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黄花补血草组织培养试验研究



全 文 :《现代农业科技》2009年第 15期
的培养基中均能发芽,含有激素的培养基发芽率较高,其中
6-BA/NAA 为 5.0mg/L 的培养基最高。与不加任何激素的
对照培养基对比,发现含有激素的培养基均能诱导出愈伤
组织和丛生芽,且 6-BA/NAA 为 5.0mg/L 的培养基其愈伤
组织和丛生芽诱导率最高且相等。因此,综合激素浓度对芽
苗生长的影响,在黄花补血草种子无菌播种诱导培养中选
择 MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L 培养基比较理想。
2.2 不同激素浓度及配比对增殖培养的影响
根据诱导培养中 6-BA/NAA 为 5.0mg/L 时丛生芽过
于茂盛的试验结果,在增殖培养基设置中,以尽量降低单项
激素浓度为原则进行设置,筛选最佳增殖培养基 。接种后
30d 统计结果见表 2。
从表 2 可看出,在不含任何激素的增殖培养基中黄花
补血草表现出良好的生长状态,但增殖系数太低;激素总含
量较大时,增生的丛生芽较多、较密,且长势表现不好;在激
注:观察时间为接种 29d。
发芽率
%
愈伤诱导率
%
丛芽诱导率
% 生长情况
0 0 21.4 0 0 发芽的为单芽,叶色红色、绿色均有
0.5 0.1 71.4 28.6 28.6 大部分为 6~10 片叶单芽,叶红色,愈伤组织红色,大部分分化出丛生芽
1.0 0.1 35.7 7.1 0 大部分为 6~10片叶单芽,叶红色,个别分化成红色愈伤组织,无丛生芽生长
2.0 0.1 28.6 28.6 21.4 无单芽苗,诱导的愈伤组织上均有丛生芽
0.5 0.5 50.0 21.4 21.4 半数为 6~10 片叶单芽,愈伤组织块较大,均有丛生芽
1.0 0.2 71.4 28.6 28.6 大部分为 6~10 片叶单芽,愈伤组织上均分化出丛生芽
6-BA
mg/L
NAA
mg/L
表 1 不同激素浓度对种子萌发的影响
增殖
系数
生长情况
0 0 1.5 转接的丛生芽生长健壮,叶色深绿,个别有根系生长
0.1 0.02 10.0 丛生芽生长较茂密,叶色正绿,分芽健壮
0.2 0.04 15.0 丛生芽生长茂密,叶色浅绿,略有徒长,芽苗较弱
0.5 0.10 26.0 丛生芽生长很茂密,叶色浅绿,明显徒长,芽苗长
势弱
6-BA
mg/L
NAA
mg/L
表 2 激素含量对增殖培养的影响
黄花补血草(Limoniumaureum),白花丹科补血草属植物,
多年生草本,株高 9~40cm,叶基生,灰绿色,矩圆状匙形至
倒披针形,伞房状圆锥花序,花萼金黄色,漏斗状,膜质,因
其金黄色膜质花萼长时间不落,在干旱、植物稀少的荒漠地
区极为醒目,且具有补血作用,故又称金色补血草、金匙叶
草。多生于滩地、湖盆、戈壁、石质山坡、流动沙丘等干旱荒
漠生境下。该植物耐盐碱、耐贫瘠、耐干旱,是一种耐盐性很
强的旱生泌盐植物,在年降雨量 300mm 以上的地区不需浇
水可正常生长,是草坪用水量的 1/10;在气温-36℃以内可
安全越冬;土壤 pH 值 9 以下、含盐量 0.4%以内可正常生长
开花。尤为奇特的是其膜质花萼在 6~9 月无风季节,保持不
落,如一团团金色火焰傲立于荒漠戈壁甚至流动沙丘上。是
干旱荒漠地区为数不多的野生花卉之一,花色艳美,繁密华
贵,保持时间极长,可作插花中的配材和衬花,也可用来制
作干花,其韵味独特,是插花艺术中不可多得的花材,又是
防风固沙的优良植物。其开发利用前景广泛。
1 材料与方法
1.1 试验材料
外植体材料是 2003 年 9 月从西宁市火烧沟野生植株
上采收的种子。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体的清洗、灭菌。种子流水冲洗 30min→超净台
上无菌水冲洗 2 次→75%的酒精浸泡 30s→无菌水冲洗 4
次→0.1%升汞浸泡 10min→无菌水冲洗 8 次→无菌滤纸吸
干水分→接到预备好的培养基中。
1.2.2 基本培养基及培养条件。以 MS 为基本培养基,分别
附加激素 6-BA(0mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、
2.0mg/L)和 NAA(0mg/L、0.02mg/L、0.04mg/L、0.10mg/L、
0.20mg/L、0.50mg/L)进行丛生芽的诱导及增殖培养;以 MS
为基本培养基,选择 1/2 无机盐浓度和 NAA(0mg/L、0.1
mg/L、0.2mg/L、0.3mg/L)、IBA(0mg/L、0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、
1.0mg/L)进行不定根的培养。以上培养基中均附加食用白
糖 30g/L、琼脂 5.3g/L,pH 值 5.8。培养条件:温度(20±2)℃;
光照强度 2 000~2 500Lx;光照时数 12h/d。
2 结果与分析
2.1 不同激素浓度及配比对丛生芽诱导的影响
接种 3d 后种子开始萌发;5d 时 30%展叶,芽苗叶片大
部分呈红色,少数呈绿色;15d 时展叶芽苗基部肿大生长愈
伤组织;29d 时发现明显的丛生芽生长(见表 1)。
从表 1 可看出,黄花补血草种子在添加或不添加激素
黄花补血草组织培养试验研究
常黎民 张文莲
(青海省西宁市城南苗圃,青海西宁 810001)
摘要 通过对野生黄花补血草组织培养与快速繁殖的研究,得出:丛生芽诱导的最佳培养基为 MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L;丛
生芽增殖的最佳培养基为 MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L;在 1/2 MS+NAA 0.5mg/L 培养基中培养健壮单芽 4周内生根率达 63%;瓶苗
常规驯化后选用国产泥炭土炼苗成活率最高,为 46%。
关键词 黄花补血草;组织培养;丛生芽;增殖培养;生根率;炼苗
中图分类号 S567.23+9 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2009)15-0080-02
作者简介 常黎民(1971-),男,陕西西安人,助理工程师,主要从事苗
木花卉的繁殖及栽培工作。
收稿日期 2009-06-08
园艺学
80
《现代农业科技》2009年第 15期
(上接第 78页) 3 结论
试验结果表明,在低浓度的盐浓度下,维生素含量没有
明显变化;随着盐浓度的增加,盐芥所含维生素 C 量相应
降低。
4 参考文献
[1] TESTER M,DAVENPORT R.Na + tolerance and Na + transport in
higher plants[J].Ann Bot,2003,91(5):503-507.
[2] 李志英,赵二劳,张海容.紫外分光光度法测定沙棘中维生素 C 含量
[J].山西大学学报(自然科学版),2003,26(4):339-340.
[3] 宋莉璐.铅胁迫对拟南芥和盐芥种子萌发的影响[J].现代农业科技,
2007(3):9,12.
[4] 聂惠,于海峰,刘浩明.向日葵对盐胁迫的反应及其抗盐机理的研究
进展[J].内蒙古农业科技,2008(6):23-25.
[5] 刘爱荣,赵习夫.盐胁迫下盐芥渗透调节物质的积累及其渗透调查
作用[J].植物生理与分子生物学学报,2005(4):61-67.
1.00
1.05维


C



m
g/
g
1.10
1.15
1.20
1.25
1 2 3 4
图 3 样品测定结果
注:横坐标中,1 代表野生型;2 代表盐浓度为 100mmoL/L;
3 代表盐浓度为 200mmoL/L;4 代表盐浓度为 300mmoL/L。
∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥
∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥
(上接第 79页)
二元复混肥 1 200kg/hm2的处理增产效果最好,其产量比不
施肥、等养分化肥、等价复合肥处理分别增产 15.23%、5.07%、
0.55%;生物统计结果表明,处理间产量达极显著水平。
小白菜施用氮钾二元复混肥 1 200kg/hm2的处理具有
较好的经济效益,比不施肥、等养分化肥、等价复合肥的处理
分别增收 3 278.00 元/hm2、1 279.25 元/hm2、215.00 元/hm2,
经济效益显著,值得推广。
4 参考文献
[1] 李会合,王正银.施氮对小白菜产量和品质的效应[J].中国土壤与肥
料,2007(4):53-55.
[2] 陈静.小白菜施用中农复混肥效果初报 [J].福建农业科技,2009(1):
51-52.
从表 3可看出,生长素 IBA和 NAA 对黄花补血草的生
根均有影响。就生根率进行比较,在浓度相同的情况下,含
有 NAA 的培养基比含有 IBA 的培养基生根率高,且根系健
壮。通过生根培养发现,黄花补血草生根较慢,生根时间不
一致。从试验结果可看出,NAA 在 0.5mg/L 与 1.0mg/L 的浓
度下生根率及根系长势无明显的区别,故在黄花补血草的生
根培养中选择 1/2 MS+NAA 0.5mg/L 为生根培养基。
2.4 不同炼苗基质对生根苗炼苗移栽的影响
黄花补血草生根时间不一致,给炼苗移栽带来了一定
的难度。在炼苗试验时,选择平均根长达 5cm 左右的瓶苗,
在温室闭瓶炼苗 3d,开瓶炼苗 2d 后,将根部培养基冲洗干
净,用 1 000IU 农用链霉素和多菌灵浸根后栽入经消毒处理
过的不同基质设置中。栽植后土壤湿度不宜过大,保持空气
湿度不低于 80%,种植后前 7d 用 50%遮荫网进行遮盖,20d
后调查其成活率,以植株直立、萌发新叶为幼苗成活的标准
(见表 4)。
由表 4 可知,黄花补血草组培瓶苗经过常规驯化后移
栽,国产泥炭生长情况比黑土和园土好,但成活率依然小于
50%。要最终达到快速繁殖进行大批量开发应用的目的,还
有许多问题有待于进一步研究和探讨。
3 结论与讨论
采用种子无菌播种诱导进行快速繁殖黄花补血草,从
根本上解决了黄花补血草因结种量少、采收困难等原因造成
的常规繁殖慢、需求多的难题,在短期内可为苗木市场提供
大量的优质种苗。试验研究表明:选用 MS+6-BA0.5mg/L+
NAA0.1mg/L 培养基,其外植体诱导率达 28.6%,丛生芽诱
导率达 28.6%;选用 MS+6-BA0.5mg/L +NAA0.1mg/L 培养
基进行丛生芽增殖培养,可得到健壮的黄花补血草无菌丛生
芽,增殖系数达 10;在 1/2MS+NAA0.5mg/L 培养基中培养
健壮单芽 4周内生根率达 63%;瓶苗常规驯化后选用国产泥
炭土炼苗,成活率为 46%。
4 参考文献
[1] 西宁市植物志编辑委员会.西宁植物志[M].青海:中国藏学出版社,
1999.
[2] 郝玉兰,徐杰,闫瑞霞.黄花补血草的组织培养及快速繁殖[J].内蒙古
师范大学学报,2006(4):482-483.
炼苗基质 移栽数量∥株 成活率∥% 生长表现
国产泥炭 100 46 长势较好
黑土 100 35 长势一般
园土 100 17 长势差
表 4 不同炼苗基质对生根苗炼苗成活率的影响
NAA∥mg/L 生根率∥% 根系生长情况 IBA∥mg/L 生根率∥% 根系生长情况
0 11.2 根数少,根系长,无分支 0 11.2 根数少,根系长,无分支
0.1 44.0 根数少,根较细,带少量分支 0.1 40.0 根数少,根细,带少量分支
0.3 50.0 根数中,根较粗,带分支 0.3 42.0 根数少,根较细,带分支
0.5 63.0 根数较多,根粗,带 2 级分支 0.5 47.0 根数中,根较粗,带分支
1.0 63.0 根数较多,根很粗,带 2 级分支 1.0 49.0 根数较多,根较粗,带分支
表 3 不同 NAA与 IBA浓度对黄花补血草生根的影响
素总含量较低的培养基中,丛生芽生长表现良好,且增殖系
数较高。因此,在黄花补血草的增殖培养中,选择 MS+6-BA
0.5mg/L+NAA 0.10mg/L 比较经济、快速、保质保量。
2.3 不同的激素浓度及配比对生根培养的影响
在黄花补血草增殖培养不含激素的培养基中,个别植
株有根系生长现象,说明黄花补血草生根,在没有外源生长
素存在的情况下也能生根,但生根率很低。因此,在黄花补
血草的生根培养中采用了常规的 1/2 MS 附加一定浓度的
NAA 或 IBA进行生根培养,并筛选最佳生根培养基。25d 观
察结果见表 3。
园艺学
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