跟骨骨刺加牛膝 15 g、淫羊藿 10 g。根据不同类型病证
可备用:桂枝 +白芍木瓜葛根汤 、血腑逐瘀汤 、独活寄生汤加味 、
杞菊地黄汤加味等 [ 2] 。
4 结果
疗效评定依据如下。 痊愈:临床症状完全消失 , X线片及
ECG改变完全恢复。 好转:临床症状全部或部分消失 , X线片及
ECG改变有不同程度的改善。无效:临床症状未改善 、X线片以
及 ECG复查毫无变化。经过治疗 , 结果如下:痊愈 35例 , 占 27.
3%;好转 86例 ,占 67.1%;无效 7例 , 占 5.4%。
5 讨论
现代医学把骨关节病称为退行性骨关节病 , 即骨质退性变 、
骨质疏松 、骨质增生 、肥大性骨关节炎等病。是由于构成关节的
软骨 、椎间盘 、韧带等软组织变形 、退化 , 关节边缘形成骨刺 ,滑膜
肥厚等变化 ,而出现骨破坏 , 引起继发性的骨质增生 ,导致关节变
形 。属于中医 “骨痹”、“骨痛”、“寒凝” 、“痰阻”等的范畴 [ 3] 。其
主要病因为中老年以后出现肝肾亏虚 ,气血不足 , 致筋骨失养 ,形
体被极而发此病。其次为外邪侵袭 , 致经络 、筋骨 、关节痹阻不
通 ,造成关节周围肿胀 、疼痛。肥胖人关节疼痛则多为风湿与痰
饮流注经络 , 局部气血凝滞 , 脉络受阻 , 不通则痛 , 久痛入络 、入
骨 ,骨失濡养 , 日久则骨痿渐生 ,且与风 、寒 、湿痰并存。再者为劳
损过度 、过久 , 致气血不和 , 经络受阻 ,筋骨失养更甚 , 伤及筋骨 ,
累及肝肾 ,使病变加重。本病可概括为正虚邪实两方面 , 正虚为
发病的内在因素 ,邪实为发病的病机。治疗原则为扶正祛邪。方
法为清热养阴 、活血化瘀 、温筋通络 、补益肝肾等。故上述二方药
在治疗骨质增生方面取得了满意的效果。
参考文献
[ 1]  关幼波 ,张丰强 ,郑英 , 主编.首批国家级名老中医效验秘方精选
[ M] .北京:国际文化出版司 , 1996:215.
[ 2]  侯宗德 ,郇宜俊,金维良 ,主编.中西医结合方法与疑难病治疗 [ M] .
北京:人民卫生出版社 , 2002:369-371.
[ 3]  董福慧 ,张蒂男 ,程伟 ,等.实用.中医老年病学 [ M] .北京:人民卫
生出版社 , 2000:937.
(收稿日期:2007-07-12)  
寒沙门菌的 MIC为 3.125 mg/ml。淡红忍冬水煎剂浓度为 100
mg/ml时对溶血性链球菌和肺炎球菌无抑制作用。
参考文献
[ 1]  苟占平 ,万德光.HPLC法测定 5种 1变种金银花中绿原酸含量
[ J].中国中医药信息杂志 , 2004, 11(5):421-423.
[ 2]  国家药典委员会.中国药典.I部 [ S].北京:化学工业出版社 ,
2005:附录 83-84.
[ 3]  王彩玉.常用细菌培养基制备及注意事项 [ J] .卫生职业教育 ,
2004, 23(12):102.
(收稿日期:2007-04-16)  
155临床和实验医学杂志 2007年 9月 第 6卷 第 9期