全 文 ：第 39 卷 第 5期
2 0 03 年 9 月
南京大学学报( 自然科学 )
JO U R N A L O F N A N JIN G U N I V E R S I T Y
( N A T U R A L S C IE N C E S )
V b l
.
39
S ePt
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N o
.
5
2 00 3
F er e R ad i
c a l R e s P o n s e s i n E m b yr o n i c C a l l i o f
即。 r t i n a 那 et n s u n d e r N 十 B e am I r r a d i a t i o n ’
hZ ou 以 “ 刀 g ~凡gn , iQ n eP 广 , 爪 e 从 n
( Isnt i
t ut e of iB ot ec hn
o l呢 y , N anj i馆 U n ivesr iyt
,
N anj i眼 , 2 10 9 3 , Ch ian )
A加 t阳 c t : oT ex p lo r e ht e f r e adr ical r es p o l笼艾 s of o rg a l l i~ un der ion
s b
~
iar id iat on
,
N 十 b
aeln俪 t h en e r g y o f 20 kVe 田 l d d咙 e f or n l 2 . 6 x l o , s iosn 友 rn 子ot 15
.
6 x 10` s io sn c/ n 12 wer
e ir a d ia t司 in ot
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乃刃 xl ie cal il of 吕加 irt an 加如: . W h en ht e d ose aw s lo w , t he con ent t of 刻ub le p r o t e in a n d
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s ta b le f r e r a d i以 , a n d ~ el ec t句 lyt i
c
su 比 t一 ( N ES ) ifl t er ed ou t of t he cal il iun ckl y . W it hi n t he im d le d激 r an g e , m al on d i习d e h y d e
( M旧A ) be g a n ot
~
la t e
.
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e八加叼d ase ( PO D ) ~
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en 幻 v al of f r e r a d ical in t u n e , 沁 lu ble P r o t ie n c o n t e n t s us ta in ed at a low er l ve el an d
N ES
exm
s r a t e id d n o t icn
r e a s e
. 黝即 ivi gn art e of t h e ca lli h a d a sl ihgt esr t o r a t ion i sn t ea d of
d ec r
eas
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~
.
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e d既 ear hc ed ve 即 hi hg er , 3 O D 出 ld P O D ~ ihn ib t ed an d c d l
m印 l b r~ h 当川
l e
~
e p e mr ea bl
e , 州 ht ht e d ce
~
of fer ar id cal
,
MD A
,
~
5 ar et of N E S
a n d 印 lu ble p or t e in . uS vir vi gn r’a et of ht e 以h d or P户妇 ot ht e lo w es t le v e l . W ll en m ~ iolt ~ ad d司
in ot t h e cu lt
u r a l m de ia
, t
he dan
飞a g e of N 十 庆a n l i娜 d ia t ion ot t h e ca l i aws elr ae 泌」
.
In g e l l e ar l
, th e
ac
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un l u la it on of f
r e r a d ical ~ an
in
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po r t an
t af ct or t h
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en ign ht e ~
ival of 5
. 加ent s cal il un d er
N 十 i r a d ia t ion
.
sA
t h e an t iox id an t 哪 tem in e lu d i眼 S O D a ll d P O D aws ac t iva t de in t im e , 田 ld fr e
ar d ica l aws vemor
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d哪犷e , t h e d am
a g e ca u溅 1 b y fr e r a d i司 d id ont fo llo w t h e lin ear
泪a t io sn h iP 诚 t h ion s d既 .
K盯 w阴如 : ern b r扣 Il ic 司 il , fr e ar id 司 , N + 比朋 l iar id iat on , S加雌 i na 和ent :
N + 离子束注入对狐米草胚性愈伤组织
自由基代谢的影响
周长芳 , 钦 佩 , 谢 民
(南京大学生物技术研究所 , 南京 , 2 100 93)
摘 要 : 以能量为 20 k e V ,剂量为 2 . 6 x 10 15 一 15 . 6 x l口5 10 2巧 /山12 的 N + 注入狐米草胚性愈伤组织 . 低
剂量时 ,组织内长效自由基含量随剂量明显上升 ,非电解质外渗加快 ,可溶性蛋白含量与组织存活率均明
,
oF
u n da t ion it二 : N at io t司 Na t u r日豁ecn e (F 皿 m d a t ion (39 90 0 30 )
R ec e i v ed d a t e : 2 0 0 2 一 0 8 一 3 0
。 肠~ 卯 n d ign au tho r , E
一
nar il
: iq n画@ nj u .记 u . cn
第 5期 Z ho uC h出 l gFa fl g, et a l : F r e R ad i回 R es p o n 女绍 un der N + rar d ia t io n · 5 2 3 ·
显降低 . 随着剂量的升高 , M D A 开始积累 , 以 ) D 、 P O D 活性被迅速激活 , 自由基得到及时清除 ,非电解质外
渗率与可溶性蛋白含量维持在较低水平 ,组织存活率在下降过程中有小幅回升 . 较高实验剂量下 ,保护酶
活性被抑制 ,细胞膜透性进一步加大 , 自由基 、 M D[ A 测定值下降 ,可溶性蛋白含量与组织存活率降低至最
低值 .外加甘露醇培养 ,发现组织内自由基降低后 ,各生理指标与存活率均有所好转 . 实验证明 : N 十 注人过
程中 , 自由基积累是影响狐米草组织存活率的重要因素 , 岌) D 、 P O D 等抗氧化系统的应激性表达在一定程
度上能缓解离子注人对组织的损伤 .
关键词 : 胚性愈伤组织 , 自由基 , N 十离子辐射 , 狐米草
中图分类号 : Q 945
助w e r e n e r g y h e va y io n s ( LE H I ) ir a d i at ion , a n e w 即 poacr h in r a d ia t i o n b io l吧y
,
w a s
fo u n d t o h va e t h e
com
p l e x b io 一馆 i e习 e f fe e t s on N 十 bearn i r
a d iat 司 r i e e b y Y u [ 1 ] . H ea v y ion s ,
l ik
。
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r a y
,
7
一
ar y
, u lt var i
o l e t an d
o t h e : r a d i a t ion
s [2
, 3 J
,
m a y p耐 u ce man y b i o log ica l e f f e c t s ,
s u e h as D N A
s t
arn d b
r e a k s
, e h
omr ~
e a b e r a t io n s
,
m e m b r an
e lip id 详oxr id a t ion
,
se e d
罗mr i n a t i飞 p联 e s n l od if ica t io n , p lan t g or 帆h an d d e ve l叩me n t i n h ib i t ion an d p lan t
m u at t ion [ 4
一 6 ] . w it h h ig h l i n ear
t ar sn fer r i n g e n
ear
,
m as an d 山理 e [ 7 ] , h e卿 ion s h va e
u n iq u e e h ar
e t e r s o n foc u s i飞 on 印 e e i a l e e ll s , t i s u es an d b r in g i n g a加 u t som
e b io l笔i e al
ef
e e t s
.
H ea
v y io n s w i t h M eV
e n e塔y hva e be e n 州 d e ly a t tem p t e d i n t h er a p又 of t u mor an do t h e r d i se as es for se v e r a l y~ [ 8 ]
,
b u t 50 far t h e 卯 t e n t ial v a lu e of 比H l h as 悦 e n l i t t le kown n
.
In hC i
n a , L E H I h a s b e e n t r ie d i n r ice
,
m a i z e
, 印 t a ot , 阳 y be a n , t o b a e e o , v i tam in C p r浏 u e i n g
b a e t e r i u m an d
o t h e r b iom
a t e r i a l s ot p耐 u e e co n s id e r a b一e eco n om i e 阮 n ef i t s「1」.
H佑w e v e r , t h e wo r k in g m e e han is m of L EH l r a d ia t io n et e h n iq u e 15 s t i l l on t ve 仃 e lea r
.
I t s
com
p le x par m
e t e sr ca n on t b
e
com
p le t e ly co n t or l l e d t o t h e h o l沁 f u l l e v e l b y on w . M o r eo v e r ,
t h e t e e h n i q u e h as b en
r e s t ir e t ed i n d职 s e e d s an d a f e w ha e t e r i a . rF e e ar d i e a l lP a y s an
im卯 rt an t or l e in r a d i a t io n b i o l o g y . I t m a y d aJ书 a g e b io m o lec u l e s , es p e e i a l ly g e n e t i e
com 因
n e n t s
,
w h ie h 15 on
e o f t h e arn i
n r ea 阳 n s l e a d in g t o fa t al dam眼 e o r i n d u e i n g m u t a t io n of
o塔 a n ism s [ 9 ]
.
I t m a y a l阳 des t or y m em b r a n e s t ur e t u r e b y l ip id p e oxr id a t ion
,
an d d i
s t u 比
b io l吧i e a l an d b ioc h e m ie沮 r ea e t ion s [9」. F r e e r a d i e a l r e s p o n s e i n o r g an isrn u n d e r u l t r va io一e t o r扮盯〔10 ] h as b e n d e t e e t e d an d a n a ly z e d , b u t t h e co 耐 i t io n of f r e ar ica z d u r i飞 L E H I
r a d ia t i o n P r o C e s s r e n l a i n s u n e e血 i n .
吕加 rt i an 加 t e n s 15 a sa l t ot l e ar n t 印 e e i e s gowr i n g w id e ly in N o r t h A刀 l e r i e a
.
I t wa
s
i n t z.o d u ce d t o hC i
n a i n 1 9 8 0 5
,
an d w as
e x p e e t e d t o b e a p r浏 u e t iv e for 昭 e g r as a n d b e n e f i t t h e
caos
t a l d is t r ie t s i n t h e e ou
n t r y
.
oT
s e l e ct t h e g (以1 g e mr P lasm of 5
. 加 et n s , w e u s e L E H I t o
i n d u e e t h e v ar ia t ion of
e m b
r y on i
e e a l li
, a n d ex p e e t ot m a k e ou t w h
e t h e r f r e e r a d ica l co n t r ibu t
e s
t o t h e b iol og ica l
e f ec t
s o f io n s b e a n n
.
1 M
a t e r i a l s a n d m e t h o d s
1
.
1 C a l l i 如 d N + b e别rn i姗d i a t ion P r e Par t i on Em b r y o n i e ca l li of 5 . 加 et n s w e r e i n d u e e d
a n d e ul t ivat
e d b y t h e me
t同 o f L i e t a一[ 1 1 ] , an we r e d i v id司 i n ot n i n e 脚 u p s . 腼osn t h e m
N o
.
7 an d N
o
、
8 g or u p s w er
g
owrn
in s p e e ial B N D m ed i a w i t h 0
.
33 mo l几 m an n it o l fo r 4 8 h
5 4 2南京大学学报( 自然科学 ) 第 9 3卷
悦拓r eir a d ia tion . 仆 er he f sgrn eca l l i w i th sim i lar siz e sw r e e e sl e e td e( 50 2b loc k si n ac eh
gm uP) an d o sak
ed i n Z % str ei l e D M犯 ol su tion un d er 5 2℃ or f35 一 40 m i n , fo ll o w ed b y
b low
i眼 i n u l t-ar e lea n i眼 omr for
1 5 m i
n
ot
vemor
e
mo i st
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a t t h e s u fr a e e of t h e b i
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e n 2 0 k eV N
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d u e t ed ot t h e ca ll i 妙 L EH I adr i a t io n M a hc i n e lor m t h e hC i n es
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I t s d o s e
was co
u n t e d a s a e e u m u l a t i吧 d a t a ( fomr 1 00 ot 600 ) m
u l t i lP ied b y
2
.
6 火 10 , 3 ion s / cr nZ ( T ab l e l )
. 肠 p r ve e n t i o n s ’ e n e卿 fomr o o l l v e r t i吧 i n ot h ae t hw en i t
r ae hc
e d t理et s , w e u s ed i哪 u lse s ho t i飞 . OC n t olr g or u p (N o . 0 ) was al o ex 卿 e d i n D M劝
an d
v
acu um
,
b u t r ec ie
v ed on ion
s
. 月 1 t h e
b e f o r e e a e h of ht e fol low ign
t
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1
.
2 T es t of f er e ar d i e a l rF e ar id司 in
t h e ca l l i of ea e h g r o u p w as d e t e c t ed w i t h
E lec t~ P ar
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a g n e it c R eso
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( E R2 00
一
D S R C 10 / 1 2
,
the eG~B r u k e r 肠m p a n y ) , w iht tem ep r at u r e
( 2 5 士 2 ) ℃ , m ic
vowaer
f r阂 u e n e y 9 . 7 7
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al l i w
e r e P u t b a ck t
o t h
e ir o r i g i n al me d i
a
for 20 h
G H乞, m i e
owar
ve P o w e r 2 0 m V
,
n l od
u la t or f r叫 u en e y 10 0 k H z a n d g a in
1 x 1 0 5
.
w
e 雌ar ded t h e co n t or l ’ s
con
t e n t o f f r e e r a d ica l P er f r es h we i g h
t as
10 0
,
an d wo
r k ed o u t the er lat i
v e
con
t e n t s
i n i
osn
iar d i
a t ed g or u P s
.
1
.
3 1七 st of an t iox i d an t e nZ 扣rn e ac t i喊 t ies
T a b le I N 十 山班思 of ion be 邵 .
N o cA cum
』a t ion da at l沁沁 / ( 只 1 01 5 10仪州cr nZ )
0
1 10 0士 6 2 . 6土 0 . 156
2 20 0士 2 5 . 2士 0 . 0 52
3 30() 土 0 7 . 8士 0 . 0 0()
4 4 00 士 1 10 . 4 士0 . 0 26
5 5 00 士2 13 . 0 士0 . 0 52
6 6 00士 0 15 . 6 士0 . 0 00
7 4 00 士0 10 . 4 土0 . 0 00
8 60 0土 1 15 . 6土 0 . 0 26
A ft
e r t h e cal l iwer
h o m og
e n at ed u n der i e e b at h
,
r o u g h e n z y m es w e er ex tacr
t ed i n 0
.
1 mo lL/ p h
o s pho
r ic a e id b
u
fe
r
( pH 7
.
8 ) b y ce
n tr ifu g
a t i n g
(10 0 00 9 X 10 m访 , 4 ℃ ) . S u p e or x id e d ism u t ase ( S OD ) a e t iv i t y was meas
u r e d b y se lf
ox id
a t io n o f p y cr 准a l l ic ac id , w i t h t h e ear
e t ion
s y s tem of 50 morn
lL/ rT i-s H C I b
u ffer ( PH 8
.
2 )
p l
u s 0
.
1
orn
l几 p y 双嗯 a ll i e ac id an d poer : vo l u m e of enz 帅e e x atr e otr [1 2 1
.
w
e d ief
n司 t h e
e n z ” 叽 e ac t i vi t y as on e u n i t , by w h i e h S OD j u s t i n h ib i t s 50 % of t h e se l-f o x id a t i o n ar t e ( U )
.
P e or x id a se ( P O D )
a e t iv i t y
was
d e t emr i
n e d b y o m
e t h o x邓h e OnI ox id a t ion , w i t h t h e ear e t io n
vs
t e m of 50 m L 0
.
1 mo lL/ p h
o s p ho
r i e a e id b u f e r ( pH 6
.
0 ) p l
u s 2 8 拜L o met
l l o x即h e n o l an d
1 9 产L 30 % ZH QZ [’ 2 ]
.
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欲ase ( C A I
,
) was
t
est 记 b y U V ~ s详 e t哪h o t o m e t e r w it h t h 。 r ea e t ion
s y s t
em of 10 rno
lL/ 玩q sol u t ion an d p ro p e r vol u me of e n z yme e x tra e tor . 场 t h i s 珑q
con ce nt ra
t ion
,
1邢 ~ a b so 甲 t ion of 珑q a t 2 4 0 n m m盯 d ec er as e li n ear ly w i t h C A I , ’ 5 a e t ion ,
a n d t h e r ea e t ion can k e
p on
s t ea d ily fo r s e v e r a l m i n u t es
. 拟 1 e n乞 ” m e ac t i vi t ies we er co m p ar e d
w i t h t h e
same
f r e s h w e ig h t ( g P刃 ) of t h e e a l li .
1
.
4 1姚 st o r s
vear
一p h ” 10 1嘟回 加d ices M a lon d ial d e h y d e (M旧A ) w as t es t e d 侧 t h t h e K i t
m a d e b y hC i
n s e N anj i眼 J ian e hen g B ioe 眼 in e er i眼 山m p an y . E
xosm
is r a t e of on
n -
el ec tolr y t i
e s
ub
s t an ce ( N E S ) w as t es t
e d as i
n t吧 ar l ca l li b e i飞 iifn l t ar t ed in dou b l-e d is t i lled
wa
t e r i n s i l ico n l iz ed t
u b s in hS ak i飞一W a t e r 一aB t h a t 25 ℃ fo r 2 0 h , a n d d e t ec t i飞 t h e i n e easr i
n g
第 5期 h Zo uC han 兮F台xl g, et a z : F r e R a d i喇 R es 因 11艾污 u nd e r N + Ir a d i a t ion · 52 5 ·
ar t
e o f e x t ar e otr
’ 5 a b哪p t ion a t 26 4 n m . olS u b le p or t e i n was t es et d w i t h 0
.
1 9几 com 脱
ie
b r i ll ian t b l
u e
G 25 o [
12 ]
.
s i n ce ea e h b loc k of t h e ca l li con
s is eat of q
u i t e a n u m块 r of e e ll s , t h e
ca ll i w i t h o ir ly s u far ce ce l l
s be i飞 k i l led co u ld esr t o r e d u r i馆 1哪 t han s d , an d t h e fa t a l
dam
a g姆d ca l l i wo
u ld t u rn v is ib ly g r a y w i t h in t h e sarn
e 详 r i浏 . S u vr ivi n g ar t e of t h e ca l l i wa s
co u n t ed o n t h e f if t h d a y a f t e r i r r a d ia t io n
.
A l l s am
p les we er an
a ly z e d in t r ip lie a t e
,
an d ea
e h d a t u m in t h i s p叩 e r was p
r es e n t ed i n
(m ea
n 士 s t an d ar d e or
r
) ( SE )
.
2 R e s u l t s a n d a n a ly s i s
2
.
1 E f 6叉 t o f N + b e田” i r ar d i a t ion on f 八犯 阳 d ica 一i n 回一1 In o u r ex 衅ime n t , N + b ea m
w i t h t h e I
owes
t do
s e s t im u la t e d f r e e ar d i司 o b v io u s ly ( F ig . 1 ) . hT e d a t u m o f 5 2 x 1 0 , 5 io n酬
c m Z i r acrt i
a t e d脚 u p aer e h e d t h e axnt im u m as 2
.
525 t i
sme
o
f t h
e co n t or l
.
F r e e ar d ica l co n t e n t
d e e r ae
s de w h e n N
十
dos e i n e er ase d
.
ǎ石三·沐ì的í0寸刊OQà公ù决1。.一V口,
0 0 {
~
。 r。 。 r a d i c a } 一 。一 5 0司 ’ “ 0 0 s o f ~ I
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nùnnU目月,、J勺`l
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奋忿卜一10门自Od
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互
1 6 0 0孚
! 2 0 0已
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4 0 0 获
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6 O
互
4 0
互
互 2 0
互
一司。Pó必Jo祠uuo奋l川比
0 2
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.
4 13
-习 O
1 5
.
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e
-
0
.
0 2
.
6 一一一一 - 习 05 . 2 7 . 8 10 . 4 13 . 0 15 . 6N一 d o s e ( i o n s /e m Z) X l o’ 压 N’ d o s e 〔 i o n s /e m , ) x 1 0 ` ,
氏玲 P resn t 土 SE
, n = 3
F论. 1 R el at ive con t e n t of fr e 份d ical
日d vil yt i n 5
. 娜如 5 ca ll i i n l d ia tde b y
w i t h d i f fe 代 n t d佣 es
氏 r s p r巴沈 n t 士 SE , n 二 3
即 d S O D 珑 . 2 R 〕D an d C A T act vil t ies in 5 . 那如 s 回 il
N
十
1犯 a n l i口翻 ia t de by N + 晚田吐 w i t h d i月笼沈n t d o , `
2
.
2 hC an g es
o f an t iox id an t e nZ ” nr es i n t h e ae 川 a ft e r s u f fe r i n g f n ” n N + b侧” n i r ar d iat ion
S OD w a s se
r iou
s ly ihn ib i t
e d b y low
e r ( l o s e N
十
b
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.
I t s a e t i v i t y in t h e 2
.
6 x 10 ` s ion s C/ m2
t r
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e d g (r 〕 u p w as on ly 1 1
.
3% of t h e con
tolr
.
B u t s in e e t h e d o se s u印 a s歇妇 5 . 2 火 10 15 ion s /
c m Z
,
3 O D a e t iv i t y r e阮 u n d司 由抑 ly . T h e 10 . 4 火 10 , 5 io n s / e mZ t r aet e d g or u p 即 t t h e
ant
x im unt as 1
.
4 1 3 t i们n e s o f t h e co n tolr
.
W h
e n t h e d o se b
caem
e e v e n h ig h er
,
S O D a e t iv i t y
d
e e r e a s e d 昭 ia n ( F i g . 1 ) .
P O D act i
v i t y d e er e as e d sl ig h t ly u n d e r lo w e r do
s e N
十
b
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.
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.
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5 2 6南京大学学报 ( 自然科学 )第 3 9 卷
CA T was 明 it e f r昭 ile t oN + beam ir ad i
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t h e s u vr iv i眼 r at e of t h e e a ll i wa s sa v ed fo r 5 . 0 % of t h e co n t m l . cA co m p an i e d b y t h e
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第 5 期 Z h o u C ll田 1兮 F an g , et a z : F r e R a d i阅 R eS I冲~ u xl de r N 十 Iar d ia t ion 527
r e ut nr e d ot 8
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企门 d i a t ed ca l li Of S . p a te nS 诫 t h / w it h OU t u . 叮n it ol
P hy s io log ical ind i
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(诚 t h r n a n n iot l)
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(诚 t hi 川 t n 妞 n n iolt )
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3 33 8
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J吸矛气、 .矛苦
Cb n t即 t of 刻 u bl e Por l ie n
黝口i vi ng art e of e a l li ( %
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.
3 35 士 0 . 0 34
19
.
0 54 士 0 . 7 50
27
.
4 士 3 . 5
117
.
55 土7 . 0 7
1 886
.
8 土 3 1 . 2
0
.
22 8 士 0 . 0 31
2 2
.
0 08 士 0 . 104
3 1
.
4 土 4 . 3
5
.
2 80
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4 1
.
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番 备
一 6 . 7 57 怪 价
一 1 . 2 50
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e n t h e ca l li w er e d ier e t l y e x p o s e d in vac
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,
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s u vr iv i飞 r at e d ec r e ase d ot 2 7 . 6 % e ve n w i t ho u t io n s i r ar d i a t io n ( N o t s h o wn i n t h is p a eP r ) .
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e s u vr i vi n g ar t e i n t h e co n t or l g or u p p er tear edt iw
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.
I t s h o w e d t h a t D M S O was
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s u s t a i n i眼 a r e l a t iv e l y 叩 t im ist ie s u iVr v i明 ar t e o f t h e e rn b r y o n i e cal l i d u r i呢 t h e L E H I r a d i a t i o n
p找犯 e S ·
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.
[ 13 ] be l ive d
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s be a m h ad fe w
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s
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adr ica l i
n h is e x p e 6
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十
be am i r ad i
a t i飞 e r外homr y
e in p耐 u e i飞 b ac t e r i a . 乳呢 e t a z . 〔14 ] , H a n a耐 Y u [ 15 ] fo u n d t h e
1刀 s it iv e r el a t io n hs i p be t w e e n fer adr ica l ac u m u lat io n a n d t h e d撇 of i o n s bearn hw e n N 十
i r ad iat ed m i
c p D 0 r g an ism
o r a lan ien
. 阮 n g et a l . 眼 r e d t h a t t h e p r ed u e t ion an d e o m b i n a t ion of
fr e e r a d ical
v切o u ld o o n l e t o b a lan e e an d s a t u r a t io n w h en t h e d胎 e ear hc ed t h e arn x im um ( 1 0 X
2 0 `5 io n s左时 ) [ 14〕 . H an an d Y u i n s i s t e d o n t h e Ii n ear : e la t i o n s h ip be t w e e n f r e acrt ica l a n d t h e
俪e u n t ix 1 6 x l o ’ s ion s c/ n 1 2 [ ’ 5 ] . T h e y 沮l d id n ’ t f i n d t h e d e e r eas i飞 S t a罗 o f f er ar d ica l . In
ou
r r es u lst
,
fer
e r a d ica l in 5
. 哪 t e sn ca ll i d id i n e easr
e s h a r P ly
,
b u t on ly w i t h t h
e dos e on h ihg er
t h a n 5
.
2 x 20 15 ion
s c/ m 2
.
S in ce 2 0 h h a d p a S e d a f t e r ion
s iar d i
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e fo r e we
t e s t e d t h e
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,
t h e d a t a on ly
s h o w e d 10 n g
一
l i f e f r e ar d ical
.
I t s p o S ib l e sou cr
e m a y b e p r od
u ct s of or ig i n al
r ea e t io n d u r i眼 ir a d i a t ion pocr es , or t e n l p o r a r y f er r ad ical s at b i li z ed b y s p e e ial b loc k昭 e o f
i r a d iat ed ion
s o r
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s p l
a e ed el e m en t
s
.
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,
P O D an d C AT aer
t her im卯 rt an t enz y l l l e s of an t io x idan t s y s t em in o 吧an ism
.
On
e e t h e p lan t
s
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e sr f
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ad iat i
o n
, 卯 l lu t ion , sa li n i z at ion o r ot h e r s t r es es , i t s an t io x id a n t
en
z y n l e s
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y eXP
r
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110 n n a l
,
t h u s e x e e s iv e f er
r a d ica l ca n b e r emo
v ed
块for e it b r i n g s 如 u t s e r i e s of d a rT lag e 〔12 〕 . M D A 15 t h e p咖 u e t of p e oxr id a t ion “ me b r an elip id . W h e n t h e dOS e of N 十 bearn w as be twe e n 5 . 2 X l o , s ion s众mZ an d l o . 4 x l o ` s i o ns 走m2 ,
2 5 8 南京大学学报 (自然科学) 第3 9卷
M DAa cu eu ma t l d eb oi v
s u o
l y
.
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P eo r xi da t d e
.
T hs u
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a dia cl m
s ut ha v e叩pa r ed
.
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t ho et h er han d
,
al t h
o u g h C A T w as v e仃 f r a g il e ,
w e d id f i n d 5 0 1〕 a n d P O D be in g a e t i v a t e d a p paer n t ly
. 肠 t h e b e t t e r e x p l a n a t i o n a切u t fer
ar d i
e a l i n o u r e x 详 r im e n t s h o u ld b e , o n e e e x e es i v e fer r a d ie a l a e e u m u l a t e d t o a e e r t a i n le v e l ,
t h e an t iox idan
t 斗s tem w as al 黝 ac t iv a t ed
,
w h ihc con
t r ar y e l e an ed
u p t h e f r e e r a d ical b
e f o r e w e
t es t e d
.
T h e d isa s t e r of f
r e e
ar d ica l w as r e lea s ed
.
50
t h e so l u b l e p or t e i n cou ld k
e eP a lmo st
s t a b l e
w i t h i n t h is ar 飞 e , an d t h e r e was ve n a l it t le r es t o r a t ion i n s u vr iv i n g ar t e
.
A n o t h e r r e
ason
t h a t s h o u ld on t b
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e d a切 u t t h e dam g
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+
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t h a t i
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be am
s
ho
t a t t h e e e ll
s u r f a c e an d p耐 u ce d oln es d iecr t ly o n e e l l w a l l a n d me m barn e [ 1 ] . 仆 15
e f f e e t m ihg t al o b
e a p p ar
e n t
,
b u t h a d l i t t l e d i f f e r e n e e hw
e n 山 e dose hc an 罗 d fomr 2
.
6 x 10 ` 5
ion sc/ 衬 ot 1 5 . 6 x l o 15 ion s c/ m2 . 乳 we co u ld e x p la i n t h e e xos mos i s art e o f N SE
,
an i n d
e x o f
ce l l me m b ar
n e 拌mr ea b i l it y , w h i e h i n e r eas e d s h a r p l y a t t h e lowe
s t d o se b u t e han g
e d m
u e h
s lo w ly w i t h t h e d o s e i
ceasnr
i飞 ve n h i g h e r
. 瓜 t h o u g h l i p记 p
eoxr
记at ion cou ld b e d et e ct ed s i n e e
7
.
5 火 r o , 5 io n s,c mZ
,
i t d id n ot t h ear
t en t h
e 详mr ea b i li t y o f t h e m em b r an e u n t i l 10 . 4 x 1 0 15
i o n胶mZ . B y w h e n t h e d o s e was h ihg e : t han 10
.
4 x 10 ` 5 io n s走m2 , t h e m emb arn e was
u l t iarn
t e ly bor k e n b y bot h i
o n s ’ d iecr
t ly
s hco t i飞 t hor u g h an d l ip id p eoxr id at ion
.
sA
a f e w
com
po n e n t s i n t h e e e l l h a d a lr ea d y los t b e fo r e b e i n g t e s t e d
,
w e o n ly 即 t t h e d e e r eas ed d a t a o f
M D A an d
exosm
i s ar t
e o f N E S a t h ihg
e r d o s e
.
OT
e n su er t h e er la t ion
s h ip of f
r e r a d ie a l an d
s u 扮i v i飞 r at e o f t h e e a l l i d u r ign L E H I
r a d ia t io n p ocr es
s ,
we
a dded arn
n n iolt as
a f r e e ar d ica l S ca v e n g er
.
T h e er s u l t s s u p卯 rt e d o u r
con
l u s ion
t h a t f r e e r ad ica l w as an i
l n p o r t an t f ac ot
r t h at ca u sed f at
a l d a m
a g e b y m e m b r an
e l ip id
eP or x id
a t ion w h
e n N
十
b e am i r ad i
a t e d 5
. 加 t e n s e a l li . H o w ve e r , w it h t h e p ar t i e i p at ion Of t h e
an t iox id an
t s y s t
em
,
t h e lve l
o f f r e e ar d i
e al a n d it s dam ag
e
we
r e
on t
s t ir e t ly li n ear ot
t h e d o s e
of iar d i
a t ed ion
s
( Cb
r r e l a t ion 江飞s t b e t we e n f r e e r a d ie a l co n t e n t an d N 十 dos e , R = 一 0 . 4 2 0 ,
P > 0
.
0 5
.
C冶r r e l a t io n 一eT s t b e t we e n f r e e ar d i e al con
t e n t a n d e a l l i s u vr iv i飞 ar t e : w i t h i n f u l l
d o s e r an g
e : R = 0
.
10
,
p > 0
.
05 ; w i t h i n do se on h ihg
e r t h an 5
.
2 x 1 0 ` 5 io n s c/ m2
: 尺 =
一 0 . 9 9 7 , P ( 0 . 0 1 )
.
A c k n o w led ge m e n t s Y u Z e n g
~
iL a n g
,
iY n oR
u 一
hC un an d Y
u iL
一
iX
a n g f
~
ht e hC in es
P la
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A ca d em
y h e lp ed ot con d
u e t io n s i r ad i a t io n
.
Xu Y
u n 一X i a
,
Y an g Y
a n g an d L
e n g X i n
f
omr
N anj i
n g U
n i v e r s i t y a l、 we er h e lp f u l i n t h e e x p e r im e n t . 肠 n g 肠 n g , S u n hS u 一 C u n an d
R u an hC
e眼一i a n g f r o 丈n N a nj in g U n i v e r s i t y an d t h e aon n y m o u s jo u rn a l er v i e w e sr h e lp e d t o
in 1 Pvor
e t h e P ap
e r
.
第5 期 Zih 处 1C han g -F a n g, et a l : rF e R a d i回 ReS 林爪以当 un d er N + I r a d ia t ion · 529 ·
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282
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Dr e n
n er D
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of lar g e D N A afr 脚 en t s a ft er h ig h Iin aer en e r g y t r a l` fe r r a d ia t ion . R a d ia t ion an d E n vi onmr en
t a i
iB叩h邓 i cs , 200 0 , 39 ( 2 ) : 111一 120 .
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,
aS ot K
,
et a z
.
S utr
e t u司 朋 a」邓 i, of h份叮 ion ar d ia t ion 一 in d u e de
e hor
~
m
e a be r a t iosn b
y a
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e
for
e e m i C r以艾幻 I〕y . J
ourn
al of B ico h
e m ica an d iB 叩h邓 ica M et h xC坛,
2 00 1
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