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黄花补血草的组织培养及快速繁殖



全 文 :第 35卷 第 4期
2006 年 12月
内蒙古师范大学学报(自然科学汉文版)
Journal o f Inner M ongo lia No rmal University (Natura l Science Edition)
Vol. 35 No. 4
Dec. 2006
收稿日期:2006- 03- 15
作者简介:郝玉兰(1963- ),女,内蒙古包头市人 ,内蒙古师范大学高级实验师 ,主要从事植物生理研究.
黄花补血草的组织培养及快速繁殖
郝玉兰 , 徐 杰 , 闫瑞霞
(内蒙古师范大学 生命科学与技术学院 , 内蒙古 呼和浩特 010022)
摘 要:研究黄花补血草[ Limonium aureum(L. ) Hill] 的组织培养与快速繁殖. 结果表明 ,以部分下胚轴连
接两片子叶的幼苗为外植体 , 能诱导不定芽. 繁殖系数最高的培养基为 MS+6 - BA 0. 4 ~ 0. 6 mg /L+NAA
0. 05 mg / L+Sucr ose 30 g /L ,诱导生根的最佳培养基为 1 /2MS+NAA 0. 4 mg /L+Sucr ose 30 g /L .
关键词:黄花补血草;组织培养;快速繁殖;繁殖系数
中图分类号:Q 943. 1  文献标识码:A  文章编号:1001-8735(2006)04--0482--03
黄花补血草[ Limonium aureum(L.) Hill] 是白花丹科(P lumbaginaceae)补血草属植物 ,蒙名为希日-
义拉干- 其其格 ,别名为黄花苍蝇架 、金匙叶草 、金色补血草.黄花补血草为多年生草本 ,茎高 4 ~ 35 cm ,茎
基往往被有残存叶柄和红褐色鳞片;叶基生 ,长圆状匙形至披针形 ,长 1. 5 ~ 3 cm ,宽 2 ~ 5 cm;花序呈圆锥
状 ,轴密被疣状突起 ,成“之”字形曲折 ,下部多为不育枝;花萼长 5. 5 ~ 6. 5 cm ,漏斗状 ,黄色 ,萼檐金黄色 ,干
后有时变橙黄色;花期 6 ~ 8月 ,果期 7 ~ 8月[ 1] .
黄花补血草又名黄花矶松 ,为耐盐旱生植物 ,是干旱荒漠地区为数不多的野生花卉之一 ,散生于荒漠草
原和草原带的盐化低地上 ,适于轻度盐化的土壤及砂砾质 、砂质土壤 ,常生于芨芨草草甸群落和芨芨草加白
刺群落 ,多见于岭西 、呼锡高原 、乌兰察布 、阴山 、阴南丘陵 、鄂尔多斯 、东阿拉善 、西阿拉善 、贺兰山 、龙首山 、
额济纳等州.
黄花补血草花色艳美 ,繁密华贵 ,韵味独特 ,保持时间长 ,可作为插花中的配材和衬花 ,也可用来制作干
花 ,是插花艺术中不可多得的花材.其花萼可入药 ,具有止痛 、消炎 、补血的功效 ,主治各种炎症;内服治神经
痛 、月经少 、耳鸣 、乳汁少 、牙痛 、齿槽脓肿(煎水含漱)、感冒 、发烧;外用治疮疖痛肿.同时它又是防风固沙的
优良植物[ 2] .
对沙漠植物进行组织培养 ,主要是为了开发沙漠植物和繁殖沙区特有的珍稀 、濒危及难以繁殖的旱生 、
超旱生和盐生植物. 黄花补血草的种子微小 ,花萼宿存 ,在野生状态下不易发芽 ,且其自然结实率低 ,种子收
集困难 ,从而限制了它的生长繁殖 ,组织培养的成功将为大量繁殖黄花补血草的种苗提供新的途径.
1 材料和方法
表 1 培养基配方[ 3] mg /L
培养基编号
诱导不定芽 诱导不定根
6 - BA NAA 6- BA NAA
对照 0. 0 0. 00 0 0. 0
1 0. 2 0. 05 0 0. 2
2 0. 4 0. 05 0 0. 4
3 0. 6 0. 05 0 0. 6
4 0. 8 0. 05 0 0. 8
  黄花补血草花枝于 2004 年 9月采集于内
蒙古乌兰察布市大青山. 各阶段培养基配方见
表 1.
拔取小花中的种子 ,用自来水冲洗后 , 用
70%酒精消毒 2 min ,0. 1%HgCl2 消毒 8 min ,
再用蒸馏水冲洗数次 ,播种于干净湿润的滤纸
上培养 ,5 ~ 7 d后发芽长出具有两片子叶的幼
苗[ 4] .在超净工作台上 ,将幼苗用 0. 1% HgCl2
消毒 2 ~ 3min ,再用无菌水冲洗 4次 ,按无菌操
 第 4 期 郝玉兰 等:黄花补血草的组织培养及快速繁殖    
作技术要求切去胚根 ,将由部分下胚轴连接两片子叶的幼苗接种于诱导不定芽的对照(不加激素的 MS 培养
基)和 1 - 4培养基上 ,将长大的丛生叶幼苗再转接于诱导生根的 1 - 4培养基上 ,置于 HPG - 280型光照培
养箱中(光强度为2 500 lx ,光照时间为 12 h /d ,温度为 22 ~ 24℃).基本培养基为MS 培养基 ,附加30 g /L 蔗
糖 ,0. 7%琼脂粉 ,pH =5. 6 ~ 5. 8.外植体生长分化情况见表 2.
表 2 不同浓度 6 - BA 对黄花补血草愈伤组织诱导率及不定芽增值系数的影响
培养基 成活株数 愈伤组织诱导率(%) 新生不定芽数 不定芽增值系数 生长状况
对照 6 0 0 0 细胞无分化
1 6 67 13 2. 1 绿色较小
2 8 100 45 5. 6 深绿健壮
3 10 100 68 6. 8 深绿健壮
4 5 0 0 0 无分化
2 结果与分析
2. 1 不同浓度 6 - BA对黄花补血草不定芽增殖系数的影响
接入对照和 1 - 4培养基的外植体数为每瓶 10株 ,诱导不定芽. 7 d后可见 2号和 3号培养基中的幼苗
明显长大并长出第一对真叶;15 d左右 2号和 3号培养基中的大部分幼苗成为具有 6 ~ 8片丛生叶的幼苗 ,
而 1号和 4号培养基中只有少数幼苗长出真叶 ,成为有 4 ~ 6片丛生叶的幼苗(见图 1),对照中的幼苗只有
一对真叶 ,高且有明显的茎段;30 d后 2号和 3号培养基中成活的全部幼苗基部膨大产生愈伤组织 , 5 ~ 7 d
后芽点出现 ,1号培养基中的部分丛生叶幼苗基部膨大 ,愈伤组织较小 ,芽点出现较晚 , 4号培养基和对照培
养基中不产生愈伤组织(对照培养基中的幼苗只长高且真叶少),各种培养基的愈伤组织诱导率如表 2所示;
50 d后 2号和 3号培养基中的大量不定芽长成具有 4 ~ 8片叶的丛生叶幼苗(见图 2),新生的丛生叶幼苗数
见表 2.
由表 2可以看出 ,在有少量的 NAA 且浓度一定的情况下 , 6 - BA的浓度变化对外植体生长和不定芽增
殖系数有明显影响 , 6 - BA 的浓度偏低或偏高都不利于愈伤组织和不定芽分化;6 - BA 的浓度为 0. 4 ~
0. 6 mg /L时 ,外植体生长良好 ,产生的愈伤组织明显且分化出较多的不定芽 ,并长成健壮的丛生叶幼苗 ,增
殖系数最高.可见 ,黄花补血草的组织培养和快速繁殖必须有外源激素诱导外植体(由部分下胚轴连接两片
子叶的幼苗)产生愈伤组织 ,以不更换培养基而一次性成芽的培养基 MS+6 - BA 0. 4 ~ 0. 6 mg /L +NAA
0. 05 mg /L+Sucrose 30 g /L 的效果最好.
   图 1 黄花补血草丛生叶苗基部产生愈伤组织          图 2 黄花补血草增殖不定芽苗
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    内蒙古师范大学学报(自然科学汉文版) 第 35 卷 
2. 2 诱导生根
将 1 cm 左右的小丛生叶幼苗转接到重新配制的 3号培养基上 ,进行继代培养 ,再将高于 2 cm 的幼苗转
接到诱导生根培养基 1 - 4上. 10 d时可以看到 2 、3和 4号培养基的幼苗基部都有白色根原基出现;20 d时
1号培养基中多数幼苗的基部有 2 ~ 3条 0. 5 ~ 1 cm 长的白色小根 ,2号和 3号培养基中幼苗的根有3 ~ 6条 ,
长 1 ~ 2 cm ,4号培养基中的幼苗基部轮生短而细的小根;30 d时 ,1 号中幼苗的根较少 ,每株有2 ~ 4条 ,长
1 ~ 4 cm ,2号和 3号中每株有 4 ~ 7条根 ,长 2 ~ 4 cm ,2号中幼苗的根较粗 ,4号中幼苗的根较多 ,但又细又
短.结果表明 ,诱导丛生叶幼苗生根的最好培养基为 1 /2M S+NAA 0. 4mg /L+Sucrose 30 g /L.
3 讨论
实验中用黄花补血草种子萌发形成的有两片子叶的幼苗切去胚根后作为外植体 ,避免了到野外采摘幼
苗的不方便 、位置不确定或得到外植体的时间过长(从播种黄花补血草的种子到长成高 4 ~ 5 cm 的幼苗需要
1个多月)等麻烦;外植体先长成健壮的单株无根丛生叶幼苗 ,然后进入愈伤组织阶段 ,这一阶段时间短 ,不
需要更换培养基就可以分化出不定芽 ,并长成多株丛生叶幼苗 ,这样缩短了诱导黄花补血草形态建成的时
间 ,从而为黄花补血草的快速繁殖以及进行庭院栽培提供了初步的理论和实验依据. 但是 ,要最终达到快速
繁殖进行庭院栽培的目的 ,还有许多问题有待于进一步研究和探讨 ,如是否还有更理想的不同激素浓度配比
的培养基能够诱导产生繁殖系数更高的不定芽 ,在诱导根以前用添加适量赤霉素的培养基进行壮苗培养 ,然
后再诱导生根的效果是否会更好 ,能否将达到足够高度的有根 、茎 、叶的试管苗进行驯化移栽等.
参考文献:
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[ 4]  刘家琼. 固沙植物组织培养 [ M] . 兰州:甘肃技术出版社 , 1992:32 - 34.
[ 5]  朱德蔚. 植物组织培养与脱毒快繁技术 [ M] . 北京:中国科学技术出版社 , 2001:11 - 12.
Tissue Culture and Rapid Propagation of Limonium aureum
HAO Yu-lan , XU Jie , YAN Rui-x ia
(College of Li fe S ciences and Technology , I nner Mongolia Normal University , Huhhot 010022 , China)
Abstract:The optimum condi tions fo r tissue culture and rapid propagation of Limonium aureum(L. )
Hill w as dete rmined. The results show that using tw o co ty iedons of Limonium aureum which is connected
by part hypoco ty ls as explants , the optimum medium is M S supplemented wi th 6 - BA 0. 4 ~ 0. 6 mg /L ,
NAA 0. 05 mg /L and Sucro se 30 g /L for the induction of Limonium aureum which has a highest mul tiplica-
tion coeff icient , and 1 /2M S supplemented w ith NAA 0. 2 mg /L and Sucrose 30 g /L fo r the adventitio us
roo ts.
Key words:Limonium aureum ;ti ssue cul ture;rapid propagation;multiplication coeff icient
【责任编辑 金淑兰】
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