全 文 ：表 2 10 批强力接骨散士的宁含量样品测定结果
样品批号
士的宁含量
(mg /g)
样品批号
士的宁含量
(mg /g)
070701 0． 4211 081204 0． 4036
070901 0． 4065 090201 0． 3916
080101 0． 4337 090401 0． 4209
080501 0． 4254 090801 0． 3521
080901 0． 4155 100301 0． 4505
3 讨论
薄层色谱鉴别中杜仲的鉴别方法经过反复的试
验，发现正丁醇层需要低温蒸干才能保证对照药材和
供试品在相同位置有相同颜色的斑点。
通过对 10 批样品中士的宁的测定可知制剂总混
过程中经常会出现混合不均匀的现象，因此，将下限下
调 30%，为保证患者用药安全，上限不变，定为本品每
克含士的宁的量为 0． 31 ～ 0． 46mg。
备注:该医院制剂批准文号为:黑 Z － ZJ － 0414 －
2010。
参考文献:
［1］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典(一部) ［S］．北京:化学工
业出版社，2010:572．
Quality Standard of Qiangli Jiegu Powders
BAI Hai － yu，BAI Xiu － yun，WANG Zhao － yu，WANG Wei － ming，TENG Yi － he
(Heilongjiang Academy of Traditional Chinese Medicine，Harbin 150036，China)
Abstract:Objective:To advance the quality standard of Qiangli Jiegu powders and establish an HPLC method for the
content determination of strychnine． Methods:Borneolum Syntheticum and Eucommia ulmoides Oliver in the powders
were identified by TLC． Results:The spots on TLC plates were clear without interference in the blank reference． The lin-
earity of strychnine was good in the range of 0． 155 ～ 0． 775μg． r = 0． 9996． The average recovery was 99. 51% ． and RSD
was 2. 06% ． Conclusion:The method is simple，reliable，accurate and can be applied as the quality control method of
Qiangli Jiegu powders．
Key words:Qiangli Jiegu powders;TLC;Strychnine;HPLC
HPLC法测定长柱金丝桃抗抑郁有效部位
中金丝桃苷的含量
李彦冰1，许树军1，杨连荣1，张哲锋2，尹蕊1，齐乐辉1
(1．黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040;2．黑龙江省兽药饲料监察所，黑龙江 哈尔滨 150069)
摘 要:目的:建立长柱金丝桃抗抑郁有效部位中金丝桃苷的含量测定方法。方法:室温条件下超声提
取金丝桃苷，HPLC 法测定其含量，Hpersil ODS2 色谱柱，以乙腈(A)－ 0. 1%磷酸(B) ，梯度洗脱(0 ～
10min，A的体积分数为 9%;10 ～ 11min，A由 9%线性增至 15%;至 40min停止洗脱，回到初始比例平衡
6min后进行下一个样品分析) ;流速:1. 0mL /min;检测波长:357nm;柱温:35℃。结果:金丝桃苷在
0. 254 ～ 1. 905μg范围内与峰面积呈良好的线性关系，平均加样回收率(n = 5)为 97. 9%，RSD为 2. 9%。
结论:该方法灵敏、准确、重复性好。
关键词:长柱金丝桃;抗抑郁有效部位;金丝桃苷;含量测定
中图分类号:R284． 1 文献标识码:A 文章编号:1002 － 2392(2011)03 － 0088 － 03
收稿日期:2011 － 03 － 20 修回日期:2011 － 04 － 17
基金项目:黑龙江省教育厅科学技术研究项目(编号:11541339)
作者简介:李彦冰(1955 －) ，男，教授，硕士研究生导师，主要从事中药
新药研究工作。
金丝桃苷是长柱金丝桃抗抑郁有效部位的成分之 一，同时具有抗抑郁活性［1］，性质稳定，且高效液相色
谱法具有分离效能高，灵敏，准确等优点，故本标准同
时建立了高效液相色谱法测定金丝桃苷含量。
1 仪器与试药
戴安 Ultimate3000 高效液相色谱仪(VWD － 3400
紫外检测器、WPS － 3000 自动进样器、TCC － 3x00 柱
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中 医 药 学 报
Acta Chinese Medicine and Pharmacology
2011 年第 39 卷第 3 期
Vol. 39，No. 3，2011
温箱、LPG －3x00 泵、Chromeleon色谱工作站) ;依利特
Hypersil ODS2 柱(200mm × 4. 6mm，5μm) ;METTLER
AE240 型电子天平(瑞士) ;KQ － 250E 型超声波清洗
器(昆山超声仪器有限公司)。
金丝桃苷对照品(中国药品生物制品检定所，批
号 111521 － 200303) ;长柱金丝桃抗抑郁有效部位(实
验室自制) ;甲醇、乙腈为色谱纯;水为重蒸馏水。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件
色谱柱:依利特 Hypersil ODS2(4. 6mm × 200mm，
5μm) ;流动相:乙腈(A)－ 0. 1%磷酸(B) ，梯度洗脱
(0 ～ 10min，A的体积分数为 9%;10 ～ 11min，A由 9%
线性增至 15%;至 40min 停止洗脱，回到初始比例平
衡 6min 后进行下一个样品分析) ;流速:1. 0mL /min;
检测波长:357nm;柱温:35℃;进样量:10μL。在该色
谱条件下，金丝桃苷峰与样品中其它组分峰可达到基
线分离，理论塔板数按金丝桃苷峰计算不低于 6000，
符合含量测定要求，阴性对照溶液无干扰。见图 1。
图 1 金丝桃苷 HPLC色谱图
a．对照品溶液;b．样品溶液;c．空白溶液;1．金丝桃苷
2． 2 溶液的制备
2． 2． 1 对照品溶液的制备 精密称取金丝桃苷对照
品 1. 27mg，置 10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至
刻度，摇匀，即得金丝桃苷对照品溶液。
2． 2． 2 供试品溶液的制备 取长柱金丝桃抗抑郁有
效部位 0. 1g，研细，精密称定，置 50mL容量瓶中，加甲
醇 20mL，超声 40min，放冷，加甲醇定容至刻度，摇匀。
用 0. 45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。
2． 2． 3 阴性对照溶液的制备 取缺长柱金丝桃有效
部位外的其它试剂，照供试品溶液的方法制成缺有效
部位的阴性溶液。
2． 3 方法学考察
2． 3． 1 线性关系考察 精密吸取金丝桃苷对照品溶
液 2μL、4μL、6μL、8μL、10μL、15μL，在上述色谱条件
下进样，测定其峰面积，以对照品进样量(μg)为横坐
标、峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，得金丝桃苷
回归方程:Y = 36. 241X － 0. 1575，r = 1. 0000。结果表
明，金丝桃苷进样量在 0. 254 ～ 1. 905μg范围内与峰面
积呈良好的线性关系。
2． 3． 2 精密度试验 精密吸取金丝桃苷对照品溶液
10μL，按上述色谱条件重复进样 5 次，测定，结果表
明，金丝桃苷对照品峰面积值的 RDS为 0. 2%，仪器精
密度良好。
2． 3． 3 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液，在选
定色谱条件下分别于 0h、4h、8h、12h进样，测定金丝桃
苷峰面积。RSD 为 1. 2%。结果表明供试品溶液在
12h内稳定性良好。
2． 3． 4 重复性试验 精密称取同批样品，按“供试品
溶液的制备”项方法制备 5 份供试品溶液，在上述色
谱条件下分别进样 10μL，测定含量，结果平均含量为
5． 12%，RSD为 2. 0%(n = 5)。
2． 3． 5 回收率试验 精密称取已知含量(52. 01mg·
g －1)的样品 40mg，共 6 份，分别精密加入金丝桃苷对
照品适量，依法制备样品溶液、测定峰面积，计算含量，
结果见表 1。
表 1 加样回收率试验结果(n = 5)
序号
样品中
含量(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1 2． 132 1． 615 3． 726 98． 7
2 2． 080 1． 615 3． 622 95． 5
3 2． 028 1． 615 3． 683 102． 5 97． 9 2． 9
4 2． 023 1． 615 3． 570 95． 8
5 2． 034 1． 615 3． 597 96． 8
实验结果表明，回收率在 95% ～ 105%之间，加样
回收良好。
2． 4 样品含量测定 取制备的有效部位样品适量，平
行 3 份，精密称定，按“供试品溶液的制备”项方法制
备供试品溶液，依法测定，计算含量，分别为 5. 20%，
5. 38%，5. 11%，平均含量 5. 23%。
3 讨论
金丝桃苷是长柱金丝桃药材中黄酮类成分之一，
具有较好的抗抑郁活性，且性质稳定，因此选择金丝桃
苷作为测定长柱金丝桃抗抑郁有效部位的质控指标
之一。
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通过对金丝桃苷(200 ～ 800)nm 波长的紫外光谱
扫描，显示其在 254、357nm 有最大吸收峰，因 254nm
下非黄酮物质也有吸收，为避免干扰，选择 357nm 进
行检测。
根据药典收载的贯叶金丝桃药材中金丝桃苷的测
定条件［2］，本试验首先考察乙腈 － 0. 1% 磷酸溶液
(16∶ 84)为流动相的分离效果，结果金丝桃苷峰处有
一肩峰(金丝桃苷与异槲皮苷都是槲皮素的糖苷，具
有相同的苷元，仅在糖基部分有一个羟基的构型不同，
所以它们极性相似，从而导致保留时间非常接近)。
后又通过比较乙腈 － 0. 1%磷酸系统不同梯度变化程
序的色谱图分离情况，确定本试验的梯度洗脱。
参考文献:
［1］ 朱有昌．东北药用植物［M］． 哈尔滨:黑龙江科技出版社，1989:
43．
［2］ 吴伟，崔光华．星点设 －效应面优化法及其在药学中的应用［J］．
国外医学·药学分册，2000，27(5) :292 － 298．
综 述
熊胆(粉)非胆汁酸类成分研究进展
吴革林，吴修红，董阗伟，王喜军*
(黑龙江中医药大学药学院，黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要:本文综述了熊胆(粉)中非胆汁酸类成分的研究概况，对胆固醇类，氨基酸类，胆色素类，蛋白
质、多肽类，微量金属元素类的含量及影响因素、药理作用做了详细综述。为熊胆(粉)的研究开发提供
理论依据。
关键词:熊胆(粉) ;胆固醇;氨基酸;胆色素;蛋白质;多肽;微量金属元素
中图分类号:R284． 1 文献标识码:A 文章编号:1002 － 2392(2011)03 － 0090 － 03
收稿日期:2011 － 02 － 21 修回日期:2011 － 04 － 16
基金项目:国家中医药管理局重大专项(编号:2004ZX04 － 1) ;国家科技
重大新药创制专项课题 － 创新药物研究开发(编号:
2009ZX09103 － 357) ;教育部科学技术研究重点项目(编号:
210066)
作者简介:吴革林(1982 －) ，男，硕士研究生，主要研究方向:中药血清
药物化学。
* 通讯作者:王喜军(1960 －) ，男，教授，博士研究生导师，主要研究方
向:中药血清药物化学。E － mail:xijunw@ sina． com
熊胆为黑熊 Selenretos thibetanus Cuvier 或棕熊
Ursus arctos Linnaeus 的干燥胆囊(胆汁) ，其具有清
热、镇静、明目、杀虫的功效，用于治疗惊风抽搐、目赤、
咽喉肿痛等症［1］。熊胆粉为黑熊引流胆汁的干燥粉
末，目前被国家卫生部批为一类新药。其化学成分与
天然熊胆相似，主要含有结合型熊去氧胆酸、鹅去氧胆
酸、胆酸、去氧胆酸、蛋白质、肽、微量游离氨基酸、微量
胆色素、胆固醇、脂肪酸和无机元素，其中胆汁酸被认
为是主要成分，熊去氧胆酸(Ursodex － cholis acid，UD-
CA)被认为是熊胆粉中特有成分。熊胆中胆汁酸类成
分的研究已经有很多文献报道了，但非胆汁酸类成分
的研究报道的很少。近年来，随着对熊胆中非胆汁酸
类成分的研究及特殊活性的研究，该类成分已引起了
广泛关注。现对熊胆近来的非胆汁酸类成分的分类及
药理作用研究作一综述，为熊胆的进一步开发、研究提
供参考。
1 胆固醇类
胆固醇是在肝脏合成后输送到胆囊中［2］，它是合
成熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸的前体物质，是胆汁的成分
之一。
1． 1 胆固醇类成分及影响因素 天然熊胆胆固醇含
量一般为 0． 56% ～0． 59%，用现代常用的薄层扫描法
测定结果，两类熊胆样品的含量也较为一致，均含量较
低。李政［3］等研究表明天然熊胆粉的红外光谱中
1740cm －1峰强明显高于人工合成熊胆粉，推测人工合
成熊胆粉中长链脂肪族化合物的量低于天然熊胆粉。
然而，影响胆固醇含量的因素，尚无报道。
1． 2 胆固醇类成分的活性作用研究 胆固醇是熊胆
中必不可少的物质，它和熊的健康状况、饲料配比，引
流时间，引流周期都有关系，其规律性尚无报道，有待
进一步的研究。研究表明，熊胆粉的疗效作用与胆固
醇无必然联系，而且多食胆固醇类物质可以促进动脉
粥样硬化，诱发胆结石等症。孙文基［4］等提倡去除熊
胆中的胆固醇，制备成精制熊胆粉来药用，还可以除去
熊胆粉的腥味，会起到扬长避短的作用。
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