全 文 :地桃花水提物的体外抗菌实验研究
陈 勇,谢 臻,韦 韬,魏后超,曾海生,张 龙
(广西中医学院 药学院,广西 南宁530001)
摘 要:目的:探讨地桃花水提物在体外的抗菌作用。方法:采用琼脂二倍稀释法对地桃花水提物进行
MIC实验研究。结果:地桃花水提液在体外对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎链球
菌和普通变形杆菌均具一定的抑菌活性,且对金黄色葡萄球菌和普通变形杆菌的抑菌活性更为显著。
结论:本研究为地桃花药材水提物的抗菌效用提供了实验依据。
关键词:地桃花;水提物;体外抗菌实验
中图分类号:R282.71 文献标识码:A 文章编号:1673-2197(2011)10-0029-02
收稿日期:2011-06-12
基金项目:广西中医学院重点课题(ZD09011);广西研究生教育创新计划项目(2009106001007M13)
作者简介:陈勇(1961-),男,广西中医学院教授,硕士生导师,研究方向为中药及其制剂质量分析。
Antibacterial Experiment on Aqueous Extract of Urena lobata L.in Vitro
Chen Yong*,Xie Zhen,Wei Tao,Wei Houchao,Zeng Haisheng,Zhang Long
(Guangxi Traditional Chinese Medical University,Nanning 530001,China)
Abstract:Objective:To explore the antibacterial effect of aqueous extract of Urena lobata L.in vitro.Methods:Agar dilution method
was used to MIC experiment.Results:The aqueous extract of Urena lobata L.had antibacterial effects on staphylococcus aureus,Pseudo-
monas aeruginosa,escherichia coli,Streptococcus pneumoniae and Proteus vulgaris.especialy staphylococcus aureus and Proteus vulgaris.
Conclusion:This research offers a experimental bases to the antibacterial effects of aqueous extrat fromUrena lobata L.
Key Words:Urena lobata L;Aqueous Extract;Antibacterial Experiment in Vitro
地桃花为锦葵科植物肖梵天花Urena lobata L.的干燥
地上部分[1],又名天下捶、小朝阳、假桃花等,主产于广西、
福建、云南、四川、贵州等地。具有祛风利湿,活血消肿,清
热解毒功效。主治感冒,风湿痹痛,痢疾,泄泻,淋证,月经
不调,带下,跌打肿痛,喉痹,乳痈,毒蛇咬伤等[2]。国内目
前对该药材已经作了生药学和化学成分研究[3-6],地桃花药
用部位的抗菌作用研究尚未见报道。本文对地桃花的体外
抑菌作用进行研究,
为今后合理开发和利用地桃花药材提
表8 质量对比
项目 神威药业(051105-1) 神威药业(051105-2) 神威药业(051109-1) 河南省宛西制药(050308)
性 状
为亮黑色的浓缩丸;气微,
味甜、辛、而后苦。
为亮黑色的浓缩丸;气微,
味甜、辛、而后苦。
为亮黑色的浓缩丸;气微,
味甜、辛、而后苦。
为亮黑色的浓缩丸;气微,
味甜、辛、而后苦。
鉴
别
当归对照药材
显相同颜色的蓝色
荧光斑点
显相同颜色的蓝色
荧光斑点
显相同颜色的蓝色
荧光斑点
显相同颜色的蓝色
荧光斑点
芍药苷 显相同颜色斑点 显相同颜色斑点 显相同颜色斑点 显相同颜色斑点
甘草对
照药材
显相同颜色
的荧光斑点
显相同颜色
的荧光斑点
显相同颜色
的荧光斑点
显相同颜色
的荧光斑点
检
查
水份 6.8% 7.0% 6.5% 9.0%
平均丸重 0.1818g 0.1800g 0.1833g 0.1799g
重量差异 -2.4%~+4.5% -4.5%~+2.9% -4.7%~+3.7% -3.5%~+4.0%
溶散时限 38min 38min 39min 37min
含量测定:芍药苷 1.28mg/丸 1.24mg/丸 1.28mg/丸 1.27mg/丸
参考文献:
[1] 庄秋虹.高效液相干色谱法测定逍遥丸中芍药苷的含量[J].
海峡药学,2004,16(2):50-52.
(责任编辑:姜付平)
—92—
供依据,现报道如下。
1 实验材料与仪器
1.1 实验材料与试剂
地桃花药材2009年9月采自广西博白县,经广西中医
学院药用植物园陈文丽老师鉴定为锦葵科植物肖梵天花
Urena lobata L.的干燥地上部分;金黄色葡萄球菌CMCC
(B)26003、铜绿假单胞菌CMCC(B)10104、大肠埃希菌CM-
CC(B)44102、肺炎链球菌CMCC(B)31003、普通变形杆菌
CMCC(B)49102,均购自广西壮族自治区食品药品检验所,
并由广西中医学院微生物与免疫学教研室保种;肉汤(北京
陆桥商检新技术公司);营养肉汤(国药集团化学试剂有限
公司);营养琼脂(国药集团化学试剂有限公司);其他试剂
均为分析纯。
1.2 仪器
AE100电子分析天平(瑞士梅特勒公司);电热恒温培
养箱(上海医疗器械七厂);压力蒸汽灭菌器(上海医用核子
仪器厂);电热蒸馏水器(北京市医疗设备厂);电热恒温鼓
风干燥箱(上海跃进医疗器械厂);无菌净化工作台(苏净集
团苏州安泰空气技术有限公司)。
2 实验方法与结果
2.1 地桃花水提物的制备
取药材粗粉100g,加10倍量蒸馏水浸泡20min后,加
热煮沸1h,滤过,药渣再加8倍量蒸馏水煮沸1h,将两次滤
液合并,浓缩至1g·mL-1,放置备用。
2.2 菌种的培养
从琼脂斜面上分别挑出受试菌株的菌落,接种到10mL
肉汤里摇匀,置37℃恒温培养箱培养24h后,从培养24h的
肉汤中取一环接种至新鲜配制并灭菌的肉汤里,37℃恒温
培养箱培养6h。采用比浊法将各待测菌用生理盐水稀释到
108CFU·mL-1。
2.3 含药琼脂的制备
取10个无菌平皿,编号。分别取15mL地桃花水提物
(调节pH值7.2)依次进行2倍稀释(10个浓度),将已稀释
好的地桃花水提物分别加入冷却至55℃左右的琼脂培养基
中,混匀,加入已做好标记的平板内,制成浓度分别为500、
250、125、62.5、31.2、15.6、7.81、3.91、1.95、0.976mg·mL-1
的药物平板,同时设置不含抗菌药物的生长对照平板和不
接种细菌的空白对照平板。
2.4 地桃花水提物 MIC的测定
待含药琼脂凝固后,取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞
菌、大肠埃希菌、肺炎链球菌、普通变形杆菌共5种试验菌
悬液,用接种环(1~2μL)进行接种,先接种含药浓度低的平
板,然后是含药浓度高的平板,最后接种不含抗菌药物的生
长对照平板和不含抗菌药物和不接种细菌的空白对照平
板,以检测整个实验过程中检测菌的存活状态及试验过程
中有无外来污染。将平板置37℃孵育18h,实验组与对照
组对比观察结果见表1。菌落生长被完全抑制的最低浓度
为该药对检测菌的 MIC。结果见表2。
实验结果表明,地桃花水提物对金黄色葡萄球菌、铜绿
表1 地桃花水提物体外抗菌试验结果
编号
浓度
(mg·
mL-1)
金黄色葡
萄球菌
(26003)
铜绿假
单胞菌
(10104)
大肠埃
希菌
(44102)
肺炎链
球菌
(31003)
普通变
形杆菌
(49102)
1 500 — — — — —
2 250 — + — + —
3 125 — + + + —
4 62.5 + + + + +
5 31.2 + + + + +
6 15.6 + + + + +
7 7.81 + + + + +
8 3.91 + + + + +
9 1.95 + + + + +
10 0.976 + + + + +
对照组 \ + + + + +
注:“+”细菌生长;“—”无菌生长。
假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎链球菌、普通变形杆菌均有抗
菌作用,地桃花水提物对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、
大肠埃希菌、肺炎链球菌、普通变形杆菌的 MIC分别为
0.125、0.5、0.25、0.5、0.125g·mL-1。
表2 地桃花水提液最低抑菌浓度(MIC)试验结果
试验菌株(NO.) MIC(g·mL-1)
金黄色葡萄球菌(26003) 0.125
铜绿假单胞菌(10104) 0.5
大肠埃希菌(44102) 0.25
肺炎链球菌(31003) 0.5
普通变形杆菌(49102) 0.125
3 讨论
本实验采用连续稀释法进行地桃花水提物 MIC的测
定,对了解地桃花有无抗菌作用、抗菌效果如何及确定地桃
花的用药剂量和研究抗菌机理等方面具有重要意义。研究
结果表明,地桃花的水提物对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞
菌、大肠埃希菌、肺炎链球菌、普通变形杆菌均有作用,其中
对金黄色葡萄球菌与普通变形杆菌的作用比较明显。但是
体外抗菌试验的环境与体内不同,因此该水提物还需进一
步通过动物体内实验来证明其抗菌作用。
参考文献:
[1] 广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准(1990年版)[M].
南宁:广西科学技术出版社,1992:42,180.
[2] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(第十四卷)
[M].上海:上海科学技术出版社,1999:372-373.
[3] 肖何,包侠萍.肖梵天花的生药鉴定[J].海峡药学,1996,8
(3):1.
[4] 贾陆,毕跃峰,敬林林,等.地桃花化学成分研究[J].中国药
学杂志,2010,45(14):1054-1056.
[5] 贾陆,敬林林,周胜安,等.地桃花化学成分研究Ⅰ.黄酮类化
学成分[J].中国医药工业杂志,2009,40(9):662-664,702.
[6] 贾陆,郭海波,敬林林,等.地桃花化学成分研究Ⅱ.酚酸类等
化学成分[J].中国医药工业杂志,2009,40(10):746-749.
(责任编辑:宋勇刚)
—03—